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Cómo cuantificar la fracción de proteínas fluorescentes fotoactivado a granel y en células vivas
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells
DOI:

11:03 min

January 07, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:20Cell Culture and Transfection
  • 02:31Imaging and Photoactivation
  • 05:45Imaging Analysis and Algorithm for Ratiometric Intensity-based Quantification of Photoactivation Efficiency
  • 09:09Results: Maximizing Photoactivation Efficiency
  • 09:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aquí, presentamos un protocolo que implica genéticamente acoplado espectralmente distinto photoactivatable y proteínas fluorescentes. Estas quimeras de la proteína fluorescente permiten la cuantificación de la fracción PA-FP que es fotoactivado a ser fluorescentes, es decir, la eficacia de la fotoactivación. El protocolo revela que diversos modos de fotoactivación rendimiento fotoactivación diferentes eficiencias.

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