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Visualization of Endogenous Mitophagy Complexes In Situ in Human Pancreatic Beta Cells Utilizing Proximity Ligation Assay

Visualização de complexos de Mitophagy endógenos in situ em células beta pancreáticas humanas utilizando o ensaio de ligadura de proximidade

DOI:
10.3791/59398-v

•

08:40 min

•

May 02, 2019

•

,
1Department of Internal Medicine, Division of Metabolism, Endocrinology and Diabetes,University of Michigan, Ann Arbor, 2VA Ann Arbor Healthcare System

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:32Human Islet Sample Single Cell Dissociation
  • 02:14Single Cell Adherence and Fixation and Immunohistochemistry
  • 03:24Proximity Ligation Assay (PLA)
  • 04:38Imaging
  • 06:00PLA Interaction Quantification
  • 07:18Results: Representative Beta Cell Mitophagy Analysis
  • 08:08Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Este protocolo esboça um método para a análise quantitativa da formação complexa da proteína do mitofagia especificamente em pilhas beta das amostras preliminares do Islet humano. Esta técnica permite assim a análise da mitofagia do material biológico limitado, que são cruciais em amostras pancreatic humanas preciosas da pilha beta.

Tags

Keywords: MitophagyProximity Ligation AssayHuman Pancreatic Beta CellsEndogenous Mitophagy ComplexesImmunohistochemistryUbiquitin-specific Peptidase 8Neuregulin Receptor Degradation Protein-1Beta Cell Marker

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