Summary
Была разработана надежная методология для проведения исследований в ово-кормлении с использованием некубированных коммерческих яиц бройлеров для проверки способности природных и синтетических соединений, в данном случае никотинамид рибозида, влиять на развитие и рост мышц.
Abstract
В течение последних трех десятилетий ученые из красного мяса и птицы сосредоточились на разработке стратегий и технологий для манипулирования развитием мышц во время эмбрионального и внутриутробного развития. Эта область продолжает оставаться областью внимания, потому что количество мышечных волокон устанавливается в течение этого времени и определяет основу для всего будущего роста. На птицеводстве многочисленные исследования продемонстрировали в ово-кормлении факторы роста, витамины или другие питательные вещества, улучшающие эмбриональное развитие мышц и кишечника цыплят. Улучшение развития ово-мышц может принести пользу птицеводческой промышленности, возможно, влияя на выход мяса, скорость роста или условия миопатии. В течение последних пяти лет лаборатория Гонсалеса в Университете Джорджии разработала методологию никотинамидного рибозида в ово-кормлении эмбрионов бройлеров-цыплят, которая изменила развитие мышц. При введении в желточный мешок развивающегося эмбриона никотинамид рибозид увеличивал массу большой мышечной массы грудной клетки и плотность мышечных волокон при вылуплении. Этот протокол продемонстрирует методологию точного и воспроизводимого проведения исследований в ово-кормлении с использованием коммерческих стандартных и высокопродуктивных эмбрионов бройлеров. Эти данные и методы позволят другим исследовательским группам выполнять исследования кормления ово с большим успехом и воспроизводимостью.
Introduction
С 1960 года потребление мяса птицы на душу населения в Соединенных Штатах росло с поразительной скоростью, в то время как другие первичные источники белка оставались на прежнем уровне, снижались или минимально увеличивались. Птицеводческая промышленность вложила значительное время и исследовательские усилия в оптимизацию питания и генетики, чтобы произвести эффективную птицу, чтобы не отставать от спроса. Поскольку основной целью птицеводческой промышленности является производство мышц для преобразования в мясо, их усилия резко изменили конечную мышечную массу птицы при сборе урожая.
Как и большинство видов, домашняя птица развивает мышцы двухфазным образом. Первичный миогенез использует мезенхимальные стволовые клетки для производства первичных мышечных волокон, которые служат каркасом для второй волны развития мышечных волокон1. У домашней птицы первичный миогенез происходит в период эмбриональных дней с 3 по 8, а вторичный миогенез происходит с 8 по 212 день. После развития первичные и вторичные мышечные волокна служат основой для всего будущего роста мышц посредством клеточной гипертрофии. Поэтому ученые и промышленность потратили значительные усилия, пытаясь манипулировать первичным и вторичным миогенезом у всех видов, производящих мясо, чтобы максимизировать выход мяса.
Одна из технологий, исследованных в птицеводстве, называемая ово-кормлением, включает в себя кормление соединений через инъекции. В ово-кормлении, технология, используемая птицеводческой промышленностью в течение почти 40 лет, была первоначально разработана для введениявакцины 3. В литературе зафиксировано, что при ово-питании различными соединениями и питательными веществами в разные периоды развития и локализации внутри яйца положительно влияют на развитие и рост ово мышц 4,5,6. На сегодняшний день лаборатория Гонсалеса в Университете Джорджии является пионером в использовании никотинамид рибозида в ово-кормлении для манипулирования развитием мышц птицы.
Никотинамид рибозид, пиридин-нуклеозидный аналог витамина B3, продуцирует NAD+ через путь спасения7. Поскольку этот путь использует меньше ферментативных стадий для производства NAD+, производство является наиболее эффективным8. Гонсалес и Джексон9 продемонстрировали, что добавление развивающегося желтка эмбриона бройлера с никотинамидным рибозидом увеличивает вылупившегося цыпленка грудной клетки большую мышечную массу и плотность мышечных волокон. Позже это было подтверждено Xu et al.10, которые обнаружили, что увеличение дозы никотинамида рибозида увеличивает мышечную массу и увеличивает плотность мышечных волокон. Эти первые два исследования были проведены на коммерческом бройлере. Поскольку высокопродуктивные бройлеры обладают более значительным генетическим потенциалом для конечного размера мышечной массы, целью исследования было определение влияния дозы никотинамида рибозида на высокопродуктивного бройлера, вылупившегося цыпленка грудной клетки, основное развитие мышц и рост при вылуплении.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все методологии были одобрены Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Университета Джорджии.
1. Инкубация яйцеклеток и назначение лечения
- Закупка и обработка яиц
- Получите некульбированные, оплодотворенные высокопродуктивные яйца бройлеров и транспортируйте их в лабораторию.
- Осматривайте и выбрасывайте яйца, считающиеся некачественными.
ПРИМЕЧАНИЕ: Исключите деформированные яйца (круглые, удлиненные, плитчатые), потрескавшиеся, грязные / окрашенные, тонкой скорлупой и морщинистые. Это важно для минимизации риска тухлых яиц. - Назначайте отдельные номера яиц, взвешивайте и записывайте номера и веса яиц в программном обеспечении для работы с электронными таблицами.
- Используйте программное обеспечение для работы с электронными таблицами для сортировки яиц по весу.
- Выделите столбцы количество яиц и вес яйца .
- Выберите вкладку Данные , а затем Сортировка - сортировка данных по весу яйца от самого маленького до самого большого.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для наилучшей скорости вылупления используйте яйца весом от 40 до 70 г. - Исходя из конструкции эксперимента, назначают яйцеклеткам (в числовом или алфавитном порядке) инъекционное лечение и день эвтаназии. Введите количество лечения и день эвтаназии в отдельные столбцы и случайным образом назначьте эти факторы в пределах каждого слоя.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для этой публикации методы лечения были случайным образом распределены в пределах каждого 8-яичного слоя.
- Создайте сводную таблицу в программном обеспечении для работы с электронными таблицами, чтобы убедиться, что каждая обработка имеет одинаковый начальный вес яйцеклеток.
- Выделите все данные в электронной таблице для анализа.
- Выберите параметр Сводная таблица на вкладке Вставка .
- Выберите независимую переменную (столбец «День эвтаназии ») в подокне «Поля сводной таблицы» и перетащите его в поле «Строки ».
- Выберите независимую переменную (столбец «Лечение ») в подокне B и перетащите его в поле «Строки» в разделе «День эвтаназии».
- Выберите интересующую зависимую переменную (Вес яйца) и перетащите ее в поле «Значения ».
- Измените параметры поля «Значение », щелкнув зависимую переменную и выбрав Параметры поля значения.
- Измените значение параметра на Среднее.
- Назначение лотка
- В программном обеспечении для работы с электронными таблицами назначайте яйца в лоток (в числовом или алфавитном порядке), чтобы обработки были одинаково представлены в лотке.
- Назначают первые четыре яйца с назначенными процедурами на лоток 1. Назначьте следующие четыре яйца в лоток 2 и продолжайте до тех пор, пока все яйца не будут назначены на лоток.
ПРИМЕЧАНИЕ: Этот шаг будет варьироваться в зависимости от количества инкубаторов и лотков, используемых в эксперименте.
- Назначают первые четыре яйца с назначенными процедурами на лоток 1. Назначьте следующие четыре яйца в лоток 2 и продолжайте до тех пор, пока все яйца не будут назначены на лоток.
- В программном обеспечении для работы с электронными таблицами назначайте яйца в лоток (в числовом или алфавитном порядке), чтобы обработки были одинаково представлены в лотке.
- Убедитесь, что все обработки одинаково представлены на панели задач с помощью функции сводной таблицы .
- Выделите все данные в электронной таблице для анализа.
- Выберите параметр Сводная таблица на вкладке Вставка .
- Выберите независимую переменную (столбец области уведомлений ) во вложенном окне Поля сводной таблицы и перетащите его в поле Строки .
- Выберите интересующую зависимую переменную (Вес яйца) и перетащите ее в поле «Значения ».
- Измените параметры поля «Значение », щелкнув зависимую переменную и выбрав Параметры поля значения.
- Измените параметр на Счетчик.
- Инкубация
- Поместите яйца в соответствующий инкубационный лоток и предварительно инкубируйте их при 26,6 °C с 40% ± 4% относительной влажности в течение 6 ч.
ПРИМЕЧАНИЕ: Некоторые инкубаторы имеют системы самоконтроля, которые могут быть не совсем точными. Используйте другие устройства контроля температуры и влажности для контроля условий. - Увеличьте температуру инкубатора до 37 °C с 40% ± 4% относительной влажности и поддерживайте эти условия до 18-го дня инкубации.
- Чтобы обеспечить надлежащую температуру инкубатора, измеряйте температуру поверхности нескольких яиц по всему инкубатору два раза в день с помощью термометра тепловой поверхности, чтобы убедиться, что температура поверхности составляет 37 ° C.
- Поворачивайте яйца ежечасно, чтобы изменить положение.
- Регистрируйте вес яиц ежедневно, чтобы обеспечить потерю веса яиц на 10-12,5% в течение первых 18,5 дней инкубации.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если потеря веса не находится в нужном диапазоне, отрегулируйте (увеличьте или уменьшите) влажность.
- Поместите яйца в соответствующий инкубационный лоток и предварительно инкубируйте их при 26,6 °C с 40% ± 4% относительной влажности в течение 6 ч.
- Инкубационный день-10 в ово инъекциях
- Рассчитайте количество никотинамида рибозида, необходимого для каждого лечения, используя вес формулы 290,07 г / моль, с 100 мкл раствора, введенного в желточный мешок каждого яйца.
ПРИМЕЧАНИЕ: Стерильный физиологический раствор (0,9%) раствор будет использоваться в качестве разбавителя для всех растворов.
Расчет: 50 яиц × 100 мкл = 5000 мкл (5 мл) необходимого раствора. Округлите до 6 мл, чтобы обеспечить наличие достаточного количества раствора для инъекций (рисунок 1).- После того, как растворы сделаны, поместите их в водяную баню 37 ° C, чтобы сохранить их при температуре яиц.
- Вынимайте яйца из инкубатора по одному лотку за раз и накрывайте теплым полотенцем.
- Свечное яйцо для расположения желточного мешочка и очистки области инъекции 70% этанолом.
- Вводят стерильную 20 г, 2,54 см подкожную иглу ~1 см в яичную скорлупу и вводят назначенную дозу в желточный мешок. Вводят яйца из 0 мМ никотинамида рибозида со 100 мкл стерильного физиологического раствора (0,9%).
- Немедленно накройте место инъекции небольшим кусочком абсолютной водонепроницаемой ленты, чтобы избежать чрезмерной потери влаги.
- После того, как все яйца прошли обработку, поместите лоток обратно в инкубатор.
- На 18-й день инкубации извлеките яйца из лотков и поместите их в инкубационные ящики в соответствии с их обработкой.
- Поместите инкубатор в инкубатор и увеличьте влажность до 60 ± 2% до тех пор, пока не вылупятся все яйца или до 23-го дня инкубации.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если яйца не содержат эмбриона при ковырянии, выбросьте яйцо. Это предотвратит возникновение тухлых яиц.
- Рассчитайте количество никотинамида рибозида, необходимого для каждого лечения, используя вес формулы 290,07 г / моль, с 100 мкл раствора, введенного в желточный мешок каждого яйца.
2. Забор образцов основных мышц эвтаназии и грудной клетки
- Эвтаназия цыплят
- На 18-й день инкубации вынимают эмбриональные яйца из инкубатора и помещают их при комнатной температуре на 1 ч, чтобы прекратился метаболизм. Извлеките эмбрионы из яиц, взвесьте без желточного мешка, а затем обезглавливайте. Через 12 часов после вылупления усыпните птенцов под воздействием CO2 в течение 10 мин, взвесьте, быстро соберите размер кроны до крестца, а затем обезглавливайте.
ПРИМЕЧАНИЕ: Тот факт, что у птицы больше нет головы, обеспечивает эвтаназию. - Рассмотрим следующие измерения (этапы 2.1.2.1-2.1.2.4) с использованием цифровых суппортов для эмбрионов и цыплят.
- Для определения длины от кроны до крестца уложите птенца на бок с заправленной вниз головой и ногами под телом. Измерьте от макушки головы до хвоста.
- Чтобы измерить ширину головы, измерьте от одного ушного отверстия до другого ушного отверстия.
- Для определения длины головы измеряйте от задней части клюва до задней части черепа.
- Возьмите неэластичную веревку и оберните ее вокруг черепа от одного отверстия уха до другого, чтобы измерить окружность головы. Поместите строку на метрическую линейку, чтобы получить измерение.
- Соберите окружность груди, обернув веревку вокруг груди, под которой крылья соприкасаются с телом и поместив струну на метрическую линейку, чтобы получить измерение.
- Опрыскивайте грудь 70% этанолом и пальцами потяните перья и кожу, чтобы выявить основные грудные мышцы и проведите измерения (шаги 2.1.4.1-2.1.4.2) цифровыми суппортами.
- Чтобы определить ширину груди, измерьте поперек груди, где крылья соприкасаются с телом.
- Для определения длины груди измеряют от нижней части ключицы до верхней части жировой подушки.
- На 18-й день инкубации вынимают эмбриональные яйца из инкубатора и помещают их при комнатной температуре на 1 ч, чтобы прекратился метаболизм. Извлеките эмбрионы из яиц, взвесьте без желточного мешка, а затем обезглавливайте. Через 12 часов после вылупления усыпните птенцов под воздействием CO2 в течение 10 мин, взвесьте, быстро соберите размер кроны до крестца, а затем обезглавливайте.
- Экстракция большой грудной мышцы, измерение и сбор
- С помощью хирургических ножниц или скальпеля и щипцов удалите правую большую грудную мышцу, разрезав вдоль килевой кости и освободив мышцу от стенки тела.
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что вы не собираете малую грудную мышцу, визуально определяя, что мышца остается на грудной клетке. - После удаления большой грудной мышцы положите мышцу плоско на палочку эскимо и соберите следующие измерения (шаги 2.2.2.1-2.2.2.3) с помощью цифровых суппортов.
- Для определения длины мышцы измерьте от черепной до каудальной части мышцы.
- Для определения ширины мышцы измеряют в самой широкой части черепной части мышцы.
- Для определения толщины мышц подберите грудь щипцами и отмерьте на самом толстом участке черепной части мышцы.
- При желании храните эту мышцу и левую большую грудную мышцу для дальнейших анализов (таких как гистология, экспрессия белка и генов и т. Д.) При -80 ° C в течение года.
- С помощью хирургических ножниц или скальпеля и щипцов удалите правую большую грудную мышцу, разрезав вдоль килевой кости и освободив мышцу от стенки тела.
3. Статистика
- Анализируйте данные как полностью рандомизированный дизайн с яйцом / цыпленком в качестве экспериментальной единицы.
ПРИМЕЧАНИЕ: Доза никотинамида рибозида (DOS) служила фиксированным эффектом. Все данные анализировались с помощью программного обеспечения для статистического анализа (см. Таблицу материалов) и вычислялись попарные сравнения между наименьшими квадратными средствами обработки. Различия были признаны значительными при P < 0,05.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Не было выявлено эффектов DOS для массы тела эмбрионов 18-го дня и вылупившихся цыплят (P > 0,52; Рисунок 2). Не было никаких эффектов DOS для всех измерений основных мышц грудной клетки эмбриона на 18-й день (P > 0,24; Рисунок 3). Не было выявлено эффектов DOS для измерения длины и ширины большой длины и ширины вылупившегося цыпленка грудной клетки (P > 0,26); однако DOS влиял на мышечную массу и глубину (P < 0,03; Рисунок 4). Цыплята из эмбрионов, которым не вводили никотинамид рибозид, имели основные грудные мышцы, которые весили меньше, чем цыплята из эмбрионов, которым вводили 500 и 1000 мМ никотинамида рибозида (P < 0,03), но эти методы лечения не отличались (P = 0,41) друг от друга. Цыплята из эмбрионов, которым вводили 250 мМ никотинамида рибозида, не изменяли основную массу грудной клетки по сравнению с другими методами лечения (P > 0,06). Цыплята из эмбрионов, которым вводили 0 и 250 мМ никотинамида рибозида, имели меньшую глубину грудной клетки, чем цыплята из эмбрионов, которым вводили 500 и 1000 мМ никотинамид рибозида (P < 0,05), но эти методы лечения не отличались (P = 0,95). Цыплята из эмбрионов, которым вводили 500 и 1000 мМ никотинамида рибозида, не изменяли (P = 0,73) на большой глубине грудной клетки .
Рисунок 1: Общий расчет дозы никотинамида рибозида и примеры трех доз, используемых в текущем эксперименте. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Эффект при ово-кормлении четырех доз никотинамида рибозида на (А) день-18 эмбриона и (В) вылупления массы тела цыпленка. Эмбрионы вводили в желточный мешок четырьмя дозами никотинамида рибозида на 10-й день инкубации. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: Эффект при овоскормлении четырех доз никотинамида рибозида на 18 день эмбриона грудной клетки большой мышцы. а) Вес. B) Длина. (C) Ширина. D) Глубина. Эмбрионы вводили в желточный мешок одной из четырех доз никотинамида рибозида на 10-й день инкубации. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4: Влияние при ово-кормлении четырех доз никотинамида рибозида на выводное тело цыпленка грудной клетки большой мышцы. (А) Вес. B) Длина. (C) Ширина. D) Глубина. Эмбрионы вводили в желточный мешок одной из четырех доз никотинамида рибозида на 10-й день инкубации. a,b обозначает статистическую разницу друг от друга в пределах субфигуры (P < 0,05). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
На сегодняшний день лаборатория Гонсалеса в Университете Джорджии является единственной группой, которая продемонстрировала положительное влияние никотинамид рибозида в ово , питаясь грудными мышцами, на развитие и рост основных мышц грудной клетки . Первое исследование показало, что при ово-кормлении 250 мМ никотинамида рибозид увеличивал мышечную массу и габариты при введении в желточныймешок 9. В последующем исследовании введение увеличивающейся дозы никотинамида рибозида в желток, аналогично дозы, протестированным в текущем исследовании, не увеличивало морфометрию большой грудной мышцы сверх дозы 250 мМ10. В этих двух исследованиях использовалась коммерческая линия бройлеров; Поэтому данное исследование было проведено для демонстрации эффектов при ово-кормлении высокопродуктивных эмбрионов бройлеров никотинамид рибозидом.
Благодаря этим исследованиям было определено несколько критических шагов, расположенных в этом протоколе, которые определяют успех. Этот процесс критически важен для тех, кто не знаком с отбором яиц для инкубации, чтобы уменьшить распространение бактерий и не искажать результаты вылупившихся цыплят. Во-первых, критически важно не выбирать грязные или деформированные яйца, потому что они содержат бактерии, которые могут помешать другим яйцам. Эти бактерии будут быстро распространяться через инкубатор и приведут к резкому увеличению заболеваемости тухлыми яйцами; таким образом, влияя на количество эмбрионов и цыплят, доступных для отбора проб.
Что касается назначения яйцеклеток для экспериментальных методов лечения, исследователи должны использовать методы программного обеспечения для электронных таблиц, описанные выше, чтобы обеспечить равный вес всех начальных яйцеклеток. Завершение этого шага будет продемонстрировано в морфометрических данных эмбриона и вылупившегося цыпленка всего тела. Это гарантирует, что все экспериментальные различия в лечении мышц связаны с применением лечения. В исследованиях Gonzalez and Jackson9 и Xu et al.10 не было влияния никотинамида рибозида на все морфометрические показатели организма. Из-за этих последовательных результатов в текущих исследованиях была измерена только масса тела эмбриона и вылупившегося цыпленка, чтобы установить отсутствие влияния никотинамида рибозида на морфометрию всего тела; однако методологии сбора морфометрии всего тела представлены в этой публикации для тех, кто желает собрать эти данные. В текущем исследовании не было никакого влияния дозы никотинамида рибозида на массу тела эмбриона или цыпленка, продолжая тенденцию, о которой сообщалось ранее.
Поскольку эта методология строго влияет на вторичный миогенез, у будущих исследовательских групп может возникнуть соблазн ввести эмбрионы в более ранний момент времени. По опыту авторов, ранняя инъекция, от инкубационных дней от 0 до 5, резко снижает выводимость яиц до 70-80%. Ранняя инъекция является существенным ограничением техники. Это может служить будущей областью исследований, но, по опыту авторов, ранняя инъекция наносит ущерб выводимости, что серьезно снижает ценность этой технологии.
При измерении морфометрии большой грудной мышцы исследователи должны обдумать два важных соображения. Во-первых, авторы советуют одному, хорошо обученному исследователю удалить все мышцы, используемые для морфометрического анализа. Поскольку большая грудная мышца настолько мала, в данные могут быть введены нежелательные вариации или смещения путем сбора других мышц за пределами интересующей мышцы. Использование одного исследователя гарантирует, что одна и та же мышца будет собрана в соответствии с последовательными ориентирами, используемыми для идентификации мышцы. Во-вторых, при размещении мышц на деревянной поверхности для измерения необходимо соблюдать осторожность в укладке всех мышц в естественное положение. Это особенно верно для измерения длины, так как им можно манипулировать, растягивая мышцу при укладке ее на поверхность измерения. В текущем исследовании для морфометрии основных мышц грудной клетки на 18-й день инкубации не наблюдалось никаких эффектов никотинамидных рибозидов. Xu et al.10 сообщили об отсутствии различий в массе и длине мышц грудной клетки на 19-й день инкубации; таким образом, указание на влияние никотинамида рибозида на морфометрию всей мышцы может проявляться только после 19-го дня инкубации в этих двух генетических линиях бройлеров.
По сравнению с ранее опубликованными исследованиями, одной из основных модификаций в текущем исследовании было использование коммерчески доступной капсульной формы никотинамида рибозида. В предыдущих исследованиях 9,10 чистый никотинамид рибозид был получен от производителя. При содействии производителя исследовательская группа была проинформирована о том, что коммерческий продукт, используемый в текущем исследовании, также содержал целлюлозные ингредиенты, смешанные с продуктом, что снизило расчетную концентрацию никотинамид рибозы на 34%. Таким образом, в настоящем исследовании большая мышечная масса грудной клетки у вылупившихся цыплят, которым вводили 500 и 1000 мМ никотинамида рибозида, была больше, чем у цыплят из эмбрионов, которым вводили 0 мМ никотинамида рибозида на 15 и 10% соответственно. Этот вес увеличился в основном из-за того, что глубина большой мышцы грудной клетки увеличилась на 17 и 7% соответственно. Этот ответ составил менее половины предыдущих ответов. Xu et al.10 сообщили о добавках никотинамида рибозида, концентрациях от 250 до 1000 мМ, увеличении массы большой мышечной массы грудной клетки на 35% из-за увеличения длины, ширины и глубины мышц. Хотя снижение реакции может быть в первую очередь связано с добавлением меньшего количества никотинамид рибозида, чем рассчитано, также неизвестно, препятствовал ли целлюлозный материал миогенезу. Поэтому авторы рекомендовали во всех будущих исследованиях использовать чистый никотинамид рибозид, а не коммерчески доступные продукты.
Независимо от нынешних результатов, следование методологиям, изложенным в этой публикации, обеспечит надежное выполнение исследований кормления ово . Будущие исследователи могут использовать вышеуказанные методы для тестирования других соединений, которые могут положительно повлиять на развитие и рост ово-мышц .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют права заявлять о конфликте интересов.
Acknowledgments
Авторы хотели бы поблагодарить Cobb Vantress, Inc. за пожертвование яйцеклеток и оказание технической помощи в инкубации яйцеклеток. Авторы хотели бы поблагодарить компанию ChromaDex, Inc. за техническую помощь в области никотинамида рибозида.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Air-Tite™ Sterile Hypodermic Needles- 20 G; 1 inch | Fisher Scientific | 14-817-208 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword= |
| Analytical Balance | VWR | VWR-214B2 | https://us.vwr.com/store/product/20970740/vwr-b2-series-analytical-and-precision-balances |
| Complete Dissection Set | DOCAZON | DK1001 | https://www.amazon.com/DOCAZON-Complete-Dissection-Set-Dissecting/dp/B07VBHKSW3 |
| Fisherbrand™ Isotemp™ General Purpose Deluxe Water Baths | Fisher Scientific | FSGPD02 | https://www.fishersci.com/shop/products/isotemp-general-purpose-water-baths/p-6448020 |
| Fisherbrand™ Sterile Syringes for Single Use | Fisher Scientific | 14-955-464 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword= |
| HIGH INTENSITY EGG CANDLER | Titan Incubators | N/A | https://www.titanincubators.com/collections/egg-candlers/products/egg-candler-high-intensity |
| Infrared Forehead Thermometer | HALIDODO | XZ-001 | |
| Microsoft Excel | Microsoft | N/A | |
| Neiko Tools Digital Caliper | Neiko Tools | 01408A | https://www.amazon.com/Neiko-01407A-Electronic-Digital-Stainless/dp/B000NEA0P8?th=1 |
| Nexcare Absolute Waterproof Tape | Nexcare Brand | 732 | https://www.nexcare.com/3M/en_US/nexcare/products/catalog/~/Nexcare-Absolute-Waterproof-Tape/?N=4326+3294529207+3294631805 &rt=rud |
| Pen Size Temperature and Humidity USB Data Logger with Display | Omega | OM-HL-SP-TH | https://www.omega.com/en-us/temperature-measurement/temperature-and-humidity-data-loggers/p/OM-HL-SP-Series |
| SAS 9.4 for Windows | SAS Institute | N/A | https://www.sas.com/en_us/home.html |
| Sportsman 1502 Incubator | GQF Manufacturing | 1502 | https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/ |
| Tru Niagen (Nicotinamide riboside) | ChromaDex, Inc. | N/A | https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ - note, contact company for pure product |
| Wood Craft Sticks | Creatology | M20001547 | https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html |
References
- Biressi, S., Molinaro, M., Cossu, G. Cellular heterogeneity during vertebrate skeletal muscle development. Developmental Biology. 308 (2), 281-293 (2007).
- Chal, J., Pourquie, O. Making muscle: Skeletal myogenesis in vivo and in vitro. Development. 144 (12), 2104-2122 (2017).
- Sharma, J., Burmester, B. Resistance of Marek's disease at hatching in chickens vaccinated as embryos with the Turkey herpesvirus. Avian Diseases. 26 (1), 134-149 (1982).
- Al-Murrani, W. K. Effect of injecting amino acids into the egg on embryonic and subsequent growth in the domestic fowl. British Poultry Science. 23 (2), 171-174 (1982).
- Ohta, Y., Kidd, M. T., Ishibashi, T. Embryo growth and amino acid concentration profiles of broiler breeder eggs, embryos, and chicks after in ovo administration of amino acids. Poultry Science. 80 (10), 1430-1436 (2001).
- Zhao, M. M., et al. In ovo feeding of creatie pyruvate increases hatching weight, growth performance, and muscle growth but has no effect on meat quality in broiler chickens. Livestock Science. 206, 59-64 (2017).
- Bieganowski, P., Brenner, C. Discoveries of nicotinamide riboside as a nutrient and conserved NRK genes establish a Preiss Handler independent route to NAD1 in fungi and humans. Cell. 117 (4), 495-502 (2004).
- Chi, Y., Sauve, A. Nicotinamide riboside, a trace nutrient in foods, is a Vitamin B3 with effects on energy metabolism and neuroprotection. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 16 (6), 657-661 (2013).
- Gonzalez, J. M., Jackson, A. R. In ovo feeding of nicotinamide riboside affects pectoralis major muscle development. Translational Animal Science. 4 (3), 1-7 (2020).
- Xu, X., Jackson, A. R., Gonzalez, J. M. The effects of in ovo nicotinamide riboside dose on broiler myogenesis. Poultry Science. 100 (3), 100926 (2021).
