A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:10Introduction
- 00:42Expression and Purification of Target Protein and Tagged Ubiquitin
- 03:15Immunoprecipitation
- 04:51SDS-PAGE and Immunostaining
- 05:48Detection of Protein Ubiquitination in vitro
- 07:02Representative Results
- 08:22Conclusion
Ubiquitination är en viktig posttranslational modifiering som utförts av en uppsättning av tre enzymer. Mutationer av gener involverade i denna förändring är förknippade med många olika mänskliga sjukdomar. Här beskriver vi protokoll för att upptäcka protein ubiquitination i odlade celler<em> In vivo</em> Och provrör<em> In vitro</em>.
Tags
Protein UbiquitinationPosttranslational ModificationUbiquitin-activating Enzyme E1Ubiquitin-conjugating Enzyme E2Ubiquitin Ligase E3Deubiquitylating EnzymesProtein StabilityCellular LocalizationBiological ActivityGene MutationsHuman DiseasesCancerNeurodegenerationMetabolic DisordersPathogenesisDetection ProtocolsCultured Cells In VivoTest Tubes In VitroSumolyationNeddylation
