מיטוב תהליכים באמצעות תפוקה גבוהה מיקרו-Bioreactors שחקנים בסינית טיפוח תא שחלה אוגר

בסרטון זה, המשתמשים הציגו את התוכנה מיקרו bioreactor עם תכנון וביצוע של עיצוב של ניסויים או DOE. שסתומי העזר של המנתחים מוכחים גם כדי לייעל את מצב התהליך. שילוב של מיתון בתוכנת מיקרו bioreactor אוטומטית כבר רשמי עבור ניתוח נתונים.

מספר רב של ניסויים ניתן לתכנן ולבצע בו זמנית בקנה מידה קטן. הפגנת ההליך תהיה תמאנה נגריק, דוקטורנטית מהמעבדה שלי. התחל עם ההליך הטרום-תרבותי בטיפוח ראשי כמתואר בפרוטוקול הטקסט.

כדי ליצור ניסוי חדש, פתח את תוכנת התרבות העצמית של Amber, ובכליון המבוא, לחץ על, צור ניסוי חדש. בכרטיסית הניסוי החדשה, הזן את שם הניסוי יחד עם התאריך שבו הוא יתבצע. הפעל את המחסום לתחנת התרבות בכלי השיט שישמשו במהלך הטיפוח.

תגי DOE להוספת אוטומטית יופעלו גם למעבר קל במהלך התכנות של ניסוי DOE. לחץ על הבא” כדי לעבור לטבליה הבאה. כדי להגדיר מידע על הוספת מדיה לכלי השיט, יחד עם אנטי קצף, inoculum, הזנה, וגלוקוז, להפעיל את צלחת להוסיף מדיה”.

הגדר את סוג הלוח, השם והמיקום של הלוח המכיל את המדיום. לחץ על הוספת מדיה לכלי שיט. הזן את עוצמת הקול של המדיה שיש להוסיף לכלי הדם.

הגדר את מיפוי העברת המדיה מהצלחת לכלי הדם. לחץ על הבא” כדי לעבור לטבליה הבאה. לאחר שהמידע המדיתי מוזן לתוכנה, הקצה את תנאי הטיפוח.

לחץ על מדיה תנאי, ולמלא את הטמפרטורה, היעד לעשות, גבול PH העליון, ערבוב סל”ד. לאחר מכן לחצו על ‘ערבוב כלפי מעלה'” או על תוך ערבוב כלפי מטה. כדי להגדיר תוספת של inoculums לתוך כלי, להפעיל להוסיף צלחת תא.

הגדר את סוג הלוח, השם והמיקום של הלוח המכיל את המדיום. לחץ על הוספת תאים לכלי הדם. הזן את זמן החיסון ואת נפח המדיה שיש להוסיף לכלי השיט.

הגדר את הנתיב שנסע המטפל בנוזלים כדי להעביר את התא מהצלחת לכלי הדם. לחץ על הבא” כדי לעבור לטבליה הבאה. כדי להגדיר תוספת של הזנה, גלוקוז ואנטי קצף, הפעל את צלחת ההוספה והגדר את סוג הצלחת, השם והמיקום.

לחץ על הוספת הזנה לכלי שיט, והזן את נפח ההזנה שיש להוסיף לכלי הדם. בהתאם לטיפוח, הוסף את מספר תוספת ההזנה. לטיפוח זה, הכור מוזן לאחר 72 שעות כל 24 שעות.

הוסף באופן ידני את השהיית הזמן בין ההזנה על-ידי הזנת הנתונים לעיכוב מתאים שנוספו. היום הראשון של האכלה הוא לאחר 72 שעות של חיסון, הבא הוא אחרי 96 שעות, וכן הלאה. הגדר את מיפוי העברת ההזנה מהצלחת לכלי הדם.

להגדרת דגימה במהלך הטיפוח, הפעילו את לוחית הוספת הדגימה” והגדירו את סוג הלוח, השם והמיקום. בדוק לקחת דגימה מכלי”ולהזנים את נפח המדגם כדי להסיר מן כלי הדם. ודאו שהנפח לא ירד מתחת ל-10 מיליון מיליטרים במהלך הטיפוח כולו.

הוסף את מספר הדגימות שיש לקחת במהלך הטיפוח. בדומה להאכלה, הוסף את זמן הסרת הדגימה מהכלי עבור כל נקודת דגימת קלט. שמור את התהליך.

כעת הוא מוכן להוצאה להורג. לבסוף, להגדיר את המיפוי של העברת המדגם מן כלי לצלחת. פתח את תוכנת אמבר 15 DOE.

לחץ על חקירה”ובחר חדש. הזן את שם חקירת DOE החדשה בתיבת הדו-שיח יצירת חקירה”. על מנת להקצות ניסוי לחקירת DOE, פתח את המתכון שנוצר כדי ללמוד את הפרמטרים השונים.

לחץ על עיון, ובחר את הניסוי המתאים. תגי כלי השיט כבר מגויסים לעמודה. כדי להגדיר את גורם DOE הרצוי, בחר את הפרמטר ולחץ על העמודה שכותרתה, גורם DOE.

בחר חדש” והוסף את היחידות, הקיצור, כמו גם את הגבול התחתון והגבוה של הגורמים. בכרטיסיה תגובות, הגדר את הערכים שיש לקחת בחשבון עבור ניתוח הנתונים. לחץ על עריכת תגובות DOE והגדר את שם התגובה, הקיצור, היחידות והמגבלות המינימליות והמקסימום.

לאחר הגדרת התגובות, בחר את משתנה הענבר עבור כל תגובה והגדר. תגובה יכולה להיות משויכת באופן אוטומטי עם משתנה bioreactor מיקרוב. בחר את המשתנה הנדרש מהרשימה הנפתחת.

שנה את המשוואה עבור כל תגובה בהתאם לדרישה. האפשרויות בין הנתונים המינימליים, המרביים, הראשונים, האחרונים והממוצעים. כדי ליצור עיצוב, השתמש באשף הפעלת העיצוב כדי לבחור את סוג העיצוב הניסיוני ולהוסיף או להסיר את מספר השכפולים ונקודות המרכז.

בחר את המטרה, הקובעת את בחירת העיצובים והדגמים. סיים וצור מנות עבודה שניתן לייבא לתוכנה לתרבות עצמית של Amber כמתואר בפרוטוקול הטקסט. בכרטיסיה ניסוי, לחץ על יצירת ניסוי DOE, ול איתור מנת העבודה שנוצרה באמצעות תוכנת DOE.

אתחל את התהליך על-ידי לחיצה על התחל. לאחר ביצוע הניסוי, יצא את הנתונים באמצעות תוצאות DOE לייצוא. החלון ‘תוצאות DOE’ של הייצוא נפתח, והשורות המציינות את כלי התרבות והתחנה מפורטות בטבלה.

בחר את השורות הרצויות ולחץ על ייצוא שורות נבחרות” או ייצוא נתונים ניסיוניים” כדי לאחסן את כל התוצאות ולשמור את הקובץ לניתוח נוסף. יבא את הנתונים למודול Amber DOE על-ידי מעבר ללשונית תוצאות ובחירת תוצאות ייבוא. אתר את קובץ הנתונים הרצוי ולחץ על נתח תוצאות.

צמיחת התאים בביו-רקטורים האוטומטיים של המיקרואורגניזמים דומה לזו של הביו-רקטורים הרב-תכליתיים. בהשוואת ריכוז התא משלושה קשקשים שונים, הוא ציין כי bioreactor מיקרובי אוטומטי 15 מיליליטר מחקה את bioreactor זכוכית שני ליטר. התוצאות של בקבוק לנער מושווים גם כדי להציג את היתרון של אמבר.

ההשפעה של מהירות ערבוב שונה PH נחקרת במיקרואורגניזמים האוטומטיים. מוצג כאן השוואה של ריכוז התא קיימא, או VCC, וריכוז נוגדנים חד שבטיים ב bioreactors חיידקים שונים. ההשפעה השלילית של PH 6.9 על VCC ניתן לראות.

בנוסף, הצמיחה של התאים השתפרה באופן משמעותי תחת התרבות ב PH 7.3 לעומת PH 7.1. להלן עלילות מתאר התגובה של VCC וריכוז נוגדנים חד שבטי. הערכים דומים בכלי הדם עם אותו PH ומהירות ערבוב שונה, מה שמצביע על כך שלמהירות הסטיזר שנאספה לתהליך זה אין השפעה משמעותית על תפוקת התהליך.

כל הוראה שניתנה למכונה חייבת להיכתב בקפידה כדי למנוע שגיאה במהלך ביצוע הניסוי. התוכנה גמישה והיא יכולה להריץ מספר ניסויים בבת אחת, ובכך להפחית את משך הזמן הנדרש כדי לייעל את התהליך. תכנון הניסוי שימושי בתחום הביו-מעבד, כיוון שהתוצאות מעניקות הבנת תהליך מבוססת ידע, שניתן להרחיבה לאורגניזמים אחרים במידה מסוימת.