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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Analyse des préférences gustatives

 
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Analyse des préférences gustatives : une méthode pour mesurer le comportement alimentaire à Drosophila

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- Pour effectuer l’analyse de préférence gustative, utilisez une chambre, par exemple, une boîte de Pétri divisée en sections égales. Si vous mesurez le choix entre deux solutions de goûts différents, étiquetez l’une en rouge et l’autre en bleu à l’aide d’agents insipides de coloration alimentaire. Puis placez des gouttes également espacées de chaque solution le long du bord du plat à travers des sections alternées.

Ajoutez maintenant des mouches anesthésiées et précédemment affamées au milieu de la chambre et couvrez le plat. Effectuez l’expérience dans l’obscurité pour exclure les biais de couleur potentiels, et incubez à 25 degrés Celsius sur une période déterminée. Lorsqu’on leur donne le choix entre deux solutions, plus de sujets préfèrent consommer des solutions dont le goût est plus attrayant, par exemple, sucré, tout en évitant les options aversives telles que des solutions amères. Arrêtez l’expérience en déplaçant la chambre dans un congélateur.

Pour mesurer le comportement alimentaire et la préférence gustative, comparez le nombre de mouches avec différents abdomens colorés. Dans le protocole d’exemple, nous verrons une démonstration de l’analyse de préférence gustative qui mesure le choix entre diverses solutions de saccharose.

- Pour commencer l’expérience, saturer une boule de coton avec de l’eau au fond d’un flacon de mouche standard. Ensuite, recueillir les mouches dans des ensembles de 100 animaux sur un tampon de CO2, puis ajouter les mouches à un flacon préparé. Utilisez une boule de coton pour fixer les fioles fermées. Ensuite, placez les fioles sur le côté dans un incubateur écologiquement contrôlé. Préparez le tastant de contrôle de saccharose de 1 millimolaire en combinant 10 microlitres de solution saccharose de 100 millimères, 13 microlitres de colorant alimentaire rouge et 977 microlitres d’eau.

Ensuite, préparez le tastant expérimental de saccharose de 5 millimoirs. Puis, créez les chambres d’essai en obtenant une boîte de Pétri en plastique de 100 millimètres par 15 millimètres et en plaçant trois gouttes de tastant de commande de 10 microlitres aussi près que possible du bord de la plaque à la position de 12 heures. À la position de 3 heures, placez trois gouttes de tastant expérimental de 10 microlitres aussi près que possible du bord de la plaque. Placez trois autres gouttes du tastant de commande à la position de 6 heures. Placez ensuite trois autres gouttes du tastant expérimental à la position de 9 heures.

Ensuite, videz un flacon de 100 mouches affamées sur un tampon de CO2 juste assez longtemps pour anesthésier tous les animaux. Brossez les animaux au milieu d’une chambre d’analyse préparée et couvrez-la avec le couvercle du plat. Placez la chambre d’essai dans une boîte en carton opaque. Puis étiquetez l’extérieur de la boîte avec l’état et le génotype testés. Déplacez toute la configuration dans un incubateur. Après deux heures, placez les chambres d’essai, toujours contenues dans des boîtes en carton, directement dans un congélateur négatif de 20 degrés Celsius jusqu’à ce qu’elles soient prêtes pour la quantitation.

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