11,852 Views
•
05:49 min
•
October 13, 2018
DOI:
Denne metoden kan bidra til å svare på viktige spørsmål innen atferdsnevrovitenskapfeltet, for eksempel hvordan du bedre kan forstå underliggende biologiske mekanismer for PTSD. Den største fordelen med denne teknikken er at den er robust, pålitelig, kvantitativ og kan utføres i flere arter. Begynn med å sette opp ett sett med frykt condition kamre for å tjene som kontekst A, og et andre sett med frykt condition kamre for å tjene som kontekst B.Plasser hver frykt condition kammer inne i en lyd dempe avlukke for å hindre inntrenging av støy utenfra.
Plasser deretter rutenettgulv i hvert fryktkondisjoneringskammer for fotsjokklevering, ved hjelp av et annet rutenettmønster for hver kontekst for å skille gulvtekstur mellom sammenhenger. Deretter plasserer du svart plexiglass trekantede innsatser i kontekst B for å skille den interne utformingen av de to kontekstene. Tørk av kammerveggene og dørene og spray pannene under gittergulvene med en fortynnet rengjøringsløsning.
Etter at gittergulvet er rengjort, kobler du til en støtgenerator og scrambler som er i stand til å levere et 1 milliamp eller lavere amplitudsjokk til hvert rutenett for fotsjokklevering. Til slutt, bruk et multimeter for å teste strømmen som leveres av sjokkgeneratoren ved å plassere hver sonde på en annen bar på rutenettet, og bekrefter at ønsket sjokkamlitud produseres. På dag én setter du opp kontekst A med rutenett og synlig lys.
Kontroller at multimeteret er festet til forskjellige stolper for å bekrefte ønsket støtamlitud. Transport dyr fra vivarium til eksperimentelle rommet i deres hjem bur plassert på en vogn, og plassere individuelt i de fire frykt condition kamre. For museeksperimenter, bruk sjokkgeneratoren og scramblers for å levere 10 ett sekund, ett milliamp fotstøt tilfeldig presentert over 60 minutter gjennom rutenettet gulvene i kamrene som inneholder traumer betinget.
For rotteeksperimenter, bruk sjokkgeneratoren og scramblers for å levere 15 ett sekund, ett milliamp fotstøt tilfeldig presentert over 90 minutter gjennom rutenettet i kamrene som inneholder traumer betinget. Etter 90 minutter for rotten, eller 60 minutter for museeksperimentene, returnerer alle dyr til sine hjemmebur og går straks tilbake til vivarium. På dag to setter du opp kontekst A og transporterer dyr til det eksperimentelle rommet som gjort på dag én.
Plasser dyr i kontekst A i åtte minutter, uten sjokklevering, og ta opp atferden i løpet av hele økten. Etter åtte minutter, returnere alle dyr til sine hjem bur og umiddelbart gå tilbake til vivarium. På dag tre setter du opp kontekst B med et annet sett med rutenettgulv enn de som brukes i kontekst A og svart trekantede eller hvite buede plexiglassinnsatser.
Bruk infrarødt eller nær-infrarødt lys om nødvendig for å belyse kamrene, og kontroller sjokkamlituden med multimeteret. Tørk ned kamrene og spray pannene under rutenettgulvene med løsningen som ikke brukes i sammenheng A.Neste, transportere dyr fra vivarium til det eksperimentelle rommet i et svart plastkar, og plasser dem individuelt i fryktkondisjoneringskamre. Etter en 180 andre baseline periode, levere enten ett sekund, ett milliamp fot sjokk for rotter, eller en enkelt to sekund, en milliamp fot sjokk for mus, til alle dyr.
Deretter fjerner du alle dyr 30 sekunder etter sjokklevering og går straks tilbake til vivarium. På dag fire av prosedyren, sette opp kontekst B som gjort på dag tre. Transport dyr fra vivarium til eksperimentelle rommet i samme transport som gjort på dag tre.
Plasser dyr i kontekst B i åtte minutter uten sjokklevering, og videoopptak frysing gjennom hele økten. Til slutt fjerner du alle dyr etter åtte minutter og går straks tilbake til vivarium. Resultatene indikerer at dyr i traumetilstanden viste betydelig høyere nivåer av frysing i sammenheng A sammenlignet med ingen traumekontroller, noe som indikerer oppkjøp av frykt for traumekonteksten.
Både traumer og ingen traumedyr viste minimalfrysingsnivå som ikke skilte seg fra hverandre. Videre viste traumedyrene lavere sjokkreaktivitet sammenlignet med ingen traumekontroller, og traumedyr viste større frysing sammenlignet med ingen traumekontroller, noe som indikerer at eksponering for traumatisk stress eller økt frykt umiddelbart etter mild stressor. Etter denne prosedyren kan andre metoder som den forhøyede plusslabyrinten, det åpne feltet og lysmørk boksen utføres for å svare på flere spørsmål som hvordan traumer påvirker angstlignende fenotyper.
Her beskriver vi detaljerte metodikken må utføre stress forbedret frykt læring (SEFL) eksperimenter, en prekliniske modell av posttraumatisk stresslidelse, både rotter og mus. Modellen benytter aspekter av Pavlovian frykt condition og frysing som en indeks av forbedret frykt i gnagere.
07:30
Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents
Related Videos
24535 Views
07:02
Trace Fear Conditioning in Mice
Related Videos
32572 Views
08:01
Compensatory Limb Use and Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Following Sensorimotor Cortex Injury in a Mouse Model of Ischemic Stroke
Related Videos
11342 Views
08:32
Disrupting Reconsolidation of Fear Memory in Humans by a Noradrenergic β-Blocker
Related Videos
22698 Views
09:29
Signal Attenuation as a Rat Model of Obsessive Compulsive Disorder
Related Videos
15329 Views
09:01
The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents
Related Videos
12421 Views
09:13
Testing Sensory and Multisensory Function in Children with Autism Spectrum Disorder
Related Videos
16354 Views
11:18
Quantifying Learning in Young Infants: Tracking Leg Actions During a Discovery-learning Task
Related Videos
10553 Views
08:10
A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits
Related Videos
19479 Views
07:59
Using Practice Testing, Public Speaking, and Source Monitoring to Examine the Influences of Learning Strategies and Stress on Episodic Memory
Related Videos
7808 Views
Read Article
Cite this Article
Rajbhandari, A. K., Gonzalez, S. T., Fanselow, M. S. Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder. J. Vis. Exp. (140), e58306, doi:10.3791/58306 (2018).
Copy