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Proteína endógena de marcação em humanos induzida por células-tronco pluripotentes usando CRISPR/Cas9
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Endogenous Protein Tagging in Human Induced Pluripotent Stem Cells Using CRISPR/Cas9

Proteína endógena de marcação em humanos induzida por células-tronco pluripotentes usando CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/58130-v

•

14:48 min

•

August 25, 2018

•

, , , , ,
1Allen Institute for Cell Science

Chapters

  • 00:00Title
  • 02:29Ribonucleoprotein (RNP) Transfection for CRISPR/Cas9 Mediated Knock-in in hiPSCs
  • 05:15FACS-enrichment of putatively edited hiPSCs
  • 07:41Generating putatively edited clonal hiPSC lines
  • 10:36Cryopreservation of clonal cell lines in 96-well plate format
  • 12:21Results
  • 13:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Aqui descrito é um protocolo para marcação endogenamente expressas proteínas com etiquetas fluorescentes em células-tronco pluripotentes induzidas humana usando CRISPR/Cas9. Células presumidamente editadas são enriquecidas por fluorescência ativada celular classificação e linhas celulares clonal são geradas.

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CRISPR/Cas9Endogenous Protein TaggingHuman Induced Pluripotent Stem CellsRibonucleoproteinFluorescent TagFACSClonal Cell LinesGene EditingLive Cell ImagingCellular StructuresCellular Processes

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