Summary
Her beskriver vi metoden for å generere en kunstig decidualiseringsmodell ved hjelp av ovariektomisert mus, et klassisk endometrial decidualiseringseksperiment i forskningsfeltet endometrial decidualization.
Abstract
Endometrial decidualization er en unik differensieringsprosess av endometrium, nært knyttet til menstruasjon og graviditet. Forringelse av decidualisering fører til ulike endometrieforstyrrelser, som infertilitet, tilbakevendende abort og for tidlig fødsel. Utviklingen og bruken av endometrial decidualiseringsmodellen i reproduktive studier har vært et høydepunkt for reproduktive forskere i lang tid. Musen har blitt mye brukt i å studere reproduksjon og decidualization. Det er tre veletablerte musemodeller angående decidualisering, nemlig naturlig graviditetsdecidualisering (NPD), kunstig decidualisering (AD) og in vitro decidualisering (IVD). Blant dem anses AD som en pålitelig modell for musedecidualisering, som er enkel å implementere og nær OD. Dette papiret fokuserer på en modifisert metode for generering og anvendelsesprosess av musens kunstige decidualiseringsmodell med ovariektomi for å unngå ovarieeffekter, noe som kan gi svært reproduserbare resultater med små gruppervarianser. Denne metoden gir en god og pålitelig dyremodell for studiet av endometrial decidualisering.
Introduction
Med utviklingen av humanassistert reproduksjonsteknologi har den nåværende kliniske graviditetsraten for in vitro fertilisering-embryooverføring (IVF-ET) nådd eller til og med overgått den for naturlig graviditet. Til tross for dette gjennomgår mange pasienter i klinisk praksis ved assistert befruktning fortsatt flere embryooverføringer, men oppnår ikke graviditet som ønsket. Imidlertid er den spesifikke molekylære mekanismen fortsatt uklar, så klinisk inngrep er ineffektiv, noe som er en av de betydelige utfordringene for reproduktiv medisin 1,2.
Endometriefaktorer står for om lag to tredjedeler av årsakene til IVF-svikt3. Human embryoimplantasjon er delt inn i tre faser: posisjonering, vedheft og invasjon 4,5,6. Mors endometrium gjennomgår en rekke endringer for å møte embryoets ankomst. Å danne en implantasjon "vindusperiode" gir gunstige forhold for embryoimplantasjon 7,8.
I de fleste pattedyr, etter at blastocysten fester seg til livmorens luminale epitel, begynner stromale celler som omgir blastocysten raskt å proliferere og differensiere, og den raske ombyggingen av mesenkymet endrer form og funksjon, noe som fører til embryoimplantasjon 5,9,10. Den raske økningen i stedsvolum og vekt gjør at blastocysten kan bli innebygd i livmorstroma, en prosess kjent som decidualization11. Endometrial stroma differensierer og remodellerer som forberedelse til graviditet, mens overgangen av stromale celler gir plass og nye signalforbindelser for decidualceller til å utføre sine funksjoner12,13. Stromale celler forvandles til decidualceller og utskiller mange ikoniske faktorer som prolaktin (PRL), insulinlignende vekstfaktorbindende protein 1 (Igfbp1), og så videre. Studier har vist at unormal decidualisering er en av hovedårsakene til embryoimplantasjonssvikt, men årsaken til unormal decidualisering er fortsatt uklar og må belyses ytterligere 1,14.
Musens kunstige decidualiseringsmodell er avgjørende for å studere den fysiologiske prosessen og molekylære mekanismer som ligger til grunn for decidualisering. Kunstig decidualization (AD) refererer hovedsakelig til prosessen med endometrial decidualization etablert ved kunstige metoder for å simulere graviditet eller menstruasjonssyklusen. Når det gjelder morfologi, er det liten generell forskjell mellom graviditetsdecidualisering og kunstig desidualisering15,16. Livmorkjertlene finnes i endometrium før decidua form og forsvinner etter decidualization. Når det gjelder genuttrykket, identifiseres bare en liten forskjell mellom naturlig graviditetsdecidualisering (NPD) og AD15. Følgelig kan den kunstige decidualiseringsmodellen hos mus simulere graviditetsdecidualisering for å utforske den ukjente patogenesen og ny behandling av menneskelige reproduktive sykdommer.
NPD, AD og in vitro decidualization (IVD) er tre metoder for å oppnå musedecidualisering. OD-modellen er avhengig av naturlig graviditet og er nærmest mors fysiologiske tilstand, inkludert effekter fra embryoer. Sammenligning av forskjellene mellom implantasjons- og ikke-implantasjonssteder er en mer fysiologisk og praktisk tilnærming for å studere decidualisering. AD-modellen ble utviklet ved å bruke en intrauterin injeksjon av sesamolje som et stimulerende middel for å indusere decidualization i en pseudopregnant kvinnelig mus parret med vasektomiserte menn for å unngå påvirkning fra embryoer. Både NPD og AD-modeller spiller viktige roller i ulike forskningsformål, men de kan ikke unngå parringssvikt og forskjeller i gruppen forårsaket av de forskjellige aktivitetene til mors hormonmetabolisme. IVD er en metode avhengig av behandling av kombinert østrogen og progesteron på mobilnivå, noe som krever strengere eksperimentelle forhold og driftsevne. In vitro-modellen kan imidlertid ikke fullt ut simulere den desiduale responsen under fysiologiske forhold15. Derfor foreslår vi en enkel og forbedret induksjonsmetode modifisert fra tradisjonell AD for å redusere effekten av endogene hormoner på decidualisering. Basert på å sikre suksess med decidualiseringsinduksjon, er den nærmere den fysiologiske tilstanden og mer egnet for eksperimenter som må utelukke embryofaktorer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle de beskrevne dyreforsøkene ble godkjent av Affiliated Drum Tower Hospital ved Nanjing University Medical Schools komité for bruk og stell av dyr (nr. 20171202). Alle operasjoner følger passende dyrepleie- og bruksbyrå og nasjonale retningslinjer.
MERK: Mus ble oppdrettet i et spesifikt patogenfritt (SPF) miljø, med en temperatur på 22 ° C ± 1 ° C, relativ fuktighet på 50% ± 1%, en lys / mørk syklus på 12 t / 12 timer, og fri tilgang til mat og vann.
1. Mus ovariektomi
- Steriliser de kirurgiske instrumentene med en høy temperatur og høytrykkssterilisator 1 dag før operasjonen.
- Vei 8 uker gamle C57BL / 6 mus og intraperitonealt (i.p) injiser 1% natriumpentobarbital tilsvarende for å bedøve musene. Dosen som brukes er 40 mg/kg17. Denne dosen gir 40-60 minutters sedasjon, som oppfyller kravene til en ovariektomi. For preoperativ analgesi, injiser mus med 5 mg/kg meloksikam (s.c).
MERK: Vellykket anestesi hos mus kan indikeres ved at dype muskelreflekser forsvinner og jevn pust. Tegn på vellykket anestesi inkluderer ingen blinking når du berører den indre canthus, ingen svelging når du trekker tungen, ingen benbøyning når du klemmer huden mellom tærne, og ingen sprett når du trenger halen. - Påfør den beskyttende øyesalven på øyebollene for å forhindre tørrhet under anestesi.
- Start operasjonen når mus er fullstendig bedøvet. Plasser og fest musene i utsatt stilling på driftsflaten, og barber håret på ryggen etter å ha fuktet dem med såpevann. Desinfiser huden med 70% etanol etter barbering.
- Finn operasjonssnittstedet ved 0,5 cm (eller 1,0 cm under ribben) på øvre kant av lårroten på begge bakre lemmer parallelt med ryggraden (figur 1A).
MERK: Et riktig snittsted er viktig for raskt å lokalisere eggstokken. - Ta snittstedet som senter og desinfiser snittområdet med iodophor 3x, og plasser deretter et kirurgisk drap rundt snittområdet.
- Lag et langsgående snitt på ca 0,5-1,0 cm ved hjelp av saks. Klipp fascia og passivt skille musklene med pinsett.
- Finn en bit av den hvite fettputen i snittfeltet nær nyrens nedre pol gjennom det tynne muskellaget (figur 1B).
MERK: Den hvite fettputen er den mest åpenbare indikatoren på plasseringen av eggstokken. - Klem fettmassen med hemostatiske klemmer, og trekk eggstokken innpakket av fettputen ut av snittet.
- Klem krysset mellom eggstokken og egglederen med buet pinsett, og fjern eggstokken langs eggstokkpedicle med saks. Stopp blødningen ved hjelp av en elektrokoagulasjonspenn eller en nål på en 1 ml sprøyte oppvarmet på alkohollampen.
MERK: Sørg for å bevare egglederen, som er det anatomiske landemerket for den etterfølgende injeksjonen av sesamolje i livmorhornene. - Skyll det kirurgiske snittet med vanlig saltvann for å forhindre vevsadhesjon, bruk en 4-0 sutur til å sy henholdsvis muskel og hud, og desinfiser det kirurgiske snittet med jodofor igjen.
- Plasser musene i mageleie i buret og gjenopplive dem i en 25 °C kuvøse utstyrt med en lyskilde og et ventilasjonssystem i ca. 2 timer.
- Vær oppmerksom på musene etter operasjonen, sett dem tilbake på det opprinnelige fôringsstedet alene til de gjenoppretter helt, og gi dem nok vann og mat.
2. Postoperativ hvile og østrogen- og progesteronformulering
- Pass på at musene hviler i 2 uker etter ovariektomi.
- I et ultrarent skap, tilsett østrogen (2 ng / μL) og progesteron (0,2 ng / μL) i sesamolje i RNA enzymfrie sentrifugerør.
- Plasser sentrifugerørene i et termostatisk vannbad ved 37 °C og rist rørene kontinuerlig for å fremskynde oppløsningen.
- Etter fullstendig oppløsning, del sesamoljeoppløsningen i 100 μL aliqouts for praktisk bruk. Oppbevar de tilberedte østrogen- og progesteronløsningene i kjøleskap ved 4 °C.
3. Indusert kunstig decidualiseringsmodell
- Subkutant (s.c) injiser 100 ng østrogen i 50 μL sesamolje i hver mus i 3 dager, etterfulgt av 2 hviledager15.
MERK: Sørg for at østrogen og progesteron har blitt formulert og plassert på forskjellige steder. Enhver forurensning av østrogen av progesteron kan føre til svikt. - Injiser (s.c.) 1 mg progesteron og 10 ng østrogen i 50 μL sesamolje i hver mus i ytterligere 3 dager15.
- Operer musene for å indusere den kunstige decidualiseringsmodellen15 6 timer etter den tredje østrogen-progesteron kombinerte injeksjonen.
- Finn livmorhornet i den nedre enden av egglederne og injiser 20 μL sesamolje sakte sammen med livmorhornet, skyv vevet tilbake, sutur snittet og la musen komme seg. Tilnærmingen til operasjonen er den samme som musens ovariektomi15.
MERK: Fortsett bare med den andre operasjonen i tilfelle en vellykket ovariektomi (hudinnsnittet er godt helbredet, eggstokken er helt skåret ut, og den resterende enden av egglederen festes ikke til det omkringliggende vevet).
MERK: For å indusere AD-modellen er 20 μL sesamolje passende; mer enn 20 μL sesamolje vil lett trenge inn i den andre siden. - Injiser (s.c.) 50 μL sesamolje inneholdende 1 mg progesteron og 10 ng østrogen (H.) i ytterligere 4 dager. Se detaljer i figur 215,18.
4. Prøveinnsamling
- Avlive musene (n = 6) ved kvelning av karbondioksid og samle uteri. Observer formen på den bilaterale uteri, ta bilder og vei livmorhornene (figur 3A, B).
- Fest 3-5 mm av livmorvevet med 10% formalin, legg inn i parafin og seksjoner dem. Flekk seksjonene med hematoksylin og eosin for å observere de morfologiske endringene19 (figur 4A).
- Legg ytterligere 3-5 mm av livmorvevet i optimal skjæretemperaturforbindelse (OCT), frys i flytende nitrogen og oppbevar i et kjøleskap på -80 °C. Frossen snitter vevet til 10 μm og påviser alkalisk fosfataseaktivitet i livmorvevet ved azokoblingsmetode20 (figur 4B).
MERK: Tilfredsstillende resultater kan oppnås ved å bruke frosne seksjoner for å oppdage ALP-innhold, ikke parafinseksjoner. - Trekk ut livmorens totale RNA med Trizol-reagens og utfør kvantitativ sanntids-PCR (qPCR) på et sanntids PCR-system (materialtabell) med qPCR-masterblanding (materialfortegnelse) for å oppdage det relative mRNA-uttrykket av prolaktinfamilie 8 underfamilie 2 (Prl8a2), alkalisk fosfatase lever / bein / nyre (Alpl) og insulinlignende vekstfaktorbindende protein 1 (Igfbp1) 15 ved normalisering til 18S mRNA-nivåer (figur 4C-E ). Følg PCR-betingelsene: Trinn 1, 95 °C i 30 s; Stadium 2, 95 °C i 10 s og 60 °C i 30 s; Gjenta syklusen 40x. En fullstendig liste over primersekvenser er gitt i tabell 1.
- Analyser qPCR-data ved hjelp av 2-ΔΔCT-metoden og en t-testmetode for statistisk analyse i riktig programvare. I denne studien ble p < 0,05 ansett som statistisk signifikant.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Musens decidualiseringsmodellindekser inkluderer livmorens generelle morfologi, masseforholdet mellom den decidualiserte og ikke-decidualiserte livmoren, endometriumets histologiske morfologi og ekspresjonsnivået for decidualiseringsmarkørmolekyler. Den generelle morfologien til den kunstige decidualiserte livmoren til mus indusert av olje er nærmere livmoren i svangerskapet. Livmorlegemet blir tykt, og livmorhulen blir mindre enn den ikke-induserte siden. Volumet og vekten av det induserte livmorhornet er signifikant høyere enn for den ikke-induserte siden (figur 3A,B). HE-farging av livmorvev viste at kjertlene forsvinner og endometriestromale celler på det induserte hornet differensieres i store, runde, cytoplasmatiske og multinukleerte desidualceller med uklare cellegrenser. De ikke-induserte sidesnittene viser endometrievevsmorfologien under normal fysiologisk tilstand (figur 4A). Resultatet av azokoblingsmetoden viste at det alkaliske fosfataseinnholdet på den oljeinduserte siden var signifikant høyere enn den ikke-induserte siden (figur 4B). qPCR-resultatene viste at mRNA-ekspresjonen av Prl8a2, Alpl og Igfbp1 i det induserte hornet var signifikant høyere enn den i den ikke-induserte, noe som tyder på at olje kan indusere kunstig decidualisering hos mus (figur 4C-E).
Figur 1 Det operative snittet av musens ovariektomi. (A) Mus ovariektomi posisjon. (B) Plasseringen av musens eggstokk under ovariektomi. (C) Stedet for eggstokken under ovariektomi. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Prosedyren for operasjonen. Hele prosedyren inkluderer ovariektomi, postoperativ hvile, induksjon av den kunstige decidualiseringsmodellen og fenotypisk validering. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Generering av musens kunstige decidualiseringsmodell . (A) Representativt bilde av kunstig decidualisering indusert av olje. Høyre side av livmoren ble ikke injisert med olje, kalt olje (-). Venstre side av livmoren ble injisert med olje, kalt olje (+). (B) Vekten av livmoren injisert med eller uten olje. p < 0,001. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: Validering av musens kunstige decidualiseringsmodell . (A) Representativt HE-bilde av kunstig decidualisering indusert av olje. Skalastang = 1 mm og 100 μm. (B) Azo-koblingsmetoden påviste alkalisk fosfataseaktivitet av kunstig decidua. Skalastenger = 200 μm og 50 μm. (C) Ekspresjonsnivået for Prl8a2 mRNA ble detektert av qPCR. * p < 0,05. (D) Uttrykksnivået til Alpl mRNA. ** p < 0,01. (E) Uttrykksnivået til Igfbp1 mRNA. ** p < 0,01. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| igfbp1 mus qPCR-F | GCCCAACAGAAAGCAGGAGATG |
| igfbp2 mus qPCR-R | GTAGACACCAGCAGAGTCCA |
| Prl8a2-mus qPCR-F | ACCACAACCCATTCTCAGCTGG |
| prl8a2 mus qPCR-R | TGTTCAGGTCCATGAGCTGGTG |
| Alpl-mus qPCR-F | CCAGAAAGACACCTTGACTGTGG |
| Alpl-mus qPCR-R | TCTTGTCCGTCGCTCACCAT |
| 18s mus qPCR-F | ATGGCCGTTCTTAGTTGGTG |
| 18s mus qPCR-R | CGGACATCTAAGGGCATCAC |
Tabell 1: Liste over primersekvenser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Decidualization hos mus er en spontan prosess avhengig av tilstedeværelsen av embryoer, som er forskjellig fra mennesker. Imidlertid har det blitt funnet at kunstig stimulering som livmorinjeksjon av glassperler og livmor laceration kan indusere decidualization av endometrium i stedet for embryoer. I tillegg fant forskerne at mange faktorer kunne indusere decidual eller delta i decidualization, for eksempel injeksjon av steroidhormoner, prostaglandiner og veksthemmende faktorer i livmorhulen21. Sammenlignet med modelleringsmetodene ovenfor, kan musemodellen som er beskrevet her med ovariektomi, ved bruk av sesamolje som stimulant, utelukke effekten av østrogen og progesteron endogent produsert. Derfor er den økonomisk og enkel å betjene.
Eggstokkene bør fjernes rent for å forhindre gjenværende eggstokkvev, noe som vil påvirke den påfølgende induksjonen av decidualisering. Dette trinnet tar sikte på å redusere effekten av endogent østrogen og progesteron produsert av eggstokkene. Skader på egglederen bør unngås fordi det kan brukes som et tegn på å lete etter livmoren når du injiserer sesamoljen i livmorhulen. Hvis abdominal adhesjon eller fjerning av egglederen oppstår, må operatøren være oppmerksom på å skille livmoren fra tarmen.
Oljelekkasje oppstår lett ved subkutan injeksjon. Man bør velge bukhuden som subkutant injeksjonssted og unngå brystvortene. Det er nødvendig å injisere oljen og trekke nålen sakte ut. Hvis nålen ikke kan trekkes ut når musen er aktiv, resulterer det lett i lekkasje. Man bør trykke på nålestedet med en bomullsdott et øyeblikk for å forhindre lekkasje. Eksogene østrogen- og progesteroninjeksjoner ble brukt i denne operasjonen for å holde musens hormonnivåer stabile før den induserende decidualiseringsoperasjonen. Denne injeksjonsmetoden simulerte hormonendringer i peri-implantasjonsperioden hos mus. Her induserte vi decidualisering etter den andre østrogentoppen.
Nøkkelen til suksessen til denne operasjonen er mengden sesamolje injisert. For mye sesamolje vil trenge inn i hulrommet til det andre hornet i uteri. Utilstrekkelig sesamolje vil føre til redusert decidualiseringsrespons eller ujevn decidualisering langs livmoren, noe som resulterer i uventede eksperimentelle forskjeller. Under operasjonen bør man stikke sprøytenålen inn i livmorhulen når man injiserer sesamolje og forsiktig trekke frem og tilbake for å sikre at nålen er i livmorhulen. En del av livmorhulen kan ses som gjennomsiktig hvis den injiseres vellykket. Man bør forsiktig klemme nålestikket med pinsett i ca. 10 sekunder for å sikre at det er lukket, noe som kan forhindre lekkasje av sesamolje etter å ha trukket ut nålen. På samme tid skyver du forsiktig livmorlegemet nedover med nålen for å få sesamoljen til å spre seg jevnt i livmorhulen.
Behandling og gjenoppliving etter operasjonen er andre nøkler til denne modellens suksess. For det første er det viktig å holde et sterilt miljø for snittet under operasjonen. Før musene gjenoppliver, desinfiser operasjonssnittet med iodophor og dekk det med et stykke medisinsk gasbind for å redusere forekomsten av infeksjon. Etter operasjonen må musene metabolisere anestetika i 2-3 timer for å gjenopprette. I løpet av denne perioden må musene plasseres i en 25 ° C inkubator for å komme seg raskere og unngå hypotermi forårsaket av desinfeksjonen med 70% alkohol og iodophor. Man bør være oppmerksom på helbredelsen innen få dager etter operasjonen og håndtere typer operative komplikasjoner i tide, for eksempel snittsprekker, hevelse, sårdannelse og så videre.
Prl8a2 og Alpl er de mest klassiske desidualiseringsmarkørene. Igfbp1 er også hovedproteinet i decidualiserte celler hos mus og regnes som den spesifikke markøren for decidualisering hos mus. Ekspresjonsnivåene av Prl8a2, Alpl og Igfbp1 mRNA i det oljeinduserte livmorhornet økes betydelig sammenlignet med kontrollsiden uten oljeinjeksjon. Videre er alkalisk fosfataseaktivitet på oljeindusert side betydelig høyere enn på kontrollsiden. Disse resultatene indikerer alle suksessen til den kunstige decidualiseringsmodellen15.
Musens kunstige decidualiseringsmodell kan brukes til å validere patogene infertilitetsmolekyler og gi en god valideringsmodell for diagnostisering og behandling av infertilitet forbundet med unormal endometrial decidualisering. Denne modellen er nyttig for å studere reproduktive sykdommer, som gjentatt abort og gjentatt implantasjonssvikt. Det brukes til å studere rollen som mors faktorer i embryoimplantasjon og invasjon. Denne AD-modellen har god sikkerhet, høy suksessrate og løser påvirkning av endogene hormoner. Det er imidlertid en tidkrevende og svært krevende prosess. Vi vil optimalisere våre eksperimentelle metoder ytterligere for å lette forskningen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Forfatterne ønsker å anerkjenne støtte fra National Nature Science Foundation of China (82001629, XQS), Youth Program of Natural Science Foundation of Jiangsu Province (BK20200116, XQS), og Jiangsu Province Postdoctoral Research Funding (2021K277B, XQS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Estrogen | Sigma | E2758 | Hormone supplement |
| Progesterone | Sigma | P0130 | Hormone supplement |
| Sesame oil | Sigma | S3547 | Hormone supplement |
| Sodium pentobarbital | Dainippon Sumitomo Pharma Co.,Ltd. | Anaesthesia | |
| Meloxicam injection | Qilu Animal Health Products Co., Ltd | Analgesia | |
| Alkaline phophatase stain kit(kaplow's/azo coupling method) | Solarbio | G1480 | Alkaline phophatase stain |
| Eosin | Servicebio | G1005-2 | HE stain |
| Hematoxylin | Servicebio | G1005-1 | HE stain |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711-02 | qPCR |
| 70% ethanol | Lircon | ZH1120090 | Disinfect |
| Iodophor | Runzekang | RZK-DF | Disinfect |
| Erythromycin Eye Ointment | Guangzhou Baiyunshan | Mice eyeball protect | |
| 4-0 suture | Ethicon | W329 | Incision suture |
| 10% formalin | Yulu | L25010118 | Tissue fix |
| Optimal cutting temperature compound | Sakura | 4583 | Ssection |
| Trizol reagent | Ambion | 15596018 | qPCR |
References
- Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
- Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
- Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M. Regulatory mechanisms of endometrial decidualization and pregnancy-related diseases. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 52 (2), 105-115 (2020).
- Ng, S. W., et al. Endometrial decidualization: The primary driver of pregnancy health. International Journal of Molecular Sciences. 21 (11), 4092 (2020).
- Birgit, G., Brosens, J. J. Cyclic decidualization of the human endometrium in reproductive health and failure. Endocrine Reviews. 35 (6), 851-905 (2014).
- Owusu-Akyaw, A., Krishnamoorthy, K., Goldsmith, L. T., Morelli, S. S. The role of mesenchymal-epithelial transition in endometrial function. Human Reproduction Update. 25 (1), 114-133 (2019).
- Paulson, E. E., Comizzoli, P. Endometrial receptivity and embryo implantation in carnivores-commonalities and differences with other mammalian species. Biology of Reproduction. 104 (4), 771-783 (2021).
- Kelleher, A. M., Milano-Foster, J., Behura, S. K., Spencer, T. E. Uterine glands coordinate on-time embryo implantation and impact endometrial decidualization for pregnancy success. Nature Communications. 9 (1), 2435 (2018).
- Tian, J., et al. Attenuated monoamine oxidase a impairs endometrial receptivity in women with adenomyosis via downregulation of FOXO1dagger. Biology of Reproduction. 105 (6), 1443-1457 (2021).
- Large, M. J., DeMayo, F. J. The regulation of embryo implantation and endometrial decidualization by progesterone receptor signaling. Molecular and Cellular Endocrinology. 358 (2), 155-165 (2012).
- Dunn, C. L., Kelly, R. W., Critchley, H. O. Decidualization of the human endometrial stromal cell: an enigmatic transformation. Reproductive BioMedicine Online. 7 (2), 151-161 (2003).
- Zhu, H., Hou, C. C., Luo, L. F., Hu, Y. J., Yang, W. X. Endometrial stromal cells and decidualized stromal cells: Origins, transformation and functions. Gene. 551 (1), 1-14 (2014).
- Jose, R. M., et al. Endometrial and decidual stromal precursors show a different decidualization capacity. Reproduction. 160 (1), 83-91 (2020).
- Pan-Castillo, B., et al. Morphophysical dynamics of human endometrial cells during decidualization. Nanomedicine. 14 (7), 2235-2245 (2018).
- Wang, C., et al. Comparative analysis of mouse decidualization models at the molecular level. Genes. 11 (8), 935 (2020).
- De Clercq, K., Hennes, A., Vriens, J. Isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization. Journal of Visualized Experiments. (121), e55168 (2017).
- Kerger, H., et al. Microvascular oxygen delivery and interstitial oxygenation during sodium pentobarbital anesthesia. Anesthesiology. 86 (2), 372-386 (1997).
- Filant, J., Spencer, T. E. Endometrial glands are essential for blastocyst implantation and decidualization in the mouse uterus. Biology of Reproduction. 88 (4), 93 (2013).
- Sheng, X., et al. The mitochondrial protease LONP1 maintains oocyte development and survival by suppressing nuclear translocation of AIFM1 in mammals. EBioMedicine. 75, 103790 (2022).
- Grogg, E., Pearse, A. G. Coupling azo dye methods for histochemical demonstration of alkaline phosphatase. Nature. 170 (4327), 578-579 (1952).
- Labarta, E., et al. Analysis of serum and endometrial progesterone in determining endometrial receptivity. Human Reproduction. 36 (11), 2861-2870 (2021).
