هذا الفيديو وبروتوكول لشرح كيفية زرع زجاج النافذة المغطاة الجمجمة لدى القوارض. ويمكن استخدام هذه المستحضرات لمزمنة في الجسم الحي two الفوتون التصوير من القشرة المخية الحديثة على جداول زمنية لأشهر. ويمكن أيضا استخدامه لأنواع أخرى من التصوير ، والتصوير الضوئي بما في ذلك إشارة جوهرية.
Abstract
تقنيات التصوير أصبحت ذات أهمية متزايدة في دراسة وظائف المخ. من بينها ، برز ثنائي الفوتون المجهري المسح بواسطة أشعة الليزر كطريقة مفيدة للغاية ، لأنه يسمح للدراسة الدماغ سليمة حية. مع الاستعدادات المناسبة ، وهذا الأسلوب يسمح للمراقبة المنطقة القشرية نفس مزمنة ، من دقائق إلى أشهر. في هذا الفيديو ، نظهر استعدادا لتصوير المزمن في الجسم الحي من الدماغ باستخدام اثنين من الفوتون المجهري. كان في البداية هذه التقنية التي بدأها الدكتور كاريل سفوبودا ، وهو الآن في معهد هوارد هيوز الطبي محقق في مزرعة Janelia. ويمكن استخدام مستحضرات مثل واحد هو موضح هنا لتصوير هيكل القشرة المخية الحديثة (على سبيل المثال ، وديناميات الشجيرية ومحواري) ، لتسجيل نشاط الخلايا العصبية باستخدام الكالسيوم الحساسة الأصباغ ، لالقشرية صورة ديناميكية تدفق الدم ، أو للدراسات الذاتية التصوير الضوئي. التصوير العميق للاللحاء الجديد هو ممكن مع أفضل إطار عملية جراحية في الجمجمة. تعمل في ظل ظروف بالغة العقيمة من الممكن تجنب الإصابة بالأمراض ، جنبا إلى جنب مع استخدام العناية القصوى للا تضر الأم الجافية أثناء الجراحة ، سوف يؤدي إلى النوافذ الزجاجية المغطاة ناجحة وطويلة الأمد في الجمجمة.
Protocol
تخدير الفئران مع isoflurane (4 ٪ لتحريض ، 1،5-2 ٪ للجراحة) باستخدام IACUC الإجراءات المعتمدة. من المهم أن تستخدم الذيل و / أو يقرص اصبع القدم من أجل ضمان مخدرا تماما الحيوانية. باستخدام الانتهازي القوارض ، وحلق الشعر من الجزء الخلفي من الر…
Discussion
كما بينا في شريط الفيديو والتكميلية في الأرقام ، وإعداد إطار الجمجمة ، جنبا إلى جنب مع استخدام اثنين من الفوتون المجهري ، هو أداة قوية جدا للدراسة في بنية الجسم الحي وظيفة من وظائف القشرة المخية الحديثة. تقنية يتطلب تدريب صارم لتصبح مألوفة مع التشريح ذات الصلة والإجراءات الجراح…