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細胞型特異的スケールでのシロイヌナズナ・タリアナの開発を調査するためのリボソーム親和性精製(TRAP)の翻訳
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) to Investigate Arabidopsis thaliana Root Development at a Cell Type-Specific Scale
DOI:

09:41 min

May 14, 2020

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:08Propagation and Sterilization
  • 01:36Plating
  • 02:20Tissue Treatment (Optional)
  • 02:51Harvesting
  • 03:39Tissue Grinding and Homogenization
  • 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
  • 05:34Immunoprecipitation
  • 06:49Lab Supply Reconditioning
  • 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
  • 08:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

リボソームアフィニティー精製(TRAP)を翻訳すると、臓器や組織の最小限の処理で開発プログラムを解剖する可能性があります。このプロトコルは、緑色蛍光タンパク質(GFP)標識リボソームサブユニットを標的とした細胞から高品質のRNAを生成します。qRT-PCR や RNA-seq などのダウンストリーム解析ツールは、組織および細胞の種類特異的発現プロファイルを明らかにします。

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