Neuroscience
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使用 Vivo 单纤维记录和带附骨神经的固定背道根结条，以检查传导失败机制
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单纤维记录是一种有效的电生理技术，适用于中枢和周围神经系统。随着与附着的坐骨神经制备完整的DRG，检查传导失效的机制。这两种方案都有助于了解周围神经系统与疼痛的关系。
Transcript
单纤维记录在记录神经纤维的活动中起着重要的作用。特别是活动传递外围感觉从接受场到神经元在后根结节。在光纤记录波中，提供持续时间长度，具有记录对自然刺激反应的能力，后来扰细胞间环境。
在单个光纤记录中需要中子自动适合这种情况。治疗师称，坐骨神经是综合 DRG 测试的准备要求。演示情况的结果显示了几乎所有的神经细节在良好的，物理贴花阶段。
第三，集成了整个 DRG 准备。要开始此程序，请准备在手术前对手术器械进行消毒。然后准备一到两升正常林格的细胞外溶液，并储存在四摄氏度，直到使用。
要暴露坐骨神经躯干进行记录，首先，切开麻醉鼠的皮肤和大腿背部的肌肉。然后，沿着股骨二头肌进行钝解剖。用眼科剪刀和玻璃分离针小心分离坐骨神经躯干，使用林格溶液保持组织湿润。
接下来，通过将皮肤缝入周围的槽，将动物固定到自制的金属箍上。稍微向上拉皮肤以建立一个液体浴。在近端暴露一厘米的坐骨神经躯干。
在神经躯干下面放置一个棕色的小平台，以增强对比度，以便清楚地观察细神经躯干。随后，在神经干干顶部涂抹一些热液石蜡，以防止纤维表面干燥。如果神经干干周围有外化，请取出液体。
要执行录制，请选择铂丝作为录制电极。吃，最后创建一个小钩子。之后，将电极连接到微操纵器上。
在浴池中，在皮下组织旁边放置一个参考电极。分裂脊柱杜拉和皮亚母体，获得坐骨神经。在 25% 放大的立体显微镜下，拾起一个精细的分片，将轴的近似端悬挂在记录电极的挂钩上。
使用机械模拟和热刺激确定单个非概念 c 纤维的接受场。如果神经纤维的燃烧对机械刺激和热水有反应，则视为多摩托、非概念性c纤维。接下来，在识别场的皮肤中插入两个针刺激电极，间隔为两毫米，用于传递电刺激。
在示波器上显示作用电位的波形式，并采用信号采样速率为 20 千赫的 d 板计算机。然后，使用数据采集软件记录峰值，并在以后使用专业软件对其进行分析。要测量传导失败，请将不同频率的重复电极刺激传递到 c 光纤 60 秒。
让纤维在刺激之间放松 10 分钟。然后，计算故障数与交付的重复刺激脉冲数的比率，乘以 100%以获得传导失败程度。要暴露背根结节，首先在 l4 到 l5 段从背面的中线切开皮肤。
接下来，去除肌肉脊椎过程椎骨和横向过程使用骨隆格，并暴露脊髓NDRG身体。覆盖暴露的脊髓，NDRG，用普通林格的细胞外溶液浸泡棉花，以保持神经活动。停止出血，并删除血液，如有必要。
随后，使用眼科剪刀，去除l4至s1骨骼结构上方的椎前体，以暴露 DRG 和连接的脊柱神经。在皮肤上切一下，露出大腿中间的坐骨神经。分离和断开坐骨神经从神经的远端，它进入肌肉内部。
在切割前，在神经的尖端用手术线将神经躯干与手术线进行起立。然后，通过提升神经结扎点，将坐骨神经与底层结缔组织分离。从脊髓中去除dura，将DG从底层结缔组织分离，直到到达坐骨神经的相邻部分。
因此，用附着的坐骨神经分离 DRG 的整个制备。要清除 DRG 的表面，在 4 倍放大时，请使用钳子小心去除 l4 到 l6 DRG 表面的脊柱杜拉。将具有附着坐骨神经的 DRG 放在含有一毫升混合酶的玻璃管中。
在37摄氏度的水浴中消化15分钟。15分钟后，抬起手术线的端，将制剂移动到装满正常振铃器的细胞外溶液的盘中，以洗去酶。然后，将消化的 DRG 转移到装有氧振环器的细胞外溶液的容器中进行记录。
要执行记录，请准备细胞内溶液，并将其存放在零摄氏度，直到使用。使用切片锚，稳定神经端，将神经端连接到吸力刺激电极。在 40 倍放大时，可视化并选择具有水 emersion 目标的 DRG 神经元。
折叠电极，用细胞内溶液填充。将电极连接到支架上，并在管道中施加正压，最终电阻为 4 到 7 兆欧姆。接下来，将电极带到电池表面。
然后，对移液器施加负压以形成密封。达到千兆孔密封后，将膜电位设置为负 60 毫伏，并建立所有细胞记录模式。随后，通过吸力电极向坐骨神经提供5至50赫兹的重复刺激，以筛查传导失败。
测量 AHP 从基线到峰值的振幅和 80% AHP 持续时间。此图显示了大鼠对 10 赫兹电刺激的反应，从大鼠那里重新发射的原始连续记录。每 20 次扫描显示，并显示从上到下。
插入显示具有代表性的操作潜力。以下是来自CFA注射大鼠的单c纤维的录音，以响应与上一个面板相同的刺激。此图显示了在控制条件下对五赫兹刺激的连续发射反应，或在 CFA 分级大鼠的小直径 DRG 神经元中对 ZD7288 的不同浓度进行连续记录。
内集显示指定记录周期的扩展跟踪。黑点表示尖峰故障。AHP 在控制中显示了一个更大的上升斜率。
在ZD7288应用的125微摩尔之后观察到较小的上升坡度。当一次单五录音时，我认为重要的是切纤维会保持动物良好的任何安全状态。和中子周围的微环境。
单纤维记录的结合和与坐骨神经连接的完整的 DRG 的应用，增进了我们对与疼痛有关的周围神经系统的理解。
Tags
神经科学， 问题 150， 单纤维记录， 多模态感知 C 纤维， 背根结条 （DRG）， 传导失败， 超极化电位 （AHP）， 镇痛Related Videos
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