A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
从酵母中提取核酸
English
Share
Overview
使用酵母作为模式生物的众多优点之一是从培养的酵母细胞中可以提取出大量的生物大分子，包括核酸 (DNA和RNA).
本短片将讲解核酸提取的基本步骤。我们将先简单介绍酵母细胞的培养，收获和裂解，这些是提取所有生物大分子共同的起始步骤。然后，我们将讨论两种独特的分离核酸的方法：柱结合和相分离。另外，我们还将演示这些方法在实验室的几种用途，包括准备核酸用于不同的分子生物学实验，如PCR， southern杂交，定量蛋白表达水平在环境刺激下的变化,以及大量重组蛋白的纯化。
Procedure
今天我们要向大家演示怎样从酿酒酵母，也称面包酵母中纯化核酸。核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA)。本短片将讨论利用相分离和层析法从酵母中分离出这些核酸分子。 尽管有许多不同的纯化酵母核酸的方法，但多数方法的初始步骤是相同的。 首先从平板上挑取酵母单克隆细胞接种到YPD培养液。然后将其转移到摇床或旋转培养箱中，30℃过夜培养。…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
Transcript
Tags
Isolating Nucleic AcidsYeastSaccharomyces CerevisiaeBaker’s YeastDNARNAPhase SeparationChromatographyPurify Nucleic AcidsYeast CellsYPD MediaOptical DensityOD ValueCentrifugationResuspensionLysis BufferCell WallsEnzymatic TechniquesPhysical TechniquesSpheroplastsCell Lysis TechniquesSodium Dodecyl SulfateSDSHomogenization
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Isolating Nucleic Acids from Yeast. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
