Medicine
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सोडियम टॉरोकोलेट प्रेरित गंभीर तीव्र अग्नाशयशोथ C57BL/
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गंभीर तीव्र अग्नाशयशोथ के लिए पशु मॉडल प्रारंभिक चरण में pathophysiological परिवर्तनों के अध्ययन को सक्षम करते हैं, जो भड़काऊ घटनाओं के विकास के अवलोकन की सुविधा प्रदान करते हैं। यहां हम एनेस्थेटिक C57BL / 6 चूहों के अग्नाशय वाहिनी में सोडियम टॉरोकोलेट के प्रतिगामी जलसेक द्वारा गंभीर तीव्र पित्त अग्नाशयशोथ के प्रेरण के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।
Transcript
इस विधि का उपयोग तीव्र पित्त अग्नाशयशोथ में होने वाली भड़काऊ घटनाओं को पुन: उत्पन्न करने के लिए किया जा सकता है। अपने शुरुआती चरणों में अग्नाशय के ऊतकों में परिवर्तनों का अध्ययन करना संभव है, जो आमतौर पर क्लिनिक में संभव नहीं है। इस तकनीक के मुख्य लाभ यह हैं कि यह एक प्रशिक्षित शोधकर्ता के लिए पुन: पेश करने के लिए त्वरित और आसान है, और यह मनुष्यों में तीव्र अग्नाशयशोथ के समान परिणाम प्रदान करता है।
इस विधि का उपयोग दवा के अणुओं और अन्य चिकित्सीय हस्तक्षेपों की औषधीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है, क्योंकि यह अग्न्याशय और आसन्न अंगों में भड़काऊ-मध्यस्थता कोशिकाओं के अध्ययन की अनुमति देता है। इस प्रोटोकॉल का प्रयास करते समय, अंगों का पता लगाना और कैनुलेशन क्षेत्र की स्थापना करना महत्वपूर्ण है। अंगों के स्थान को याद रखें और पहले मेथिलीन नीले रंग जैसे रंगीन समाधान का उपयोग करके इंजेक्शन आवेदन का अभ्यास करें।
पैर की अंगुली चुटकी के साथ संज्ञाहरण की गहराई की जांच करने के बाद, 5% पोविडोन आयोडीन समाधान के साथ एक एनेस्थेटिक माउस के पेट क्षेत्र को साफ करें। ट्रिमर का उपयोग करके, छाती और पेट के निचले हिस्से के बीच बालों को हटा दें और 70% अल्कोहल के साथ लगभग दो वर्ग सेंटीमीटर सर्जिकल क्षेत्र को साफ करें। सर्जिकल बोर्ड पर जानवर को स्थिर करें और पेट के ऊपरी हिस्से पर क्षैतिज रूप से त्वचा के पांच मिलीमीटर और xiphoid प्रक्रिया से एक सेंटीमीटर नीचे काटने के लिए कैंची का उपयोग करें।
गुहा के न्यूनतम जोखिम के साथ लैपरोटॉमी करने के लिए पेरिटोनियम पर कटौती को दोहराएं। एक रिट्रेक्टर का उपयोग करके, जिगर को आंत से लगभग एक सेंटीमीटर पर सिर की ओर खींचें और अग्न्याशय और ग्रहणी के क्षेत्र का पता लगाएं। संदंश का उपयोग करके, जिगर को जानवरों के सिर की ओर उठाएं।
छोटी आंत के हिस्से को धीरे से खींचकर, आम पित्त नलिका के दूरस्थ भाग के बेहतर दृश्य के लिए 6-0 पॉलीप्रोपाइलीन सीवन के साथ दो पार्श्व सिरों को ठीक करें। एक सूक्ष्म पोत क्लिप का उपयोग करते हुए, समीपस्थ सामान्य पित्त नलिका को अस्थायी रूप से रोकें। उदर गुहा से बाहर अंग बेनकाब.
फिर एक 8-0 के साथ डिस्टल सामान्य पित्त नलिका का एक अस्थायी रोड़ा बनाएं टांका। आम पित्त नलिका तक पहुंचने के लिए, पेरिएमपुलरी क्षेत्र को पंचर करें, जो छोटी आंत की दीवार के सफेद हिस्से के रूप में दिखाई देता है। एक 0.54 मिलीमीटर polyethylene ट्यूब से जुड़े एक 0.4 मिलीमीटर सुई के साथ, तीन मिनट के लिए शरीर के वजन के प्रति 10 ग्राम 10 माइक्रोलीटर की निरंतर गति पर 2.5% सोडियम टॉरोकोलेट समाधान जलसेक के लिए जलसेक पंप शुरू करें।
जलसेक के बाद, माइक्रो पोत क्लिप, अस्थायी 8-0 को हटा दें टांका, और अग्नाशय पित्त नलिका से इंजेक्शन सुई. एक 6-0 nonabsorbent मोनोफिलामेंट polypropylene टांका के साथ पेट टांका. लैपरोटॉमी और अंत सीवन के बीच का समय 30 मिनट से अधिक नहीं होना चाहिए।
सर्जरी के बाद, लकड़ी के शेविंग और पानी और भोजन विज्ञापन लिबिटम के साथ पंक्तिबद्ध पॉलीथीन बक्से में जानवरों को घर दें। धीरे से त्वचा के साथ जानवर को पकड़ो, नेत्रगोलक के एक मामूली फलाव को बढ़ावा देने के लिए, और ऊपर की ओर आंखों का सामना करने वाले जानवर की स्थिति। जानवर की आंखों में स्थानीय संवेदनाहारी युक्त आंख मरहम की एक बूंद डालें।
आंख के औसत दर्जे के कोने में एक केशिका ट्यूब के अंत की स्थिति और लगभग 30 से 45 डिग्री के कोण पर नेत्रगोलक के नीचे धीरे से डालें। केशिका ट्यूब को तब तक घुमाएं जब तक कि रक्त का प्रवाह शुरू न हो जाए। एक बार संग्रह समाप्त होने के बाद, पलकों को हल्के संपीड़न के साथ बंद रखकर होमियोस्टैसिस सुनिश्चित करें।
बाद में, एक 27 गेज सुई का उपयोग करते हुए, माउस के पेरिटोनियल गुहा में बर्फ के ठंडे पीबीएस के चार मिलीलीटर इंजेक्ट करें। इंजेक्शन के बाद, धीरे से 10 सेकंड के लिए पेरिटोनियम की मालिश करें ताकि चिपके हुए कोशिकाओं को हटाया जा सके। कैंची और चिमटी का उपयोग करके, पेट की गुहा को उजागर करने के लिए आंतरिक त्वचा और मांसपेशियों पर 0.5 सेंटीमीटर का एक छोटा सा कट बनाएं।
पेरिटोनियम में एक बल्ब पिपेट डालें और जितना संभव हो उतना तरल पदार्थ इकट्ठा करें, इस बात का ध्यान रखें कि वसायुक्त ऊतक को एस्पिरेट न करें। आगे के प्रसंस्करण के लिए सिर क्षेत्र से अग्न्याशय का एक हिस्सा ले लीजिए। एकत्रित तरल पदार्थ को बर्फ पर रखी ट्यूबों में जमा करें।
फिर पेरिटोनियल तरल पदार्थ को पांच मिनट के लिए 250 बार जी पर सेंट्रीफ्यूज करें और इंटरल्यूकिन -6 खुराक के लिए supernatant को स्टॉक करें। सीरम प्राप्त करने के लिए, 15 मिनट के लिए 700 बार जी पर एकत्र किए गए रक्त के नमूनों को सेंट्रीफ्यूज करें और एमिलेज और इंटरल्यूकिन -6 खुराक के लिए supernatant स्टॉक करें। तीव्र अग्नाशयशोथ के प्रेरण के 12 घंटे बाद अग्नाशय के ऊतकों के विश्लेषण ने शाम समूह से ऊतक के नमूनों की तुलना में प्रभावित अंग में तीव्र सूजन दिखाई।
इसी तरह के परिणामों को हिस्टोलॉजिकल परीक्षा द्वारा दर्शाया गया था, जब हेमेटोक्सिलिन ईोसिन शाम और एपीटीए से ऊतक के नमूनों को धुंधला कर दिया गया था। रक्त सीरम के विश्लेषण ने शाम समूह की तुलना में एपी समूह में सीरम एमिलेज और इंटरल्यूकिन -6 साइटोकाइन एकाग्रता में महत्वपूर्ण वृद्धि दर्ज की। उसी समय, इंटरल्यूकिन -6 एकाग्रता एपी समूह में पेरिटोनियल गुहा तरल पदार्थ में काफी अधिक थी।
इस मॉडल में अग्नाशयशोथ की गंभीरता आनुपातिक रूप से एकाग्रता, जलसेक की मात्रा और दबाव, और तीव्र अग्नाशयशोथ प्रेरण के समय पर निर्भर करती है। इस तकनीक की मदद से, गंभीर तीव्र अग्नाशयशोथ पर निरंतर पेरिटोनियल लैवेज के प्रभावों का अध्ययन किया जा सकता है।
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दवा मुद्दा 172 तीव्र अग्नाशयशोथ सोडियम taurocholate चूहों अग्नाशयशोथ अग्न्याशय सूजन गंभीर अग्नाशयशोथ C57BL /Related Videos
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