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Übersetzen von Ribosome Affinity Purification (TRAP) zur Untersuchung der Arabidopsis thaliana Wurzelentwicklung in einer zelltypspezifischen Skala
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) to Investigate Arabidopsis thaliana Root Development at a Cell Type-Specific Scale
DOI:

09:41 min

May 14, 2020

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:08Propagation and Sterilization
  • 01:36Plating
  • 02:20Tissue Treatment (Optional)
  • 02:51Harvesting
  • 03:39Tissue Grinding and Homogenization
  • 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
  • 05:34Immunoprecipitation
  • 06:49Lab Supply Reconditioning
  • 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
  • 08:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

Die Übersetzung der Ribosomenaffinitätsreinigung (TRAP) bietet die Möglichkeit, Entwicklungsprogramme mit minimaler Verarbeitung von Organen und Geweben zu sezieren. Das Protokoll liefert hochwertige RNA aus Zellen, die mit einem grünen fluoreszierenden Protein (GFP)-markierten ribosomalen Untereinheit begezielt sind. Nachgeschaltete Analysewerkzeuge wie qRT-PCR oder RNA-seq zeigen Gewebe- und zelltypspezifische Expressionsprofile auf.

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