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In Vitro Ensayo de bioluminiscencia para la caracterización del ritmo circadiano en células epiteliales mamarias
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
In Vitro Bioluminescence Assay to Characterize Circadian Rhythm in Mammary Epithelial Cells
DOI:

11:56 min

September 28, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:53Concstruction of PER2 Promoter Driven Destabilized Luciferase Reporter Vector
  • 03:06Transforming Ligated Vector pGL[hPer2P/Luc2P/Neo] to E. coli
  • 05:28Transient Transfection of Cells with the Circadian Vector
  • 07:46Establishment of the In Vitro Bioluminescence Assay in Transiently Transfected MCF10A Cells
  • 08:52Results: Effects of Chemicls on the Cellular Biological Clock
  • 10:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Se presenta un ensayo de bioluminiscencia en vitro para determinar del ritmo circadiano celular en células epiteliales mamarias. Este método utiliza plásmidos de reportero de células de mamífero expresando desestabilizada luciferasa bajo el control del promotor del gen de periodo 2 . Puede ser adaptado a otros tipos de células para evaluar efectos de órgano-específicas en el ritmo circadiano.

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