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大規模な挿入環境ゲノムライブラリーの製造
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Biology
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JoVE Journal Biology
Large Insert Environmental Genomic Library Production
DOI:

20:59 min

September 23, 2009

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Chapters

  • 00:00Title
  • 00:07Introduction
  • 00:43End Repair of Sheared Genomic DNA
  • 02:10Size-Selection of Genomic DNA by Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE)
  • 04:48DNA-recovery by Gel Extraction and Ligation of Recovered DNA to the Fosmid Cloning Vector
  • 10:18Phage-packaging of Vector-insert Ligation Product and Infection of Phage-Resistant Bacteria
  • 14:30Plating and Titering
  • 16:34Preparation for Colony Picking
  • 17:46Colony Picking, Culturing, and Long-Term Storage
  • 20:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

季節低酸素フィヨルドの垂直方向の深さの連続体から分離された環境ゲノムDNAとのフォスミドライブラリーの構築が記載されている。得られたクローンのライブラリーは384ウェルプレートに取り、自動コロニーピッキングシステムのアプリケーションによって下流の塩基配列決定と機能的スクリーニングのためにアーカイブされます。

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