/
/
En rening och In Vitro aktivitet Assay för en (p) ppGpp kväveoxidsyntas från Clostridium difficile
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:44Protein Purification by Nickel Affinity Chromatography
- 03:30Protein Activity Assay by Thin Layer Chromatography
- 07:30Results: Thin Layer Chromatography Reveals that C. difficile RSH is an Active ppGpp Synthetase
- 09:01Conclusion
Här, beskriver vi en metod för rening av histidin-taggade pyrophosphokinase enzymer och utnyttja tunnskiktskromatografi av radioaktivt märkt substrat och produkter till assay för enzymatisk aktivitet in vitro. Enzym aktivitet analysen är i stort sett tillämpliga till Kinas, nukleotid cyclase eller fosfor-överföring reaktion vars mekanism inkluderar nukleotid trifosfat hydrolys.
