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Una purificación y análisis de actividad In Vitro de una (p) ppGpp sintetasa de Clostridium difficile
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
A Purification and In Vitro Activity Assay for a (p)ppGpp Synthetase from Clostridium difficile
DOI:

09:53 min

November 03, 2018

, ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:44Protein Purification by Nickel Affinity Chromatography
  • 03:30Protein Activity Assay by Thin Layer Chromatography
  • 07:30Results: Thin Layer Chromatography Reveals that C. difficile RSH is an Active ppGpp Synthetase
  • 09:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aquí, describimos un método para purificar enzimas pyrophosphokinase etiqueta histidina y utilizando cromatografía en capa fina de sustratos marcados radiactivamente y productos para análisis de la actividad enzimática in vitro. El ensayo de actividad de la enzima es ampliamente aplicable a la quinasa, ciclasa de nucleótidos o reacción de transferencia de fósforo cuyo mecanismo incluye la hidrólisis de nucleótidos trifosfato.

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