Journal
/
Biology
/
En hurtigere, høj opløsning, MTPA-GFP-baserede Mitokondriel Fusion Assay Erhvervelse Kinetiske data i flere celler i parallel anvendelse af konfokal mikroskopi
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
A Faster, High Resolution, mtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion Assay Acquiring Kinetic Data of Multiple Cells in Parallel Using Confocal Microscopy

En hurtigere, høj opløsning, MTPA-GFP-baserede Mitokondriel Fusion Assay Erhvervelse Kinetiske data i flere celler i parallel anvendelse af konfokal mikroskopi

DOI:
10.3791/3991-v

•

10:45 min

•

July 20, 2012

•

, , , ,
1Department of Neuroscience, Center for Neuroscience Research,Tufts School of Medicine, 2Department of Internal Medicine, Geriatrics & Gerontology,Wake Forest Baptist Medical Center, 3Department of Medicine,Boston University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:33Imaging Plate Preparation
  • 02:29Imaging Parameters for the Zeiss LSM 710 Confocal Microscope
  • 03:37Optimizing the Imaging Parameters
  • 04:49Mitochondrial-fusion Assay Set-up
  • 07:36Analyzing the PA-GFP Signal Intensity
  • 08:17Results: Representative Mitochondrial-fusion Assays
  • 09:49Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Mitokondrie fusion blev målt ved at spore ækvilibrering af photoconverted matrix-målrettet GFP over mitokondriske netværket over tid. Hidtil kunne kun en celle udsættes for en time lange kinetisk analyse ad gangen. Vi præsenterer en metode, der samtidigt måler flere celler, og dermed fremskynde indsamlingen af ​​data.

Tags

FasterHigh ResolutionMtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion AssayKinetic DataMultiple CellsParallelConfocal MicroscopyFusion ActivityPhoto-conversionPhotoactivatable GFP (mtPAGFP)EquilibrationLiving CellsTime Lapse ApproachScale UpAutomateLow Concentration Of TMRESignal IntensityPAGFP Expressing CellsSubcellular QuantificationCytoarchitectural Environment

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Fluorescens-baserede Måling af Store betjente Calcium indtastning i levende celler: fra kulturperler kræftcellen til at Skeletmuskel Fiber

Analyse af SNARE-medieret membranfusion anvendelse af en enzymatisk Cellefusion Assay

Samtidig pH-måling i Endocytic og Cytosoliske Rum i levende celler ved hjælp af konfokal mikroskopi

In vivo Klonale Sporing af hæmatopoietisk stamcelletransplantation og progenitorceller Præget af Fem fluorescerende proteiner ved hjælp af konfokal og multiphoton mikroskopi

Høj opløsning Time-lapse Imaging og Automatiseret analyse af mikrotubulusdynamik i levende menneske navlestrengsveneendotelceller

Høj opløsning respirometri at vurdere mitokondrie funktion i permeabiliseret og intakte celler

Samtidig måling af Mitokondriel Calcium og mitokondriemembranen Potentiale i levende celler ved Fluorescent Microscopy

Kombinere mitotiske celle synkronisering og høj opløsning Konfokal mikroskopi for at studere rollen af multifunktionelle cellecyklus proteiner under mitosen

Høj opløsning respirometri at måle mitokondrie funktion af intakt Beta celler i overværelse af naturlige forbindelser

Parallel høj gennemløb enkelt molekyle kinetisk analyse for site-specifikke DNA spaltning

Read Article