A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Title
- 00:07Introduction
- 00:43End Repair of Sheared Genomic DNA
- 02:10Size-Selection of Genomic DNA by Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE)
- 04:48DNA-recovery by Gel Extraction and Ligation of Recovered DNA to the Fosmid Cloning Vector
- 10:18Phage-packaging of Vector-insert Ligation Product and Infection of Phage-Resistant Bacteria
- 14:30Plating and Titering
- 16:34Preparation for Colony Picking
- 17:46Colony Picking, Culturing, and Long-Term Storage
- 20:32Conclusion
Строительство fosmid библиотека с экологическими геномной ДНК, выделенной из вертикального континуума глубины сезонно гипоксических фьорда описано. В результате клон библиотеки собирают в 384-луночных планшетах и архивируются для последующих последовательности и функционального скрининга путем применения автоматизированной системы сбора колонии.
Tags
Large Insert Environmental Genomic Library ProductionMicrobesCultivation MethodsMetagenomic ApproachesGenetic ContentIndigenous Microbial CommunitiesGenomic DNA LibrariesCloning TechniquesHypoxic FjordDNA Extraction And Purification ProtocolEnd-repaired DNAPulsed-field Gel Electrophoresis (PFGE)Gel ExtractionDNA FragmentsBase Pairs (Kb)Fosmid CopyControl Vector PCC1
