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相互作用するリガンドおよび/またはアンタゴニストと、哺乳動物核内受容体残基を同定するために逆酵母ツーハイブリッドシステム
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Biology
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JoVE Journal Biology
Reverse Yeast Two-hybrid System to Identify Mammalian Nuclear Receptor Residues that Interact with Ligands and/or Antagonists
DOI:

10:51 min

November 15, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:47Construction of PXR and SRC-1 Fusions in Yeast Vectors
  • 03:49Yeast Two-hybrid Assays
  • 05:26X-gal Filter Assay
  • 06:32Liquid β-gal Assay
  • 07:49Results: X-gal Lift and β-gal Liquid Assay Interpretation
  • 09:06Conclusion

Summary

Automatic Translation

ケトコナゾールに結合し、プレグナンX受容体(PXR)の活性化に拮抗する。 PXR変異体の酵母ハイスループットスクリーニングは、ケトコナゾールが結合するための独自の領域を規定する。この酵母ベースの遺伝的方法は、表面結合部位と会合したリガンドを有する新規な核内受容体相互作用を検出します。

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