प्रयोगशाला चूहों पर अपरिपक्व हार्ड टिक चरणों उपद्रव के लिए एक कैप्सूल आधारित मॉडल
Summary
इस अध्ययन में, प्रयोगशाला माउस से जुड़े कैप्सूल का उपयोग करके हार्ड टिक के निम्फल और लार्वा चरणों के लिए एक भोजन प्रणाली विकसित की गई थी। खिला कैप्सूल लचीला सामग्री से बना है और कम से कम एक सप्ताह के लिए माउस से दृढ़ता से जुड़ा रहता है और टिक खिला की आरामदायक निगरानी की अनुमति देता है।
Abstract
टिक्स विकास के सभी चरणों (अंडे को छोड़कर) परजीवी अनिवार्य हैं और विभिन्न रोगजनकों के वैक्टर के रूप में पहचाने जाते हैं। टिक अनुसंधान में माउस मॉडल का उपयोग उनके जीव विज्ञान और टिक-होस्ट-रोगजनक इंटरैक्शन को समझने के लिए महत्वपूर्ण है। यहां हम प्रयोगशाला चूहों पर कठोर टिकों के अपरिपक्व चरणों को खिलाने के लिए एक गैर-श्रमसाध्य तकनीक प्रदर्शित करते हैं। विधि का लाभ इसकी सादगी, छोटी अवधि, और प्रयोग के विभिन्न समय बिंदुओं पर टिकों की निगरानी या संग्रह करने की क्षमता है। इसके अलावा, तकनीक एक ही माउस पर दो व्यक्तिगत कैप्सूल के लगाव की अनुमति देती है, जो विभिन्न प्रकार के प्रयोगों के लिए फायदेमंद है जहां एक ही जानवर को खिलाने के लिए टिकों के दो अलग-अलग समूहों की आवश्यकता होती है। गैर-परेशान और लचीला कैप्सूल आसानी से सुलभ सामग्री से बनाया जाता है और प्रायोगिक जानवरों की असुविधा को कम करता है। इसके अलावा, इच्छामृत्यु आवश्यक नहीं है, चूहों प्रयोग के बाद पूरी तरह से ठीक हो जाते हैं और फिर से उपयोग के लिए उपलब्ध हैं।
Introduction
टिक्स कई रोगजनकों के महत्वपूर्ण वैक्टर हैं और पशु और मानव स्वास्थ्य के लिए एक गंभीर जोखिम का प्रतिनिधित्व करते हैं1. उनके जीव विज्ञान, टिक-होस्ट-रोगजनक इंटरैक्शन, या प्रभावी नियंत्रण उपायों की स्थापना करते समय एक प्रभावी भोजन प्रणाली स्थापित करना महत्वपूर्ण है। वर्तमान में, कई कृत्रिम भोजन प्रणालियां, जो जीवित जानवरों के उपयोग से बचते हैं, टिक,2,,3,4 के लिए उपलब्ध हैं और जब भी प्रायोगिक स्थितियां अनुमति देती हैं तो इनका उपयोग किया जाना चाहिए। हालांकि, विभिन्न प्रयोगात्मक सेटिंग्स में ये सिस्टम विशिष्ट शारीरिक सुविधाओं की उचित नकल करने में विफल रहते हैं और प्रासंगिक परिणाम प्राप्त करने के लिए जीवित जानवरों का उपयोग आवश्यक है।
प्रयोगशाला चूहों का उपयोग आमतौर पर कई जैविक प्रणालियों के अध्ययन के लिए किया जाता है और नियमित रूप से 5 , 6 ,,7,,85,9को खिलाने के लिए मेजबान के रूप में उपयोग किया,जाताहै। चूहों पर अपरिपक्व टिकों को खिलाने के दो सबसे आम तरीकों में मुफ्त उपद्रव और माउस से जुड़े कारावास कक्षों का उपयोग शामिल है। निःशुल्क संक्रमण मुख्य रूप से लार्वा चरणों के लिए उपयोग किए जाते हैं और एनगोर्गेड टिक एक ऐसे क्षेत्र में जा सकते हैं जहां उन्हें बरामद किया जा सकता है। कारावास कक्ष आमतौर पर एक्रेलिक या पॉलीप्रोपाइलीन टोपियां से बने होते हैं जो माउस की पीठ से चिपके होते हैं। पहली तकनीक टिक फीडिंग के लिए एक प्रभावी प्राकृतिक प्रणाली है लेकिन प्रयोग के दौरान बारीकी से निगरानी की अनुमति नहीं देती है क्योंकि व्यक्तिगत टिक मेजबान शरीर के विभिन्न हिस्सों में फैले होते हैं। इसके अतिरिक्त, रिकवरी क्षेत्र में छोड़ने वाली एनगोर्गेड,टिक मल और मूत्र10, 11,12,,1513,,14से दूषित हो सकती हैं जो टिक फिटनेस को गंभीर रूप से प्रभावित कर सकती हैं यायदि जानवर और वसूली क्षेत्र के बीच कोई अलगाव नहीं है तो उन्हें माउस द्वारा क्षतिग्रस्त या खाया जा सकता है।, चैंबर-आधारित प्रणालियां एक परिभाषित क्षेत्र में टिकों के कारावास की अनुमति देती हैं, हालांकि, ग्लूइंग प्रक्रिया श्रमसाध्य होती है और टोपियां अक्सर गोंद के कमजोर अनुयायी होती हैं और इस प्रकार वे अक्सर प्रयोग16, 17,,18,,,19केदौरानअलग हो जाती हैं। टोपियां भी कठोर, असहज, और त्वचा प्रतिक्रियाओं के लिए नेतृत्व कर रहे हैं, जो चूहों के फिर से उपयोग को रोकने और प्रयोग के बाद उनकी इच्छामृत्यु की आवश्यकता है ।
हमारे पिछले अध्ययन में, हमने प्रयोगशाला खरगोशों पर टिकों को खिलाने के लिए एथिलीन-विनाइल एसीटेट (ईवा) फोम से बनेकक्षोंका उपयोग करके एक प्रभावी प्रणाली सफलतापूर्वक विकसित की। इसके साथ ही, हमने इस प्रणाली को माउस मॉडल में अनुकूलित किया और ईवा-फोम से बने बंद कैप्सूल में अपरिपक्व हार्ड टिक चरणों को खिलाने के लिए एक सरल और स्वच्छ विधि का प्रस्ताव किया। विशेष रूप से, हमारी प्रणाली तेजी से सूखने (3 मिनट), गैर परेशान लेटेक्स गोंद के साथ वापस मुंडा चूहों से चिपके लोचदार ईवा-फोम कैप्सूल का उपयोग करता है। यह तकनीक प्रयोगात्मक माउस के लिए कैप्सूल के फर्म और लंबे समय तक चलने वाले लगाव की अनुमति देता है, साथ ही प्रयोग के पूरे पाठ्यक्रम के दौरान प्रभावी टिक उपद्रव/संग्रह। फ्लैट कैप्सूल लचीला सामग्री से बना है और रक्त संग्रह या अन्य उद्देश्यों के लिए माउस के हेरफेर में बाधा नहीं है। सिस्टम मुख्य रूप से नस्ल टिक चरणों के लिए उपयुक्त है, लेकिन मामूली संशोधन के साथ इसका उपयोग लार्वा को खिलाने के लिए भी किया जा सकता है। विधि एक ही अनुभवी व्यक्ति द्वारा पूरा किया जा सकता है और व्यापक प्रशिक्षण की आवश्यकता नहीं है।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम माउस त्वचा के लिए कैप्सूल की फर्म चिपकाना है। इसलिए, लेटेक्स गोंद को कैप्सूल की पूरी ईवा-फोम सतह पर समरूप रूप से लागू किया जाना चाहिए और 3 मिनट के लिए लगातार दबाव लागू क?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम एलेन बर्नियर फ्रेंच नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ एग्रीकल्चरल रिसर्च (INRAE) और ओकेन ले बिडेल (ANSES) की तकनीकी सहायता को स्वीकार करते हैं । इस अध्ययन को डीआईएम वन हेल्थ – रेजियन आइल-डी-फ्रांस (परियोजना का संक्षिप्त नाम: न्यूरोपाटिक)द्वारा समर्थित किया गया था। चूहों को ANSES द्वारा खरीदा गया था। डॉ जेफरी एल ब्लेयर पांडुलिपि के पहले संस्करण की समीक्षा के लिए स्वीकार किया है ।
Materials
| EVA-foam 2 mm thick, (low density) | Cosplay Shop | EVA-45kg (950/450/2 mm) | It can be ordered also via Amazon (ref. no. B07BLMJDXD) |
| Heat Shrink Tubing Electric Wire Wrap Sleeve | Amazon | B014GMT1AM | Different diameters of Heat Shrink Tubing are available via Amazon. |
| Mice BALB/cByJ | Charles River | Strain code 627 | |
| Mice C57BL/6 | Charles River | Strain code 664 | |
| No-toxic Latex Glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | Also available also via Amazon (ref. no. B001RQCTUU) |
| Punch Tool Hand Art Tool | Amazon | B07QPWNGBF | Saled by amazon as Leather Working Tools 1-25mm Round Steel Leather Craft Cutter Working for Belt Strap |
| PVC Binding Covers Transparent | Amazon | B078BNLSNP | Any transparent PVC sheet of ticknes between 0.150 mm to 0.180 mm is suitable |
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| Transparent seal stickers (20 mm diameter circles) | Amazon | B01DAA6X66 |
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