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Ein semi-quantitativer Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) Assay zur Untersuchung der Rapamycin/mTOR-Interaktion
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Chapters
- 00:04Title
- 00:47Collect and Lyse Cells
- 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
- 03:28Western Blot Analysis
- 03:59Results: Rapamycin Inhibition
- 05:03Conclusion
In dieser Studie haben wir die Datenanalysefunktionen des DARTS-Experiments verbessert, indem wir die Veränderungen der Proteinstabilität überwacht enden und die Affinität von Protein-Liganden-Wechselwirkungen schätzen. Die Wechselwirkungen können in zwei Kurven dargestellt werden: eine proteolytische Kurve und eine Dosis-Abhängigkeits-Kurve. Wir haben die mTOR-rapamycin-Interaktion als beispielhaften Fall genutzt.
