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Marcação metabólica de RNA recém-transcrita para alta resolução Gene Expression Profiling de síntese de RNA, Processamento e Decay em cultura de células
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Biology
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JoVE Journal Biology
Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA for High Resolution Gene Expression Profiling of RNA Synthesis, Processing and Decay in Cell Culture
DOI:

11:00 min

August 08, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:44Metabolic Labeling with 4-thiouridine
  • 03:05Thiol-specific Biotinylation of Newly Transcribed RNA
  • 05:09Separation of Labeled and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads
  • 07:00Recovery of Newly Transcribed RNA
  • 08:17Results: Metabolic Labeling of Newly Transcribed RNA
  • 10:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

RNA celular total fornece um modelo pobre para estudar mudanças de curto prazo na síntese de RNA e decadência, bem como a cinética de processamento de RNA. Aqui, descrevemos a marcação metabólica de RNA recentemente transcrito com 4-tiouridina seguido por biotinilação específica do tiol e a purificação do ARN recém transcritos que permitam ultrapassar estas limitações.

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