יישום של רטבאליות העיסוי העקבי של העכבר וניטור השינויים הנובעים בלחץ שרירי

הפרוטוקול שלנו יכול להיות שימושי במערכות ובמנגנון. והמידע הנכון מראה את ההשפעה של מתח פיזי ועיסוי. מערכת ההשלמה המחזורית המקומית שלנו היא הרבה יותר פשוטה.

השיטות הקונבנציונליות אינן נדרשות להוספה מקומית. החל סרט כירורגי על הגפיים האחוריות הדו-צדדיות בתקרת השופע עם מפרקי הברך מורחבים ומפרקי הקרסול מכופפים. מניחים חוט אלומיניום על תא המטען ברמת עמוד השדרה L4-5, וסליל את החוט בתצורה ספירלית סביב הגפיים האחוריות עם פערים של חמישה מילימטרים בין כל סיבוב של הספירלה.

כדי למזער את האפשרות לברוח מהחיווט, כוונן ידנית את תצורת החוט כדי לשתק את מפרקי הירך בתצורה של 90 מעלות של חטיפה. ואז להחזיר את העכבר לכלוב הבית שלו עם ניטור עד החלמה מלאה. כדי למדוד את הלחץ השרירי gastrocnemius תוך שרירי למקם את העכבר הרדמה במצב נוטה לגלח, depilate, ו מעקרים למחצה את העור של העגל האחורי.

השתמש באזמל כדי לבצע חתך של שני מילימטרים בעור החיטוי. ולהכניס מחט שוכנת 20 מד לתוך שריר gastrocnemius בזווית של 150 עד 170 מעלות על פני העור. לאחר מכן, באמצעות נדן הפלסטיק של המחט כמדריך, מניחים חיישן טלמטר לחץ דם באמצע הבטן של שריר gastrocnemius.

להקיף את העור עם תפר ניילון 4-O. לאחר מכן, השתמש במספר משקולות שונות של יחידה גלילית כדי להחיל דחיסה גלילית מקומית על שריר השוק למשך דקה אחת. ולפקח על הלחץ ה תוך שרירי באמצעות התוכנה המתאימה לניתוח אותות ביולוגיים.

לטיפול מקומי בדחיסה מחזורית, יש לנתק את העכבר הרדמה מהחיווט האחורי. ולמקם את החיה בתצב נוטה. כוונן את הגפיים האחוריות כך שמפרקי הברך יוארכו ומפרקי הקרסול יתכופפו כשהעגלים פונים כלפי מעלה.

ומזיזים אנכית יחידת משקל גלילית, מכוסה כרית מרופדת, מעל שריר השוקית בהרץ אחד במשך 30 דקות ביום במשך שבעה ימים. לאחר כל התקף יומי של דחיסה חיווט מחדש את הגפיים האחוריות של העכבר לפני החזרת החיה לכלוב הבית שלה. בסוף הניסוי depilate משטח העגל האחורי ולעשות חתך בעור כדי לאפשר הפרדת שרירי gastrocnemius מן העצם טיביופיבי.

להקפיא במהירות את רקמת השריר שנקטפה בתסתר אופטימלי טמפרטורת חיתוך מורכבת. ולהשתמש cryostat כדי להשיג חלקים של שרירי gastrocnemius על מגלשות זכוכית. עבור תיוג אימונוהיסטוכימי להפשיר ולייבש את החלקים על ידי ייבוש אוויר בטמפרטורת החדר לפני השימוש בעט הידרופובי לצייר טבעת סביב חלקי הרקמה על כל שקופית.

לאחר מכן, מקם את המגלשות בתא הלחות. ולהוסיף 100 microliters של חוצץ חסימה לכל צד. לאחר 30 דקות בטמפרטורת החדר לשטוף את המגלשות עם שתי 5 דקות לשטוף PBS-T, לפני תיוג החלקים עם 100 microliters של הנוגדן העיקרי של עניין לילה בטמפרטורת החדר.

למחרת בבוקר לשטוף את השקופיות 3 פעמים PBS-T במשך 5 דקות לכל לשטוף. ולתייג את הדגימות בנוגדן משני מתאים למשך שעה בטמפרטורת החדר, מוגן מפני אור. בסוף הדגירה, לשטוף את השקופיות 3 פעמים PBS-T טרי כפי שהודגם.

ולהכתים את הגרעינים עם 100 microliters של DAPI במשך שלוש דקות בטמפרטורת החדר בחושך. לאחר מכן, לשטוף את השקופית שלוש פעמים נוספות. ולהרים את הדגימות עם מדיום הרכבה תואם ותעודות כיסוי.

לניתוח היסטומורפי, מקם את השקופיות על הבמה של מיקרוסקופ פלואורסצנטי והצג את הדגימות מתחת לסובייקטיבי 20-X במסננים המתאימים. לאחר מכן, בתוכנת ניתוח התמונה למדוד את האזור חתך רוחב של כל myofiber ולספר את מספר התאים המבטאים את סמנים ניסיוניים של עניין. אזור חתך הרוחב של gastrocnemius myofiber מופחתים באופן משמעותי על ידי קיבוע הגפיים האחוריות.

יתר על כן, ניתוח כתמים immunofluorescent מגלה כי תאים המבטאים MCP-1 ו TNF-אלפא גדלים באופן משמעותי ברקמות השריר gastrocnemius של גפיים אחוריות משותקות. יחד, עם הגידול בתאים מוכתמים באופן חיובי עם F4/80, נראה כי קיבוע הגפיים האחוריות מיזום ניוון שרירי השוק, הכולל תגובות דלקתיות מקומיות, כולל הצטברות מקרופאג’. בין מספר סדרי גודל שונים של דחיסה מחזורית מקומית נבדק על ידי שינוי המשקל של היחידה הגלילית, הדחיסה המתאימה 50 מיליליטר של גלי לחץ בין שרירי כספית, נראה כדי להקל בצורה היעילה ביותר על חוסר התנועה המושרה ירידה באזור חתך רוחב myofiber ולהגדיל את הצטברות המקרופאג בשרירי gastrocnemius.

דחיסה מחזורית מקומית של 66 גרם, המיושמת ב-1 הרץ במשך 30 דקות ביום במשך 7 ימים, מקלה באופן משמעותי על הירידה הנגרמת על ידי קיבוע שנצפה באזור חתך רוחב מיופייבר של שרירי הגסטרוקנמיוס. יותר, דחיסה מחזורית מקומית ממתן חלקית קיבוע המושרה ירידות בכוח התכווצות של שרירי surae תלת הגוף. בנוסף, דחיסה מחזורית מקומית ממתן את העלייה F4/80 חיובי, TNF-אלפא חיובי, ו MCP-1 תאים חיוביים אחד ברקמת השריר gastrocnemius של גפיים אחוריות משותקות.

הגישה שלנו תספק בסיס מדעי לעליית שרירים בחולה והאסטרטגיה הפוטנציאלית שלנו להליך מונע. החולדה מצאה את חוסר הפעילות הגופנית המוגבל. באמצעות המערכת שלנו, התחלנו להעריך את רוב החולים כי השרירים חסר מכונאי בחולה.

דרך תעשייתית מקומית מתונה לעשות את זה עושה ניוון שרירים המושרה קיבוע מושלם.