Summary
Burada, fare kulaklarında alerjik kontakt dermatiti 1-floro-2,4-dinitrobenzen (DNFB) ile indükleme yöntemlerini ve alerjik kontakt dermatitin ciddiyetinin nasıl değerlendirileceğini açıklıyoruz.
Abstract
Deri, insan vücudunun ilk savunma hattıdır ve çevresel kimyasallara en çok maruz kalan organlardan biridir. Allerjik kontakt dermatit (AKB), lokal döküntü, kızarıklık ve deri lezyonları şeklinde kendini gösteren yaygın bir deri hastalığıdır. AKB'nin oluşumu ve gelişimi hem genetik hem de çevresel faktörlerden etkilenir. Son yıllarda birçok bilim adamı bir dizi ACD modeli oluşturmuş olsa da, bu modellerin deneysel protokollerinin hepsi farklıdır, bu da okuyucuların bunları iyi bir şekilde kurmasını zorlaştırmaktadır. Bu nedenle, atopik dermatitin patogenezini daha fazla incelemek için istikrarlı ve etkili bir hayvan modeli büyük önem taşımaktadır. Bu çalışmada, farelerin kulaklarında ACD benzeri semptomları indüklemek için 1-floro-2,4-dinitrobenzen (DNFB) kullanan bir modelleme yöntemini detaylandırdık ve modelleme sırasında dermatitin şiddetini değerlendirmek için çeşitli yöntemleri tanımladık. Bu deneysel protokol bazı deneylerde başarıyla uygulanmıştır ve ACD araştırması alanında belirli bir tanıtım rolüne sahiptir.
Introduction
Allerjik kontakt dermatit (AKB), temas bölgesinde egzama benzeri semptomlar, orta derecede vakalarda ödem ve eritem ve ağır vakalarda papüller, erozyon, eksüdasyon ve hatta masif yara izleri ile karakterize yaygın bir deri hastalığıdır1. Nüfusun% 20'sine kadar etkiler ve2 yaştaki her insanı etkileyebilir. ACD genellikle tekrar tekrar alerjenlere maruz kalan bireylerde görülür ve bireyin evlerinde veya işyerlerinde bir veya daha fazla alerjene karşı bağışıklık tepkisinden kaynaklanabilir3. Tip IV gecikmiş aşırı duyarlılık, ACD4'te ana immün yanıt tipi olarak kabul edilir. Cildin tekrar tekrar alerjenlere maruz kalan bölgelerinde, dolaşımdaki hafıza T hücreleri çok sayıda birikir ve immün ve enflamatuar yanıtları indükler 3,5,6. Bu çalışmanın amacı, AKB gelişiminde immünolojik ve inflamatuar yanıtların daha fazla araştırılması için güvenilir bir laboratuvar tekniği önermektir.
ACD'nin başlangıcı genellikle kimyasallara tekrar tekrar maruz kalmanın neden olduğu temas aşırı duyarlılığından kaynaklanmaktadır. Çok sayıda araştırmacı, hastalığın başlangıcını simüle etmek için son birkaç on yılda ev fareleri7,8, kobaylar 9,10 ve diğer hayvanlarda çeşitli ACD hayvan modelleri geliştirmiştir. Deneysel yöntemlerin çoğu iki aşamadan oluşur: abdominal sensitizasyon (indüksiyon) ve sırtta veya kulak memesinde uyaran sağlama (stimülasyon). Yaygın olarak kullanılan kimyasal maddeler arasında esas olarak 1-floro-2,4-dinitrobenzen (DNFB) / 1-kloro-2,4-dinitrobenzen (DNCB)8,9,11, oksazolon 12, urushiol 13, vb. Bulunur. Bunlar arasında, DNFB ve DNCB en yaygın kullanılanlardır, ilk olarak Ekim 1958'de bildirilmiştir10. Nikel sensitizasyon modeli14 ve fotoalerjik kontakt dermatit modeli15 de sıklıkla kullanılmaktadır.
ACD modelini oluşturmak için deneysel bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, önceki çalışmalara dayanarak ve çoklu deneylerle karşılaştırılarak özetlenmiş ve optimize edilmiştir. Diğer ACD modelleriyle karşılaştırıldığında, bu modelin küçük bireysel farklılıklar, kısa deney süreleri, az miktarda kimyasal stimülasyon vb. gibi bazı avantajları vardır. Ek olarak, bu çalışma sadece ekonomik değil, aynı zamanda gen nakavtı veya transgenik farelerin hazırlanması için daha fazla seçeneğe sahip olan fareler için de geçerlidir16. Ayrıca, deneyde ACD ilerlemesini izlemek için kullanılan kulak kalınlığını ölçmek, enflamatuar eksüdasyonu ölçmek için Evans mavi boyası kullanmak gibi çeşitli yöntemleri de açıklıyoruz. Bu model sadece AKB'nin patogenezini araştırmak için fare kulaklarını, kanını, dalağı ve diğer örnekleri laboratuvar araçlarıyla analiz etmekle kalmaz, aynı zamanda belirli bir tanıtım önemi olan yeni terapötik yöntemlerin klinik öncesi değerlendirmesi için de geçerlidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Farelerin tüm bakım ve tedavisi, Yangzhou Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından belirlenen yönergelere uygun olarak yapıldı ve Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından SYXK (SU) 2022-0044 proje lisansı kapsamında onaylandı. Bu çalışmada 6-8 haftalık BALB/c erkek ve dişi fareler kullanıldı. Her grup altı fareden oluşuyordu (bakınız Malzeme Tablosu). Kafesler, yiyecek ve suya serbest erişimi olan sıcaklık kontrollü bir odaya (22 ± 2 ° C, 12 saat ışık / karanlık döngüsü) yerleştirildi. Deneysel bir akış diyagramı Şekil 1'de gösterilmiştir.
1. Hayvan hazırlama
- Çevreye 1 haftalık alışmadan sonra modellemeye başlayın.
- Fareleri manipüle etmeden önce çevreyi ve tezgahları temizlemek ve dezenfekte etmek için ultraviyole lamba ve% 75 alkol dezenfektanı kullanın.
NOT: Dış etkenlerin etkisinden kaçınmak için, fareleri tanımlama için işaretlemek fare kulağında gerçekleştirilemez; Arkada veya kuyrukta lekelenme alternatif olarak kullanılabilir. - Farelerin karnına sabunlu su uygulamak için küçük bir pamuklu çubuk kullanın (yaklaşık 1-2cm2 büyüklüğünde). Modellemenin başında (gün 0; Şekil 2A).
NOT: Epilasyon için düz tıraş bıçağı kullanımı yetenekli bir operatör gerektirir. Doğru şekilde yapılmazsa, cilt tahrişine neden olabilir. Epilasyon için tüy dökücü krem, kesme makineleri veya güvenli bir tıraş bıçağı kullanmayı düşünün. - Fareyi tartın ve her grup arasındaki ağırlık değişikliklerini karşılaştırın.
2. Abdominal sensitizasyon stimülasyonu
- Tıraştan kaynaklanan karın derisindeki herhangi bir küçük yaralanmanın tam olarak iyileşmesini sağlayın. Karın hassasiyetini tıraştan 2 gün sonra uygulayın (2. gün).
- % 0.5 DNFB çözeltisini hazırlayın: DNFB'yi bir asetonla seyreltin: zeytinyağı karışımı 4: 1 oranında (örneğin, 400 μL zeytinyağı ile karıştırılmış 100 μL aseton ; bkz. DNFB çözeltisini iyice karıştırmak için üflemek ve 20 kez karıştırmak için bir pipet tabancası kullanın. DNFB çözeltisinin fareye her uygulanmasından önce, üç ila beş kez üfleyin ve karıştırın.
NOT: Kullanmadan önce çözeltiyi hazırlayın ve doğrudan güneş ışığından korumak için alüminyum folyoya sarın. - % 0.5 DNFB çözeltisinin 25 μL'sini, farelerin karnındaki tıraş edilmiş bölgenin cildine bir pipetleyici ile uygulayın (Şekil 2B).
- DNFB solüsyonunu karın tıraş alanının ortasına sürün ve pipetleyici ucunun pürüzsüz tarafı ile hafifçe yayınlayarak düzgün bir şekilde dağıtın.
- DNFB stimülasyonundan 30 sn sonra, DNFB çözeltisini ovalamalarını önlemek için fareleri yataksız boş kafeslere yerleştirin. DNFB çözeltisi tamamen kuruduğunda (yaklaşık 2 dakika), fareleri orijinal kafeslerine geri döndürün.
- DNFB solüsyonunu kullanırken eldiven giyin, çünkü insan cildini ciddi şekilde tahriş eder.
3. Kulak hassaslaştırma stimülasyonu
- Yukarıdaki gibi% 0.2'lik bir DNFB çözeltisi, araç çözeltisi (4: 1 aseton ve zeytinyağı karışımı) ve saf su hazırlayın.
- DNFB stimülasyonu sırasında çözeltinin kulak kanalına girmesini önlemek için fare gövdesini yönlendirin ve tüm operasyon boyunca kulak kepçesinin dış kenarlığını aşağı bakacak şekilde yapın.
- 4, 6, 8 ve 10. günlerde, farelerin sol kulak kepçelerinin iç yüzeyine yavaş ve düzgün bir şekilde% 0.2 DNFB çözeltisinin veya araç çözeltisinin 20 μL'sini uygulamak için bir pipetleyici kullanın. DNFB çözeltisinin kulak kanalına girmesini önlemek için, uygulama sırasında DNFB çözeltisini nazikçe dağıtmak üzere pipetleyici ucunun pürüzsüz tarafını kullanın. Sağ kulakları tedavi edilmeden bırakın (Şekil 2C).
- DNFB çözeltisi kuruyana kadar bekleyin ve fareleri tekrar kafese yerleştirin (yaklaşık 30 s).
- DNFB çözümünü kullanırken eldiven giyin.
4. Fare ağırlığını ve ACD semptomlarını kaydetme
- Fareyi her gün tartın, 1. günde başlayın ve 0. günde karşılık gelen ağırlığıyla karşılaştırın; ACD'nin farelerin vücut ağırlığı üzerindeki etkisini, ağırlık değişimi (g) ortalamanın standart hatası (SEM) ± olarak değerlendirmek.
- 1. günden başlayarak her 2 günde bir ACD klinik semptomlarını kaydetmek için fare kulaklarının yüksek çözünürlüklü fotoğraflarını çekin.
5. Kulak kepçesi kalınlığının ölçülmesi
- Kulak kepçesi kalınlığını 1. günden başlayarak her 2 günde bir ölçün. Her iki kulağı da ayrıntılı olarak ölçün ve kaydedin.
- Doğru sonuçlar için kulak kepçesi kalınlığını her gün aynı saatte ölçmek için vernier kaliperleri kullanın (Malzeme Tablosuna bakınız) (Şekil 3A). Fare kulağında doku hasarını önlemek için hafif bir tıkanıklık olduğunda vernier kaliperlerinin içe doğru sıkıştırmaya devam etmesini durdurun. Konumu sabit tutun ve verileri kaydedin.
- Her kulak kepçesi üzerindeki üç farklı konumdan kalınlığı toplayın (Şekil 3B). Üç verinin ortalamasını geçerli bir değer olarak kaydedin. Kulak şişmesini mikrometre (μm) cinsinden ortalamanın standart hatası (SEM) ± değerlendirin.
6. Enflamatuar şişlik derecesinin değerlendirilmesi
- % 0.5 Evans mavi boyası hazırlayın ( Malzeme Tablosuna bakınız): Evans mavi boyasını 11. günde fosfat tamponlu salin (PBS) ile seyreltin. Evans mavi boyası insanlar için biraz toksik olduğu için her zaman bir laboratuvar önlüğü ve eldiven giyin.
- Fareleri bir fiksatör ile hareketsiz hale getirin: fiksatörün kapağını açın (bakınız Malzeme Tablosu), fare kuyruğunu tutun, farenin kafasını fiksatöre bakacak şekilde yapın ve farenin içgüdüsel olarak fiksatöre tırmanmasını sağlayın. Kapağı kapatın, fare kuyruğunun kapaktaki delikten çıkmasını sağlayın ve tüm fare kuyruğunu ortaya çıkarmak için fiksatörün uzunluğunu ayarlayın.
- Kuyruğu alkollü bir pamuk topu ile tekrar tekrar silin veya 30 saat boyunca ılık suya batırın ve her iki taraftaki damarları doldurmak ve genişletmek için kuyruğun kökünü hafifçe sıkıştırın. Enjeksiyonu soğuk bir ışık kaynağının ışınlaması altında gerçekleştirin.
- Evans mavi boya çözeltisini 1 mm'lik bir insülin iğnesi kullanarak fare kuyruğu damarına yavaşça enjekte edin. 15 dakika bekleyin ve ardından fare kulaklarının fotoğraflarını çekin.
NOT: Fareyi masanın üzerine koyun ve görüntü alma için kulak bölgesini ortaya çıkarmak üzere hafifçe tutun. Evans mavi boya çözeltisi ile enjeksiyondan kısa bir süre sonra ve ilgili endikasyonları gözlemleyerek, fareyi ötenazi yapmak için servikal çıkık kullanın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tekrarlanan DNFB stimülasyonu altında, DNFB grubunun fare kulakları, ACD ile karşılaştırılabilir belirgin klinik semptomlar gösterdi ve hassas bölgeler tipik kızarıklık, kuruluk ve hatta erozyon ve eksüdasyon belirtileri gösterdi. Bununla birlikte, saf suyun (kontrol grubu) veya çözücü kontrolünün (araç grubu) kulağa uygulanması benzer semptomlar üretmemiştir (Şekil 4).
Bu arada, DNFB grubunda, tedavi edilmeyen sağ kulağa kıyasla, DNFB stimülasyonundan sonra sol kulağın kalınlığı anlamlı olarak artmıştır (Şekil 5A), kontrol ve araç gruplarında anlamlı bir fark yoktu (Şekil 5B). DNFB grubu farelerin sol kulakları, modellemenin 11. gününde Evans mavi boyasının enjekte edilmesinden sonra açıkça koyu maviye döndü, bu da sağ kulaktan görsel olarak farklıydı. Bununla birlikte, kontrol ve araç gruplarındaki farelerin sol ve sağ kulakları yaklaşık olarak aynı renkteydi (Şekil 5C).
Ayrıca, farelerin vücut ağırlığı değişiklikleri analiz edildi. Fare ağırlık artışı DNFB veya basit araç stimülasyonu (Şekil 6A) ile hafifçe yavaşladı, ancak önemli kilo kaybına neden olmadı (Şekil 6B). Aynı zamanda, dalak fareler kurban edildikten hemen sonra izole edildi. Dalak indeksi fare ağırlığına ve dalak ağırlığına göre hesaplandı; Hesaplama formülü aşağıdaki gibidir:
Dalak indeksi = dalak ağırlığı (g) / vücut ağırlığı (g) x 100
Sonuç, fare kulağında tekrarlanan DNFB stimülasyonunun dalak büyümesine (Şekil 6C) ve dalak indeksinde bir artışa (Şekil 6D) neden olduğunu, oysa araç grubundaki farelerin dalak indeksinin önemli ölçüde değişmediğini göstermektedir. DNFB'nin uyarılması altında, DNFB grubundaki farelerin bağışıklık tepkisi fonksiyonunun hiperaktif olduğu kanıtlanmıştır.
Resim 1: ACD kalıplama zaman ekseninin şematik diyagramı. Oklar, ilgili zamanda ne yapıldığını gösterir. İlgili işlemler tıraş, hassaslaştırma, kulak kepçesi ölçümü, tartım, fotoğraf çekme ve Evans mavi boya uygulamasını içerir. Kısaltmalar: DNFB = 1-floro-2,4-dinitrobenzen. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: ACD model kuruluşunun çalışma yöntemi . (A) Karın tıraşının manipülasyonu. (B) Abdominal hassaslaştırıcı stimülasyonun manipülasyonu. (C) Kulak hassaslaştırıcı stimülasyonun manipülasyonu. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Kulak şişmesinin değerlendirme yöntemi . (A) Farelerde kulak kalınlığı ölçümlerinin manipülasyonu. (B) Farelerde kulak kalınlığı ölçüm bölgeleri. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: DNFB uygulamasının zaman içinde farelerin kulakları üzerindeki etkisinin temsili resmi . (A) Kontrol grubu. (B) Araç grubu. (C) DNFB grubu. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5: DNFB uygulamasının farelerde kulak şişmesi üzerine etkisi . (A) Modelleme sırasında farelerin sol ve sağ kulakları arasındaki kulak kalınlığındaki fark. (B) Modelleme sonunda her gruptaki farelerin sol ve sağ kulak kalınlıklarının karşılaştırılması. (C) DNFB uygulamasının farelerde kulak damar geçirgenliği üzerine etkisi. (n = 6. ***p < 0.001, sağ kulaklar ve sol kulaklar arasındaki karşılaştırma; N.S. = Önemli değil). Tüm veriler SEM ± ortalaması olarak ifade edildi. Gruplar arasındaki farklı tedavi analizleri, eşleştirilmemiş bir öğrencinin t-testi veya Dunnett'in testi ile tek yönlü varyans analizi kullanılarak analiz edildi. 0.05'ten küçük p değerleri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 6: DNFB uygulamasının farelerde vücut ağırlığı ve dalak indeksi üzerindeki etkileri . (A) Modelleme sırasında her gruptaki farelerin vücut ağırlığı değişiklikleri. (B) 11. günde her gruptaki farelerdeki vücut ağırlığı değişikliklerinin karşılaştırılması. (C) Her bir fare grubundaki dalak büyüklüğünün karşılaştırılması. (D) Fare grupları arasında dalak indeksinin karşılaştırılması. (n = 6. *p < 0.05, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında; N.S. = Önemli değil). Tüm veriler SEM ± ortalaması olarak ifade edildi. Gruplar arasındaki farklı tedavi analizleri, eşleştirilmemiş bir öğrencinin t-testi veya Dunnett'in testi ile tek yönlü varyans analizi kullanılarak analiz edildi. 0.05'ten küçük p değerleri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Farelerin kulaklarında ACD benzeri semptomları indüklemek için burada açıklanan protokol, ACD'nin patofizyolojisini incelemek ve yeni ilaçların geliştirilmesi için bir tarama aracı olarak kullanılabilir.
Bir ACD modeli oluşturmak için iki önemli adım vardır: ilk duyarlılaşma ve sonraki stimülasyon. Karın genellikle ilk duyarlılaşma bölgesidir, ancak sonraki stimülasyon bölgesi biraz farklı seçilmiştir. Önceki çalışmalar, çoğu bilim insanının farelerin arkasında veya boynunda ACD modelleri oluşturmak için DNFB / DNCB veya oksazolon gibi kimyasal hassaslaştırıcıları kullanmayı seçtiğini ve farelerin modelleme alanını 17,18,19 olarak ayırmak için bıçak veya düzeltici kullanmanın kaçınılmaz olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, bu adım cilt bariyerini kolayca tahrip edebilir ve sonraki deneyleri etkileyebilir. Ayrıca, damlayan ilacın eşit olarak dağıtılması zordur ve boynun ensesindeki geniş alan ve çevredeki saçların etkisi nedeniyle yakındaki saçlar tarafından kolayca emilir.
Bu deneysel protokolde, fare kulak kepçelerinin iç yüzeyinde sonraki stimülasyon için manipülasyonun gerçekleştirilmesinin, yukarıdaki sorunların bazılarını hafifletmemizi sağladığını ve istikrarlı ve yüksek oranda tekrarlanabilir bir ACD modeli oluşturmaya yardımcı olduğunu bulduk. Tekrarlanan deneylerimiz20'ye uygun olarak, hassaslaştırıcı uyaranın aralığını ve deney periyodunu da optimize ettik ve ayarladık. Verilen deneysel yönteme uygun olarak 10. günde çok belirgin bir modelleme etkisi elde edilebilir. Ek olarak, modelleme alanı, dış faktörlerin daha az etkileşime sahip olduğu kulak kepçesinin nispeten bağımsız iç tarafında olduğundan, bu deneyde aynı deney grubundaki farelerde ACD'nin şiddetinde daha az fark vardır.
Bu deneysel protokolün bazı eksiklikleri de vardır. İlk olarak, kulağa kimyasal hassaslaştırıcılar uygulamak, kimyasalların kulak kanalına girmesini ve farelere zarar vermesini önlemek için dikkatle yapılmalıdır. İkincisi, ACD modelleri genellikle farelerde kronik kaşıntıyı incelemek için bir araç olarak kullanılır. Farelerin ense bölgesinde kurulan ACD modelinde, farelerde kaşınma nöbetleri sezgisel olarak gözlemlenebilir ve farelerde kaşıntı semptomunun şiddeti bununla ölçülebilir. Deneyimiz sırasında farelerde tırmalama davranışı da gözlenmesine rağmen, farelerin kendiliğinden kulak temizleme alışkanlıkları vardı ve bu da patolojik tırmalama davranışından ayırt etmeyi zorlaştırıyordu. Bu, ACD'ye bağlı çizilme davranışını gözlemlemede bu modelin kullanımını sınırladı. Protokolün bu tür bir çalışma için geçerli olup olmadığı, daha fazla deneysel doğrulamaya tabidir.
AKB'nin patolojik seyrini izlemek için klinik kulak semptomları, kulak kalınlığı ölçümü ve vasküler geçirgenliğin yansıması gibi çeşitli izleme yöntemleri kullanılmıştır. Bu patolojik göstergeler kulakta boyun ve sırt derisinden daha belirgindir. Bir farenin kulak kalınlığını ölçerken, farenin mücadele davranışı ve kulağın düzensiz kalınlığı nedeniyle ölçüm hataları meydana gelir. Ölçüm hatalarını azaltmak için, ölçümler her kulakta üç farklı yerde yapılmalıdır. Modellenen bölgenin vasküler geçirgenliğini değerlendirmek için Evans boyası enjekte edilerek, dermatitin ciddiyeti görülebilir, ancak bu aynı zamanda kuyruk damarı enjeksiyonunun yüksek bir başarı oranını gerektirir. Daha fazla karşılaştırmalı analiz gerekirse, fare kulak dokusu homojenatının süpernatantının emilimi belirlenebilir.
Ayrıca, önceki araştırmamızda20, kulak dokusu yapısının iyi organize edildiğini ve diğer düzensiz doku yapılarından (örneğin, saç folikülleri) boyun ve sırt cilt dokusundan daha az etkilendiğini ve bu alanın araştırma için seçilmesine yol açtığını belirtmekte fayda var.
Sonuç olarak, bu yazıda anlatılan AKB modeli stabil ve etkili bir modelleme yöntemidir ve alerjik kontakt dermatitin sonraki çalışmalarında teşvik edilmeye değerdir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar bu çalışmada çıkar çatışması olmadığını bildirmektedir.
Acknowledgments
Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC) tarafından N.-N.'ye desteklenmiştir. Y. (81904212); Jiangsu Geleneksel Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Projesi (YB201995); ve Çin'deki Doktora Sonrası Araştırmacılar için Özel Finansman Projesi (2020T130562).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene (DNFB) | Merck | 200-734-3 | 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene, ≥99% |
| Acetone | Sinopharm Chemical Reagent Co. LTD | 10000418 | ≥99.5% |
| Aluminum foil | Cleanwrap | CF-2 | |
| Evans blue dye | Solarbio | 314-13-6 | Dye content approx. 80% |
| Mouse fixator | ZHUYANBANG | GEGD-SM1830 | |
| Olive oil | Solarbio | 8001-25-0 | 500 ml |
| Pipet tip | Biofount | FT-200 | 10 - 200 μl |
| Pipettor | Eppendorf AG | 3123000250 | 20 - 200 μl |
| Razor blade | Shanghai Gillette Co. LTD | 74-S | |
| Vernier calipers | Delixi Electric | DECHOTVCS1200 |
References
- Neale, H., Garza-Mayers, A. C., Tam, I., Yu, J. Pediatric allergic contact dermatitis. Part I: Clinical features and common contact allergens in children. Journal of the American Academy of Dermatology. 84 (2), 235-244 (2021).
- Koppes, S. A., et al. Current knowledge on biomarkers for contact sensitization and allergic contact dermatitis. Contact Dermatitis. 77 (1), 1-16 (2017).
- Martin, S. F., et al. Mechanisms of chemical-induced innate immunity in allergic contact dermatitis. Allergy. 66 (9), 1152-1163 (2011).
- Kimber, I., Basketter, D. A., Gerberick, G. F., Dearman, R. J.
- Vocanson, M., Hennino, A., Rozieres, A., Poyet, G., Nicolas, J. F. Effector and regulatory mechanisms in allergic contact dermatitis. Allergy. 64 (12), 1699-1714 (2009).
- Gamradt, P., et al. Inhibitory checkpoint receptors control CD8+ resident memory T cells to prevent skin allergy. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 143 (6), 2147.e9-2157.e9 (2019).
- Fraginals, R., Blasi, N. A., Lepoittevin, J. P., Benezra, C. A successful murine model for contact sensitization to a sesquiterpene-alpha-methylene-gamma-butyrolactone: sensitization to alantolactone in four strains of mice. The Journal of Investigative Dermatology. 97 (3), 473-477 (1991).
- Knop, J., Riechmann, R., Neumann, C., Macher, E. Modulation of suppressor mechanisms in allergic contact dermatitis: 5. Evidence that inhibition of suppressor T lymphocytes by Corynebacterium parvum is mediated by interferon. The Journal of Investigative Dermatology. 79 (6), 385-388 (1982).
- Polak, L., Scheper, R. J. Antigen-specific T-cell lines in DNCB-contact sensitivity in guinea pigs. The Journal of Investigative Dermatology. 80 (5), 398-402 (1983).
- Witten, V. H., March, C. H. Studies of the mechanism of allergic eczematous contact dermatitis. II. Use of C14 labelled 2:4-dinitrochlorobenzene in guinea pigs. The Journal of Investigative Dermatology. 31 (2), 97-102 (1958).
- Knop, J., Riechmann, R., Macher, E. Modulation of suppressor mechanism in allergic contact dermatitis. IV. Selective inhibition of suppressor T-lymphocytes by serum obtained from Corynebacterium parvum treated mice. The Journal of Investigative Dermatology. 77 (6), 469-473 (1981).
- Rubic-Schneider, T., et al. GPR91 deficiency exacerbates allergic contact dermatitis while reducing arthritic disease in mice. Allergy. 72 (3), 444-452 (2017).
- Stampf, J. L., Benezra, C., Byers, V., Castagnoli Jr, N. Induction of tolerance to poison ivy urushiol in the guinea pig by epicutaneous application of the structural analog 5-methyl-3-n-pentadecylcatechol. The Journal of Investigative Dermatology. 86 (5), 535-538 (1986).
- Dhingra, N., et al. Molecular profiling of contact dermatitis skin identifies allergen-dependent differences in immune response. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 134 (2), 362-372 (2014).
- Maguire Jr, H. C., Kaidbey, K. Experimental photoallergic contact dermatitis: a mouse model. The Journal of Investigative Dermatology. 79 (3), 147-152 (1982).
- Qiu, Z., et al. A dysregulated sebum-microbial metabolite-IL-33 axis initiates skin inflammation in atopic dermatitis. The Journal of Experimental Medicine. 219 (10), e2021397 (2022).
- Kim, H., et al. Anti-inflammatory activities of Dictamnus dasycarpus Turcz., root bark on allergic contact dermatitis induced by dinitrofluorobenzene in mice. Journal of Ethnopharmacology. 149 (2), 471-477 (2013).
- Zhou, P., et al. Effect of 6'-acetylpaeoniflorin on dinitrochlorobenzene-induced allergic contact dermatitis in BALB/c mice. Immunologic Research. 64 (4), 857-868 (2016).
- Donglang, G., et al. Comparative study on different skin pruritus mouse models. Frontiers in Medicine. 8, 630237 (2021).
- Yang, N., Shao, H., Deng, J., Liu, Y. Network pharmacology-based analysis to explore the therapeutic mechanism of Cortex Dictamni on atopic dermatitis. Journal of Ethnopharmacology. 304, 116023 (2023).
