Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Utvärdering av Koronarflödesreserv efter myokardischemi Refusion hos råttor
Chapters
Summary June 28th, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Koronar flödes reserven (CFR), definieras som förhållandet mellan maximalt koronarblodflöde till vilande koronarblodflödet. Vi presenterar ett protokoll för att utvärdera CFR hos råttor via ultraljud, vilket ger möjlighet att förutsäga kardiovaskulära riskfaktorer i avsaknad av obstruktiv kranskärlssjukdom.
Transcript
Det övergripande målet med denna metod är visualiseringen av den vänstra främre fallande kranskärlsfunktionen hos råttor med hjälp av ekokardiografi för att beräkna koronar flödesreserv. Denna metod erbjuder ett viktigt bedömningsverktyg för en diagnos av mikrovaskulär dysfunktion i sjuka hjärtan och för utvärdering av potentiella behandlingar under hela studien. Även om reperfusion terapi har visat sig bärga äventyras kammarokardium och att förbättra vänster Ventrikulärt funktion, funktionella avvikelser av små födans fartyg kan uppstå efter recanalization av födans gatan.
Denna metod kan ge insikt i kranskärlsmikrocirkulationen av råttor, liksom i andra modeller, inklusive hjärtinfarkt, och tryckvolym överbelastning av vänster kammare. Innan pre-ischemi reperfusion kirurgi ultraljud imaging, bekräfta en brist på svar på tå nypa i en sövd Fischer 344 råtta. Raka håret från bröstet.
Applicera salva på djurets ögon och placera djuret i ryggläge på en 37 till 38 grader Celsius inbyggd uppvärmningsplattform. Anslut 13 till 24 megahertz linjära sonden till ultraljudsmaskinen. Ställ in applikationsförinställningen till hjärtbildningsinställning och använd skensystemet för att placera sonden för att erhålla den parasternal korta axelvyn.
Använd XY-axelns mikromanipulator för att flytta sonden i rostral riktning för att lokalisera lungartären. Flytta sonden, vilket gör den vänstra ventrikeln lättare synlig. När B-lägesbilden har fångats och Cine Stored klickar du på Färg Doppler och visualiserar kranskärlet i den korta axeln.
Den röda färgen, som observerats i realtid, är ett tecken på flödets riktning. Efter visualisera den nedre främre fallande kranskärl i färg Doppler läge, ändra läge till pulsen våg och leta efter förekomsten av en gul indikator linje på kranskärl. Placera den gula pulsvågslinjen i mitten av kranskärlen, var försiktig med att vinkeln är parallell med flödets riktning och använd Cine Store för att fånga upp hastigheten på vilohastigheten vänster främre fallande koronarflöde och vågvågens toppdiastoleformer.
Efter att ha erhållit vila vänster främre fallande flödeshastighet, placera en liten remsa av gasbinda runt basen av svansen och använda hemostats att greppa och vrida tourniquet att tillämpa tryck, vilket gör att venen att förstora. Placera försiktigt en 25-gauge infusion fjäril nål fäst vid en 10-milliliter spruta laddad med dobutamin i dilaterad svans ven och stabilisera nålen med lim och en bit av kirurgiska tejp. När infusionsledningen har säkrats, ta bort hemostaterna och tourniquet för att återvinna flödet och placera sprutan i en infusionspump inställd för att injicera 20 mikrogram per kilogram per minut.
Under infusionen, noggrant övervaka vänster främre fallande artär topp och hjärtfrekvens, periodiskt registrera vänster främre fallande gatan puls våg toppar i Doppler läge under dobutamine-inducerad stress villkor. Efter den främre fallande födans gatan toppar och hjärtfrekvens har planat ut under utmaningen, stoppa infusionen, ta bort svansvenen infusionsset, och ta bort djuret från plattformen. Sedan, använd topphastighet verktyget för att erhålla toppen diastolic hastigheter från bilderna och beräkna coronary flöde reserv index som förhållandet mellan den vänstra främre fallande gatan stress topp diastoliskt flöde hastighet till vila vänster främre fallande artär topp diastoliskt flöde hastighet.
Med hjälp av en fiberoptisk ljuskälla, intubate råtta med en 18-gauge IV kateter och anslut till katetern till en ventilator. Därefter använder en 8-0 monofilament sutur till ligate vänster främre fallande artär genom en 15-millimeters öppning vid femte intercostal rymden med en vanlig knut i 30 minuter. I slutet av ischemiperioden, visuellt bekräfta ischemi via missfärgning av hjärtytan och släppa ligaturen.
Reperfusion kan verifieras genom att det tidigare missfärgade området i hjärtmuskeln har varit rödfärgat. 72 timmar efter operationen, mät koronarflödet och koronarflödesreserven som det visats, och jämför mätningarna med de mätningar som erhållits före skadan. I detta representativa experiment, innan ischemi reperfusion kirurgi, vilogen vänster främre fallande födans gatan hastighet mättes som cirka 423 millimeter per sekund till mer än dubbelt hastigheten efter dobutamine infusion.
72 timmar efter ischemi reperfusion, viloning vänster främre fallande födans gatan hastighet var betydligt högre jämfört med vila vänster främre fallande födans gatan hastighet före operationen. Stressresponsen på ett dobutamintest efter skadan reducerades avsevärt jämfört med svaret före operationens svar. Koronarflödesreserven beräknas som förhållandet mellan toppflödeshastigheten under stressen och viloflödeshastigheten och var cirka 2,1 hos unga råttor före operationen, men reducerades signifikant 72 timmar efter skadan.
Dessutom fanns det inga betydande förändringar i systoliskt funktion av vänster Ventrikel 72 timmar efter skadan. Efter dess utveckling, denna teknik gör det möjligt för forskare att utforska och använda ultraljudsavbildning av kranskärl i små djurmodeller som exakt efterliknar mänskliga sjukdomstillstånd. Efter att ha sett den här videon, bör du ha en mycket god förståelse för hur man mäter koronar blodflödet och utvärdera koronar mikrocirkulation i ett litet djur hjärtsjukdom modell.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.