Journal
/
Genetics
/
Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9
JoVE Journal
Genetics
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
Endogenous Protein Tagging in Human Induced Pluripotent Stem Cells Using CRISPR/Cas9

Endogene Protein Tagging i menneskelige induceret pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/58130-v

•

14:48 min

•

August 25, 2018

•

, , , , ,
1Allen Institute for Cell Science

Chapters

  • 00:00Title
  • 02:29Ribonucleoprotein (RNP) Transfection for CRISPR/Cas9 Mediated Knock-in in hiPSCs
  • 05:15FACS-enrichment of putatively edited hiPSCs
  • 07:41Generating putatively edited clonal hiPSC lines
  • 10:36Cryopreservation of clonal cell lines in 96-well plate format
  • 12:21Results
  • 13:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Beskrevet her er en protokol til tagging endogent udtrykte proteiner med fluorescerende tags i menneskelige inducerede pluripotente stamceller ved hjælp af CRISPR/Cas9. Derfor redigerede celler er beriget af fluorescens aktiveret celle sortering og klonede cellelinjer genereres.

Tags

CRISPR/Cas9Endogenous Protein TaggingHuman Induced Pluripotent Stem CellsRibonucleoproteinFluorescent TagFACSClonal Cell LinesGene EditingLive Cell ImagingCellular StructuresCellular Processes

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Under anvendelse af et fluorescerende PCR-kapillær gelelektroforese Teknik til genotype CRISPR / Cas9-medieret Knockout Mutanter i et format med høj kapacitet

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

Primordiale kønsceller Transplantation til CRISPR/Cas9-baserede kvantespring i Xenopus

Mikroinjektion af CRISPR/Cas9 Protein i kanal havkat, Ictalurus punctatus, embryoner til Gene Editing

CRISPR/Cas9-medieret målrettede Integration In Vivo ved hjælp af en homologi-medieret End at deltage-baseret strategi

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

En hurtig og letkøbt Pipeline for generering af genomisk punkt mutanter i C. elegans bruger CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 gen redigering at gøre betinget mutanter af menneskelige Malaria parasitten, P. falciparum

CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein-medieret præcis Genredigering ved Rørelektroporation

Generation af definerede genomiske modifikationer med CRISPR-CAS9 i humane pluripotente stamceller

Read Article