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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
The TUNEL Assay
  • 00:00Overview
  • 00:59Principles of the TUNEL Assay
  • 03:06Generalized TUNEL Assay Protocol in Tissue Sections
  • 05:34Applications
  • 07:35Summary

Der TUNEL-Assay

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Overview

Eines der Markenzeichen der Apoptose ist die nukleare DNA-Fragmentierung durch Nukleasen. Diese Enzyme werden durch Caspasen, die Familie der Proteine aktiviert, die die Zell-Tod-Programm ausführen. TUNEL-Test ist eine Methode, die nutzt diese Funktion um Apoptotic Zellen zu erkennen. In diesem Test katalysiert ein Enzym namens terminal Deoxynucleotidyl Transferase die Zugabe von dUTP Nukleotide an den freien 3′ Enden des fragmentierten DNA. Mithilfe von dUTPs, die gekennzeichnet sind mit chemischen Tags, die Fluoreszenz oder Farbe produzieren können, können apoptotische Zellen gezielt identifiziert werden.

Jupiters Video auf der TUNEL-Test beginnt indem wir diskutieren, wie diese Technik verwendet werden kann, um Apoptotic Zellen zu erkennen. Dann gehen wir durch ein allgemeines Protokoll für TUNEL-Assays auf Gewebeschnitte und Visualisierung der Ergebnisse mit Fluoreszenz-Mikroskopie. Schließlich werden mehrere Anwendungen des Assays in die aktuelle Forschung abgedeckt werden.

Procedure

Der TUNEL-Test wird am häufigsten verwendet, um Zellen Apoptose, die eine Form des programmierten Zelltods ist zu erkennen. Apoptose ist ein wichtiger biologischer Prozess, während der Entwicklung und für die Aufrechterhaltung der Homöostase der Gewebe. TUNEL Färbung ermöglicht die Visualisierung und Quantifizierung der Apoptotic Zellen. Dies hilft Wissenschaftlern Wirksamkeit neuer Behandlungsmethoden für Krankheiten zu testen, in denen Apoptose entweder gehemmt wird, wie bei Krebs, oder verbessert, wie in Neurodeg…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The TUNEL Assay. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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