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Enriquecimento de afinidade simultânea de duas modificações pós-translacionais para quantificação e localização do site
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Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization

Enriquecimento de afinidade simultânea de duas modificações pós-translacionais para quantificação e localização do site

DOI:
10.3791/60780-v

•

12:11 min

•

February 27, 2020

•

, , , , ,
1Buck Institute for Research on Aging

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este fluxo de trabalho descreve o desempenho do enriquecimento tempo e econômico de múltiplas modificações pós-translacionais de proteínas (PTMs) simultaneamente para análise proteômica global quantitativa. O protocolo utiliza o enriquecimento ptm em nível de peptídeo com múltiplos anticorpos conjugados, seguido pela análise de espectrometria de aquisição independente de dados para obter insights biológicos sobre o crosstalk PTM.

Tags

Keywords: Simultaneous Affinity EnrichmentPost-translational ModificationsQuantificationSite LocalizationMass SpectrometryAcetylationSuccinylationProtein ModificationsPTMsReproducibilityC18 ResinImmunoaffinity Purification

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