Summary
Der er udviklet en robust metode til gennemførelse af forskningsforsøg i ovo-fodring ved hjælp af unicuberede kommercielle slagtekyllinger til at teste evnen af naturlige og syntetiske forbindelser, i dette tilfælde nikotinamid ribosid, til at påvirke muskeludvikling og vækst.
Abstract
Inden for de sidste tre årtier har forskere i rødt kød og fjerkræ fokuseret på at udvikle strategier og teknologier til at manipulere muskeludvikling under embryonal og føtal udvikling. Dette område er fortsat et fokusområde, fordi muskelfiberantal etableres i løbet af denne tid og bestemmer grundlaget for al fremtidig vækst. Hos fjerkræ forbedrede adskillige undersøgelser i ovo fodring af vækstfaktorer, vitaminer eller andre næringsstoffer chick embryonale muskel- og tarmudvikling. Forbedring af ovo muskeludvikling kan gavne fjerkræindustrien ved muligvis at påvirke kødudbyttet, vækstraten eller myopatiforholdene. I løbet af de sidste fem år har Gonzalez Laboratory ved University of Georgia udviklet et nikotinamid ribosid i ovo fodringsmetode til slagtekyllinger-kylling embryoner, som ændrede muskeludviklingen. Når det injiceres i et udviklende embryos æggeblommesæk, øgede nikotinamid ribosid pectoralis store muskelvægt og muskelfibertæthed ved luge. Denne protokol vil demonstrere en metode til nøjagtigt og reproducerbart at udføre ovo-fodringsforsøg ved hjælp af kommercielle standard- og højtydende slagtekyllinger. Disse data og metoder vil gøre det muligt for andre forskergrupper at udføre ovo-fodringsforsøg med stor succes og reproducerbarhed.
Introduction
Siden 1960 er USA's forbrug af kød fra fjerkræ pr. indbygger steget med en forbløffende hastighed, mens andre primære proteinkilder er forblevet stagnerende, faldet eller minimalt steget. Fjerkræindustrien investerede betydelig tid og forskningsindsats i at optimere ernæring og genetik for at producere en effektiv fugl for at følge med efterspørgslen. Fordi fjerkræindustriens hovedmål er at producere muskler til omdannelse til kød, har deres indsats drastisk ændret fuglens ultimative muskelmasse ved høst.
Som de fleste arter udvikler fjerkræ muskler på en bifasisk måde. Primær myogenese udnytter mesenkymale stamceller til at producere primære muskelfibre, der tjener som stillads for den anden bølge af muskelfiberudvikling1. Hos fjerkræ forekommer primær myogenese i embryonale dage 3 til 8, og sekundær myogenese sker fra dag 8 til 212. Når de er udviklet, tjener primære og sekundære muskelfibre som grundlag for al fremtidig muskelvækst gennem cellulær hypertrofi. Derfor brugte forskere og industri en betydelig indsats på at forsøge at manipulere primær og sekundær myogenese i alle kødproducerende arter for at maksimere kødudbyttet.
En teknologi udforsket i fjerkræ, kaldet i ovo fodring, involverer fodringsforbindelser gennem injektion. I ovo feeding, en teknologi, der anvendes af fjerkræindustrien i næsten 40 år, blev oprindeligt udviklet til vaccineadministration3. Litteraturen dokumenterer, at in ovo fodring af forskellige forbindelser og næringsstoffer i forskellige udviklingsperioder og steder i ægget positivt påvirket i ovo muskeludvikling og vækst 4,5,6. Til dato er Gonzalez Laboratory ved University of Georgia pioner i at udnytte nikotinamid ribosid i ovo fodring til at manipulere fjerkræ muskel udvikling.
Nicotinamid ribosid, en pyridin-nukleosidanalog af vitamin B3, producerer NAD + gennem bjærgningsvejen7. Da denne vej bruger færre enzymatiske trin til at producere NAD +, er produktionen den mest effektive8. Gonzalez og Jackson9 demonstrerede, at tilskud af udvikling af slagtekyllinger embryo æggeblomme sac med nicotinamid ribosid øget udklækket chick pectoralis større muskelvægt og muskelfibertæthed. Dette blev senere bekræftet af Xu et al.10, der fandt ud af, at stigende nikotinamid ribosiddosis øgede muskelvægten og øgede muskelfibertætheden. Disse to første undersøgelser blev udført i en kommerciel udbyttekylling. Fordi højtydende slagtekyllinger besidder et mere signifikant genetisk potentiale for ultimativ muskelmassestørrelse, var undersøgelsens mål at bestemme virkningerne af nikotinamidibosiddosis på højtydende slagtekyllinger udklækket chick pectoralis større muskeludvikling og vækst ved luge.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle metoder blev godkendt af University of Georgia Institutional Animal Care and Use Committee.
1. Æginkubation og behandlingsadministration
- Æg indkøb og behandling opgave
- Få unicuberede, befrugtede højtydende slagtekyllinger og transporter dem til laboratoriet.
- Undersøg og kassér æg, der anses for at være af dårlig kvalitet.
BEMÆRK: Fjern misformede æg (runde, aflange, pladesidede), revnede, beskidte / farvede, tyndskallede og rynkede. Dette er vigtigt for at minimere risikoen for rådne æg. - Tildel individuelle ægnumre, vej og registrer ægnumre og -vægte i et regnearksprogram.
- Brug regnearkssoftwareprogrammet til at sortere æg efter vægt.
- Fremhæv ægnummeret og ægvægtkolonnerne .
- Vælg fanen Data , og sorter derefter - sorter data efter ægvægt fra mindste til største.
BEMÆRK: For at få den bedste rugehastighed skal du bruge æg, der vejer mellem 40 og 70 g. - Baseret på eksperimentets design skal du tildele æg (numerisk eller alfabetisk) en injektionsbehandling og dag for eutanasi. Indtast behandlingsnummer og dag for eutanasi i separate kolonner og tildel tilfældigt disse faktorer inden for hvert lag.
BEMÆRK: Til denne publikation blev behandlinger tilfældigt tildelt inden for hvert 8-æglag.
- Generer en pivottabel i regnearkssoftwareprogrammet for at sikre, at hver behandling har lignende startægvægte.
- Fremhæv alle data i regnearket, der skal analyseres.
- Vælg Pivottabel under fanen Indsæt .
- Vælg den uafhængige variabel (kolonnen Dag for aktiv dødshjælp ) i undervinduet Pivottabelfelter , og træk til feltet Rækker .
- Vælg den uafhængige variabel (kolonnen Behandling) i undervinduet B, og træk til feltet Rækker under Dag for aktiv dødshjælp.
- Vælg den afhængige variabel af interesse (Ægvægt), og træk den til feltet Værdier .
- Skift indstillinger for værdifelt ved at klikke på den afhængige variabel og vælge Indstillinger for værdifelt.
- Skift indstillingen til Gennemsnit.
- Tildeling af bakke
- I regnearkssoftwareprogrammet skal du tildele æg til en bakke (numerisk eller alfabetisk), så behandlinger er lige repræsenteret i en bakke.
- Tildel de første fire æg med tildelte behandlinger til bakke 1. Tildel de næste fire æg til bakke 2 og fortsæt, indtil alle æg er tildelt en bakke.
BEMÆRK: Dette trin vil variere afhængigt af antallet af inkubatorer og bakker, der anvendes i eksperimentet.
- Tildel de første fire æg med tildelte behandlinger til bakke 1. Tildel de næste fire æg til bakke 2 og fortsæt, indtil alle æg er tildelt en bakke.
- I regnearkssoftwareprogrammet skal du tildele æg til en bakke (numerisk eller alfabetisk), så behandlinger er lige repræsenteret i en bakke.
- Sørg for, at alle behandlinger er lige repræsenteret på en bakke ved hjælp af pivottabelfunktionen .
- Fremhæv alle data i regnearket, der skal analyseres.
- Vælg indstillingen Pivottabel under fanen Indsæt .
- Vælg den uafhængige variabel (kolonnen Bakke ) i undervinduet Pivottabelfelter , og træk til feltet Rækker .
- Vælg den afhængige variabel af interesse (Ægvægt), og træk den til feltet Værdier .
- Skift indstillinger for værdifelt ved at klikke på den afhængige variabel og vælge Indstillinger for værdifelt.
- Skift indstillingen til Antal.
- Inkubation
- Æggene anbringes i deres passende inkubationsbakke og præinkkuberes ved 26,6 °C med 40 % ± 4 % relativ luftfugtighed i 6 timer.
BEMÆRK: Nogle inkubatorer har selvovervågningssystemer, der muligvis ikke er helt nøjagtige. Brug andre temperatur- og fugtighedsovervågningsenheder til at kontrollere forholdene. - Forøg inkubatortemperaturen til 37 °C med 40 % ± 4 % relativ luftfugtighed, og oprethold disse betingelser indtil inkubationsdag 18.
- For at sikre korrekt inkubatortemperatur måles flere ægs overfladetemperaturer i hele inkubatoren to gange dagligt med et termisk overfladetermometer for at sikre, at overfladetemperaturerne er 37 °C.
- Drej æg hver time for at omplacere.
- Optag ægvægte dagligt for at sikre 10% -12,5% ægvægttab i løbet af de første 18,5 dage af inkubation.
BEMÆRK: Hvis vægttab ikke er inden for det ønskede område, skal du justere (øge eller formindske) fugtigheden.
- Æggene anbringes i deres passende inkubationsbakke og præinkkuberes ved 26,6 °C med 40 % ± 4 % relativ luftfugtighed i 6 timer.
- Inkubation dag-10 i ovo injektioner
- Den mængde nikotinamid ribosid, der er nødvendig for hver behandling, beregnes ved hjælp af formelvægten på 290,07 g/mol, hvor 100 μL opløsning injiceres i hver æggeblommesæk.
BEMÆRK: Steril saltvand (0,9%) opløsning vil blive anvendt som fortyndingsmiddel til alle opløsninger.
Beregning: 50 æg × 100 μL = 5.000 μL (5 ml) opløsning nødvendig. Rund op til 6 ml for at sikre, at der er tilstrækkelig opløsning til rådighed til injektion (figur 1).- Når der er lavet løsninger, skal du placere dem i et vandbad på 37 °C for at holde dem ved æggens temperatur.
- Fjern æg fra inkubatoren en bakke ad gangen og dæk med et varmt håndklæde.
- Stearinlysæg til at lokalisere æggeblommesækken og rense injektionsområdet med 70% ethanol.
- Indsæt en steril 20 G, 2,54 cm hypodermisk nål ~ 1 cm i æggeskallen og injicer den tildelte dosis i æggeblommesækken. Æggene injiceres fra 0 mM nikotinamid ribosidbehandling med 100 μL sterilt saltvand (0,9%).
- Dæk straks injektionsstedet med et lille stykke absolut vandtæt tape for at undgå overdreven fugttab.
- Når alle æg har modtaget deres behandling, skal du placere bakken tilbage i inkubatoren.
- På inkubationsdag 18 skal du fjerne æg fra bakker og placere dem i rugekasser i henhold til deres behandlinger.
- Placer rugekasser i inkubatoren og øg fugtigheden til 60 ± 2%, indtil alle æg lukker eller indtil dag 23 af inkubation.
BEMÆRK: Hvis æg ikke indeholder et embryo ved candling, skal du kassere ægget. Dette forhindrer forekomsten af rådne æg.
- Den mængde nikotinamid ribosid, der er nødvendig for hver behandling, beregnes ved hjælp af formelvægten på 290,07 g/mol, hvor 100 μL opløsning injiceres i hver æggeblommesæk.
2. Eutanasi og pectoralis større muskelprøveindsamling
- Chick eutanasi
- På inkubationsdag 18 skal du fjerne de embryonale æg fra inkubatoren og placere dem ved stuetemperatur i 1 time for at ophøre med metabolismen. Fjern embryonerne fra æggene, vej uden æggeblommesækken, og halshug derefter. 12 timer efter udklækning, aflivning af kyllingerne ved udsættelse for CO2 i 10 minutter, vej, opsaml hurtigt krone-til-rumpe længdemåling og halshug derefter.
BEMÆRK: Det faktum, at fuglen ikke længere har hovedet, sikrer eutanasi. - Overvej følgende målinger (trin 2.1.2.1-2.1.2.4) ved hjælp af digitale kalibre til embryoner og kyllinger.
- For at bestemme krone-til-rumpe længde, læg kyllingen på sin side med hovedet gemt ned og benene under kroppen. Mål fra toppen af hovedet til halen.
- For at måle hovedbredden skal du måle fra det ene ørehul til det andet ørehul.
- Til bestemmelse af hovedlængde måles fra bagsiden af næb til bagsiden af kraniet.
- Tag en ikke-elastisk snor og vikl den rundt om kraniet fra det ene ørehul til det andet for at måle hovedomkredsen. Placer streng på en metrisk lineal for at opnå en måling.
- Saml brystets omkreds ved at vikle en snor rundt om brystet, under hvor vingerne kommer i kontakt med kroppen og placere strengen på en metrisk lineal for at opnå målingen.
- Spray bryster med 70% ethanol, og brug fingrene, træk fjer og hud for at afsløre pectoralis store muskler og tag målingerne (trin 2.1.4.1-2.1.4.2) med digitale kalibre.
- For at bestemme brystbredden måles over brystet, hvor vingerne kommer i kontakt med kroppen.
- For at bestemme brystlængden måles fra bunden af kravebenet til toppen af fedtpuden.
- På inkubationsdag 18 skal du fjerne de embryonale æg fra inkubatoren og placere dem ved stuetemperatur i 1 time for at ophøre med metabolismen. Fjern embryonerne fra æggene, vej uden æggeblommesækken, og halshug derefter. 12 timer efter udklækning, aflivning af kyllingerne ved udsættelse for CO2 i 10 minutter, vej, opsaml hurtigt krone-til-rumpe længdemåling og halshug derefter.
- Ekstraktion af pectoralis store muskler, måling og indsamling
- Brug kirurgisk saks eller skalpel og tang til at fjerne den højre pectoralis store muskel ved at skære langs kølbenet og frigive musklen fra kropsvæggen.
BEMÆRK: Sørg for ikke at samle pectoralis mindre muskel ved visuelt at identificere, at musklen forbliver på ribbenburet. - Når du har fjernet pectoralis hovedmuskel , skal du lægge musklen fladt på en popsicle stick og indsamle følgende målinger (trin 2.2.2.1-2.2.2.3) ved hjælp af digitale kalibre.
- For at bestemme muskellængden måles fra kranial til den kaudale del af musklen.
- For at bestemme muskelbredden måles ved den bredeste del af den kraniale del af musklen.
- For at bestemme muskeltykkelsen skal du samle brystet op med tang og måle den tykkeste del af den kraniale del af musklen.
- Hvis det ønskes, skal denne muskel og den venstre pectoralis hovedmuskel opbevares til yderligere analyser (såsom histologi, protein og genekspression osv.) ved -80 °C i op til et år.
- Brug kirurgisk saks eller skalpel og tang til at fjerne den højre pectoralis store muskel ved at skære langs kølbenet og frigive musklen fra kropsvæggen.
3. Statistik
- Analyser dataene som et helt randomiseret design med æg / kylling som eksperimentel enhed.
BEMÆRK: Nikotinamid ribosiddosis (DOS) fungerede som den faste effekt. Alle data blev analyseret med et statistisk analysesoftwareprogram (se Tabel over materialer), og parvise sammenligninger mellem mindst kvadratiske behandlingsmidler blev beregnet. Forskelle blev anset for signifikante ved P < 0,05.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Der var ingen DOS-effekter for kropsvægten af dag-18 embryoner og udklækkede kyllinger (P > 0,52; Figur 2). Der var ingen DOS-effekter for alle dag-18 embryo pectoralis store muskelmålinger (P > 0,24; Figur 3). Der var ingen DOS-effekter for udklækkede chick pectoralis større muskellængde- og breddemålinger (P > 0,26); DOS påvirkede dog muskelvægt og dybde (P < 0,03; Figur 4). Kyllinger fra embryoner, der ikke var injiceret med nicotinamid ribosid, havde pectoralis store muskler, der vejede mindre end kylling fra embryoner injiceret med 500 og 1.000 mM nikotinamid ribosid (P < 0,03), men disse behandlinger adskilte sig ikke (P = 0,41) fra hinanden. Kyllinger fra embryoner injiceret med 250 mM nikotinamid ribosid varierede ikke i pectoralis større vægt sammenlignet med de andre behandlinger (P > 0,06). Kyllinger fra embryoner injiceret med 0 og 250 mM nikotinamid ribosid havde mindre pectoralis stor dybde end kyllinger fra embryoner injiceret med 500 og 1.000 mM nikotinamid ribosid (P < 0,05), men disse behandlinger var ikke forskellige (P = 0,95). Kyllinger fra embryoner injiceret med 500 og 1.000 mM nikotinamid ribosid varierede ikke (P = 0,73) i pectoralis store dybde.
Figur 1: Nicotinamid ribosid dosis generel beregning og eksempler på de tre doser, der anvendes i det aktuelle forsøg. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Effekt af in ovo fodring af fire doser nikotinamid ribosid på (A) dag-18 embryo og (B) hatch chick kropsvægte. Embryoner blev injiceret i æggeblommesækken med fire nikotinamid ribosiddoser på dag 10 af inkubation. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Effekt af in ovo fodring af fire doser nikotinamid ribosid på dag-18 embryo pectoralis major muskel. a) Vægt. b) Længde. C) Bredde. (D) Dybde. Embryoner blev injiceret i æggeblommesækken med en af fire nikotinamid ribosiddoser på dag 10 af inkubation. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Effekt af in ovo fodring af fire doser nikotinamid ribosid på hatch chick body pectoralis major muskel. (A) Vægt. b) Længde. C) Bredde. (D) Dybde. Embryoner blev injiceret i æggeblommesækken med en af fire nikotinamid ribosiddoser på dag 10 af inkubation. a,b angiver den statistiske forskel fra hinanden inden for et undertal (P < 0,05). Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Til dato er Gonzalez Laboratory ved University of Georgia den eneste gruppe, der har vist positive virkninger af nikotinamid ribosid i ovo fodring på pectoralis større muskeludvikling og vækst. Den første undersøgelse viste, at i ovo fodring af 250 mM nicotinamid ribosid øgede muskelvægt og dimensioner, når de injiceres i æggeblommesækken9. I det opfølgende studie øgede injektionen af stigende nikotinamidibosiddosis i æggeblommen, svarende til de doser, der blev testet i den aktuelle undersøgelse, ikke pectoralis major muskelmorfometri ud over 250 mM dosis10. Disse to undersøgelser udnyttede en kommerciel udbytte slagtekyllingelinje; Derfor blev denne undersøgelse udført for at demonstrere virkningerne af in ovo fodring af højtydende slagtekyllinger embryoner med nicotinamid ribosid.
Gennem disse undersøgelser er der identificeret flere kritiske trin i denne protokol, der bestemmer succes. Denne proces er kritisk vigtig for dem, der ikke er bekendt med at vælge æg til inkubation for at reducere bakteriespredning og ikke forspændte udklækkede kyllingers resultater. For det første er det kritisk vigtigt ikke at vælge beskidte eller misformede æg, fordi de besidder bakterier, der kan hæmme de andre æg. Disse bakterier spredes hurtigt gennem inkubatoren og får forekomsten af rådne æg til at stige drastisk; hvilket påvirker antallet af embryoner og kyllinger, der er til rådighed til prøveudtagning.
Hvad angår tildeling af æg til eksperimentelle behandlinger, skal forskere bruge regnearkssoftwaremetoder beskrevet ovenfor for at sikre, at alle behandlingsstartende ægvægte er ens. Afslutning af dette trin vil blive demonstreret i embryo og hatched-chick helkrops morfometriske data. Dette vil sikre, at alle eksperimentelle behandlingsmuskelforskelle skyldes behandlingsanvendelse. Der var ingen nikotinamid ribosid virkninger på alle kroppens morfometriske foranstaltninger i Gonzalez og Jackson9 og Xu et al.10 undersøgelser. På grund af disse konsistente resultater blev kun embryo- og hatched-chick kropsvægte målt i den nuværende forskning for at fastslå en mangel på en nikotinamid ribosid effekt på helkropsmorfometri; Metoder til indsamling af helkropsmorfometri præsenteres imidlertid i denne publikation for dem, der ønsker at indsamle disse data. Der var ingen nikotinamid ribosid dosiseffekter på embryo eller chick kropsvægt i den nuværende undersøgelse, hvilket fortsatte den tendens, der tidligere blev rapporteret.
Fordi denne metode strengt påvirker sekundær myogenese, kan fremtidige forskerhold blive fristet til at injicere embryoner på et tidligere tidspunkt. I forfatternes erfaring reducerer tidlig injektion, fra inkubationsdage 0 til 5, drastisk æggets lukkbarhed med op til 70 til 80%. En tidlig injektion er en væsentlig begrænsning af teknikken. Det kunne tjene som et fremtidigt forskningsområde, men efter forfatternes erfaring er tidlig injektion skadelig for lukkbarheden, hvilket alvorligt reducerer værdien af denne teknologi.
Når man måler morfometri i pectoralis store muskel, skal forskerne overveje to afgørende overvejelser. For det første råder forfatterne en enkelt, veluddannet forsker til at fjerne alle muskler, der anvendes til morfometrisk analyse. Fordi pectoralis store muskel er så lille, kan meget uønsket variation eller bias indføres i data ved at indsamle andre muskler uden for den muskel, der er af interesse. Brug af en enkelt forsker vil sikre, at den samme muskel vil blive indsamlet i henhold til konsistente landemærker, der bruges til at identificere musklen. For det andet, når man placerer muskler på træoverfladen til måling, skal man være forsigtig med at lægge alle muskler i en naturlig position. Dette gælder især for længdemålingen, da den kan manipuleres ved at strække musklen, når den lægges ned på målefladen. Der blev ikke set nikotinamid ribosideffekter i den aktuelle undersøgelse for pectoralis major muskelmorfometri på inkubationsdag 18. Xu et al.10 rapporterede ingen pectoralis store muskelvægt- og længdeforskelle på inkubationsdag 19; således indikerer nikotinamid ribosides virkning på hele muskelmorfometri kan ikke manifestere sig før efter inkubationsdag 19 i disse to genetiske slagtekyllingelinjer.
Sammenlignet med tidligere offentliggjorte undersøgelser var en af de største ændringer i den nuværende undersøgelse brugen af kommercielt tilgængelig kapselform nikotinamid ribosid. I de tidligere undersøgelser 9,10 blev ren nikotinamid ribosid sikret fra en producent. Med hjælp fra producenten blev forskergruppen informeret om, at det kommercielle produkt, der blev anvendt i den aktuelle undersøgelse, også havde celluloseingredienser blandet ind i produktet, hvilket reducerede den beregnede koncentration af nikotinamid ribose med 34%. I denne undersøgelse var pectoralis største muskelvægt fra udklækkede kyllinger injiceret med 500 og 1.000 mM nikotinamid ribosid derfor større end kyllinger fra embryoner injiceret med 0 mM nikotinamid ribosid med henholdsvis 15 og 10%. Denne vægt steg hovedsageligt på grund af disse behandlingers pectoralis store muskeldybde, der steg med henholdsvis 17 og 7%. Dette svar var mindre end halvdelen af de tidligere svar. Xu et al.10 rapporterede nikotinamid ribosidtilskud, 250 til 1.000 mM koncentrationer, øgede pectoralis store muskelvægt med 35% på grund af øget muskellængde, bredde og dybde. Mens reduceret respons primært kan skyldes at supplere mindre nikotinamid ribosid end beregnet, er det også ukendt, om cellulosemateriale hindrede myogenese. Derfor anbefalede forfatterne al fremtidig forskning at udnytte rent nikotinamid ribosid og ikke kommercielt tilgængelige produkter.
Uanset de foreliggende resultater vil det at følge de metoder, der er skitseret i denne publikation, sikre en robust gennemførelse af in ovo-fodringsforsøg. Fremtidige forskere kan udnytte ovenstående metoder til at teste andre forbindelser, der kan påvirke slagtekyllingekylling positivt i ovo muskeludvikling og vækst.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikt at erklære.
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne takke Cobb Vantress, Inc. for donation af æggene og for at yde teknisk bistand til æginkubation. Forfatterne vil gerne takke ChromaDex, Inc. for nikotinamid ribosid teknisk assistance.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Air-Tite™ Sterile Hypodermic Needles- 20 G; 1 inch | Fisher Scientific | 14-817-208 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword= |
| Analytical Balance | VWR | VWR-214B2 | https://us.vwr.com/store/product/20970740/vwr-b2-series-analytical-and-precision-balances |
| Complete Dissection Set | DOCAZON | DK1001 | https://www.amazon.com/DOCAZON-Complete-Dissection-Set-Dissecting/dp/B07VBHKSW3 |
| Fisherbrand™ Isotemp™ General Purpose Deluxe Water Baths | Fisher Scientific | FSGPD02 | https://www.fishersci.com/shop/products/isotemp-general-purpose-water-baths/p-6448020 |
| Fisherbrand™ Sterile Syringes for Single Use | Fisher Scientific | 14-955-464 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword= |
| HIGH INTENSITY EGG CANDLER | Titan Incubators | N/A | https://www.titanincubators.com/collections/egg-candlers/products/egg-candler-high-intensity |
| Infrared Forehead Thermometer | HALIDODO | XZ-001 | |
| Microsoft Excel | Microsoft | N/A | |
| Neiko Tools Digital Caliper | Neiko Tools | 01408A | https://www.amazon.com/Neiko-01407A-Electronic-Digital-Stainless/dp/B000NEA0P8?th=1 |
| Nexcare Absolute Waterproof Tape | Nexcare Brand | 732 | https://www.nexcare.com/3M/en_US/nexcare/products/catalog/~/Nexcare-Absolute-Waterproof-Tape/?N=4326+3294529207+3294631805 &rt=rud |
| Pen Size Temperature and Humidity USB Data Logger with Display | Omega | OM-HL-SP-TH | https://www.omega.com/en-us/temperature-measurement/temperature-and-humidity-data-loggers/p/OM-HL-SP-Series |
| SAS 9.4 for Windows | SAS Institute | N/A | https://www.sas.com/en_us/home.html |
| Sportsman 1502 Incubator | GQF Manufacturing | 1502 | https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/ |
| Tru Niagen (Nicotinamide riboside) | ChromaDex, Inc. | N/A | https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ - note, contact company for pure product |
| Wood Craft Sticks | Creatology | M20001547 | https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html |
References
- Biressi, S., Molinaro, M., Cossu, G. Cellular heterogeneity during vertebrate skeletal muscle development. Developmental Biology. 308 (2), 281-293 (2007).
- Chal, J., Pourquie, O. Making muscle: Skeletal myogenesis in vivo and in vitro. Development. 144 (12), 2104-2122 (2017).
- Sharma, J., Burmester, B. Resistance of Marek's disease at hatching in chickens vaccinated as embryos with the Turkey herpesvirus. Avian Diseases. 26 (1), 134-149 (1982).
- Al-Murrani, W. K. Effect of injecting amino acids into the egg on embryonic and subsequent growth in the domestic fowl. British Poultry Science. 23 (2), 171-174 (1982).
- Ohta, Y., Kidd, M. T., Ishibashi, T. Embryo growth and amino acid concentration profiles of broiler breeder eggs, embryos, and chicks after in ovo administration of amino acids. Poultry Science. 80 (10), 1430-1436 (2001).
- Zhao, M. M., et al. In ovo feeding of creatie pyruvate increases hatching weight, growth performance, and muscle growth but has no effect on meat quality in broiler chickens. Livestock Science. 206, 59-64 (2017).
- Bieganowski, P., Brenner, C. Discoveries of nicotinamide riboside as a nutrient and conserved NRK genes establish a Preiss Handler independent route to NAD1 in fungi and humans. Cell. 117 (4), 495-502 (2004).
- Chi, Y., Sauve, A. Nicotinamide riboside, a trace nutrient in foods, is a Vitamin B3 with effects on energy metabolism and neuroprotection. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 16 (6), 657-661 (2013).
- Gonzalez, J. M., Jackson, A. R. In ovo feeding of nicotinamide riboside affects pectoralis major muscle development. Translational Animal Science. 4 (3), 1-7 (2020).
- Xu, X., Jackson, A. R., Gonzalez, J. M. The effects of in ovo nicotinamide riboside dose on broiler myogenesis. Poultry Science. 100 (3), 100926 (2021).
