Journal
/
Biochemistry
/
ラパマイシン/mTOR相互作用を研究するための半定量薬物アフィニティ応答性標的安定性(DARTS)アッセイ
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

ラパマイシン/mTOR相互作用を研究するための半定量薬物アフィニティ応答性標的安定性(DARTS)アッセイ

DOI:
10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

, , , ,
1Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, 2Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:47Collect and Lyse Cells
  • 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
  • 03:28Western Blot Analysis
  • 03:59Results: Rapamycin Inhibition
  • 05:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

本研究では、タンパク質安定性の変化をモニタリングし、タンパク質リガンド相互作用の親和性を推定することにより、DARTS実験のデータ解析能力を強化した。相互作用は、プロテオティック曲線と線量依存曲線の 2 つの曲線にプロットできます。例示的なケースとしてmTOR-ラパマイシン相互作用を用いてきた。

Tags

DARTSDrug Affinity Responsive Target StabilityMTORRapamycinProtein-ligand InteractionProteolytic CurveDose-dependence Curve293T CellsCell LysisBCA AssayPronaseProtease Inhibitor CocktailSDS-PAGE

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

HCN1とTRIP8bの間のタンパク質 - タンパク質相互作用の小分子阻害剤を同定するための方法

示差走査熱量測定 - タンパク質抗原の熱安定性および立体配座を評価するための方法

酵素的に活性G4 Resolvase1の精製のためのG-四重鎖DNA親和性のアプローチ

シンプルで堅牢、かつ高スループットの単一分子 DNA 分子の輸送を研究するためのストレッチ法の実装を流れ

結果菌株のペプチド親和性試薬の発見と解析のため細菌表示ライブラリの半自動バイオパニング

異種タンパク質複合体-DNA相互作用研究のための改変酵母1ハイブリッドシステム

ベンチトップ固定金属アフィニ ティー ・ クロマトグラフィー、再構成し、Polyhistidine のアッセイ学部の研究室の金属をタグ付き

アフィニティクロマトグラフィー樹脂の急速な発達のための活性化架橋アガロース - ケーススタディとしての抗体捕捉

膜蛋白質相互作用解析用のネイティブ細胞膜ナノ粒子システム

液体クロマトグラフィー質量分析とバイオインフォマティクスによるペプチドグリカンの半定量分析

Read Article