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Mutagenesi PCR, clonazione, espressione, protocolli di purificazione rapida delle proteine e cristallizzazione del tipo selvatico e delle forme mutanti di triptofano sintasi
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Chapters
- 00:04Introduction
- 00:44Purification of Wild Type or Mutant Form of α2β2 StTS Complex
- 03:53Optimized Crystallization for Wild Type and Mutant Form of the α2β2 StTS Comple
- 06:49Results: Purification of the α- and β -Subunits of the Tryptophan Synthase and the Wild Type and Mutant α2β2 StTS Complexes
- 08:50Conclusion
Questo articolo presenta una serie di metodi consecutivi per l'espressione e la purificazione della Salmonella typhimurium triptofano sintasi compo questo protocollo un sistema rapido per purificare il complesso proteico in un giorno. I metodi trattati sono la mutagenesi diretta al sito, l'espressione proteica in Escherichia coli,la cromatografia di affinità, la cromatografia di filtrazione su gel e la cristallizzazione.
