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Come quantificare la frazione di proteine fluorescenti di fotoattivazione alla rinfusa e in cellule vive
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells
DOI:

11:03 min

January 07, 2019

,

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:20Cell Culture and Transfection
  • 02:31Imaging and Photoactivation
  • 05:45Imaging Analysis and Algorithm for Ratiometric Intensity-based Quantification of Photoactivation Efficiency
  • 09:09Results: Maximizing Photoactivation Efficiency
  • 09:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Qui, presentiamo un protocollo che coinvolge fuse spettralmente distinti geneticamente accoppiati e proteine fluorescenti. Queste chimere di proteina fluorescente permettono quantificazione della frazione PA-FP è fotoattivazione di essere fluorescente, cioè, l'efficienza di fotoattivazione. Il protocollo rivela che i diversi modi di fotoattivazione rendimento fotoattivazione diverse efficienze.

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