במחקר זה, מערכת האכלה עבור שלבי נימפה וזחל של קרצייה קשה פותחה באמצעות כמוסה המחוברת לעכבר מעבדה. קפסולת ההאכלה עשויה מחומרים גמישים ונשארת מחוברת היטב לעכבר למשך שבוע אחד לפחות ומאפשרת ניטור נוח של הזנת קרציות.
קרציות הן טפילי הזנת דם חובה בכל שלבי הפיתוח (למעט ביצים) ומוכרות כקטורים של פתוגנים שונים. השימוש במודלים של עכבר במחקר קרציות הוא קריטי להבנת הביולוגיה שלהם ואינטראקציות פתוגן-מארח-קרציות. כאן אנו מדגימים טכניקה לא מייגעת להזנת שלבים לא בוגרים של קרציות קשות על עכברי מעבדה. היתרון של השיטה הוא הפשטות שלה, משך הזמן הקצר, ואת היכולת לפקח או לאסוף קרציות בנקודות זמן שונות של ניסוי. בנוסף, הטכניקה מאפשרת חיבור של שתי כמוסות בודדות באותו עכבר, אשר מועיל עבור מגוון רחב של ניסויים שבו שתי קבוצות שונות של קרציות נדרשים כדי לאכול על אותה חיה. הקפסולה הלא מעצבנת והגמישה עשויה מחומרים נגישים בקלות וממזערת את אי הנוחות של בעלי החיים הניסיוניים. יתר על כן, המתת חסד אין צורך, עכברים להתאושש לחלוטין לאחר הניסוי והם זמינים לשימוש חוזר.
קרציות הן וקטורים חשובים של מספר פתוגנים ומייצגים סיכון רציני לבריאות בעלי החיים והאדם1. הקמת מערכת הזנה יעילה היא קריטית כאשר לומדים את הביולוגיה שלהם, אינטראקציות טיק-מארח-פתוגן, או קביעת אמצעי בקרה יעילים. כיום, מספר מערכות הזנה מלאכותיות, הימנעות משימוש בבעלי חייםחיים,זמינות לקרציות2,3,,4, ויש לנצלן בכל פעם שתנאים ניסיוניים מאפשרים זאת. עם זאת, בהגדרות ניסיוניות שונות מערכות אלה אינן מחקות כראוי את התכונות הפיזיולוגיות הספציפיות והשימוש בבעלי חיים הוא הכרחי כדי להשיג תוצאות רלוונטיות.
עכברי מעבדה משמשים בדרך כלל למחקר של מערכות ביולוגיות רבות, הם מנוצלים באופן שגרתי כמארחים עבורקרציות האכלה 5,,6,,7,,8,,9. שתי השיטות הנפוצות ביותר להאכלת קרציות לא בוגרות בעכברים כוללות התפשטות חופשית ושימוש בחדרי כליאה המחוברים לעכבר. התפשטות חופשית משמשים בעיקר עבור שלבי זחל וקרציות גדושות יכול לרדת לאזור שבו הם יכולים להיות התאושש. תאי כליאה מורכבים בדרך כלל מכובעי אקרילי או פוליפרופילן המודבקים על גב העכבר. הטכניקה הראשונה היא מערכת טבעית יעילה להזנת קרציות, אך אינה מאפשרת ניטור צמוד במהלך הניסוי מכיוון שהקרציות הבודדות מפוזרות בחלקים שונים של הגוף המארח. בנוסף, קרציות גדושות שירדו לאזור ההחלמה עלולות להיות מזוהמות בצואהובשתן 10, 11,,12,,,13,14 שעשויות להשפיע קשות על כושר הקרציות או שהעכבר עלול להיפגעאו לאכול אותם אם אין הפרדהבין החיה לאזור ההחלמה 15 .12, מערכות מבוססות תא מאפשרות את כליאה של קרציות לאזור מוגדר, עם זאת, תהליך ההדבקה הוא מייגע ואת הכיפות לעתים קרובות חלשים דבק ולכן הם לעתים קרובות להתנתקבמהלך הניסוי 16,17,18,19. הכובעים גם נוקשים, לא נוחים, והוביל לתגובות עור, אשר למנוע שימוש חוזר בעכברים ומחייב המתת חסד שלהם לאחר הניסוי.
במחקר הקודם שלנו, פיתחנו בהצלחה מערכת יעילה באמצעות תאים עשויים אטילן-ויניל אצטט (EVA) קצף להזנת קרציות עלארנבי מעבדה 20. בזאת, התאמנו את המערכת למודל העכבר ומציעים שיטה פשוטה ונקייה כדי להזין שלבי קרציות קשיחים לא בשלים בכמוסות סגורות עשויות מקצף EVA. באופן ספציפי, המערכת שלנו משתמשת כמוסות קצף אווה אלסטי מודבק עכברים מגולחים בחזרה עם ייבוש מהיר (3 דקות), דבק לטקס לא מעצבן. טכניקה זו מאפשרת חיבור מוצק וארוך של כמוסות לעכבר הניסיוני, כמו גם התפשטות קרציות/אוסף יעיל במהלך כל הניסוי. הכמוסה השטוחה עשויה מחומרים גמישים ואינה מסתבלת במניפולציה של העכבר לצורך איסוף דם או למטרות אחרות. המערכת מתאימה בעיקר לשלבי הקרציות הנימפליות, אך עם שינוי קל ניתן להשתמש בה גם להאכלת זחלים. השיטה יכולה להסתיים על ידי אדם מנוסה אחד אחד והכשרה נרחבת אינה נדרשת.
הצעד הקריטי ביותר בפרוטוקול הוא ההתגענות איתנה של הקפסולה לעור העכבר. לכן, דבק לטקס צריך להיות מיושם הומוגנית על כל משטח קצף EVA של הקפסולה ולחץ מתמיד במשך 3 דקות יש להחיל, במיוחד בצד שמאל וימין של הקפסולה. כמו כן, אנו ממליצים על מיקום הקפסולה רחוק ככל האפשר על הגב כדי למנוע את הסרתה על ידי העכ?…
The authors have nothing to disclose.
אנו מכירים בסיוע הטכני של המכון הלאומי הלאומי אלן ברניאר למחקר חקלאי (INRAE), וOcéane Le Bidel (ANSES). המחקר נתמך על ידי דים אחד בריאות – Région איל דה פראנס (ראשי תיבות של הפרויקט: NeuroPaTick). העכברים נרכשו על ידי ANSES. ד”ר ג’פרי ל. בלייר מוכר על סקירת הגרסה הקודמת של כתב היד.
EVA-foam 2 mm thick, (low density) | Cosplay Shop | EVA-45kg (950/450/2 mm) | It can be ordered also via Amazon (ref. no. B07BLMJDXD) |
Heat Shrink Tubing Electric Wire Wrap Sleeve | Amazon | B014GMT1AM | Different diameters of Heat Shrink Tubing are available via Amazon. |
Mice BALB/cByJ | Charles River | Strain code 627 | |
Mice C57BL/6 | Charles River | Strain code 664 | |
No-toxic Latex Glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | Also available also via Amazon (ref. no. B001RQCTUU) |
Punch Tool Hand Art Tool | Amazon | B07QPWNGBF | Saled by amazon as Leather Working Tools 1-25mm Round Steel Leather Craft Cutter Working for Belt Strap |
PVC Binding Covers Transparent | Amazon | B078BNLSNP | Any transparent PVC sheet of ticknes between 0.150 mm to 0.180 mm is suitable |
Self Adhesive Pad Sponge Double Coated Foam Tape | Amazon | B07RHDZ35J | Saled by amazon as 2 Rolls Double Sided Foam Tape, Super Strong White Mounting Tape Foam |
Transparent seal stickers (20 mm diameter circles) | Amazon | B01DAA6X66 |