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PCR変異生成、クローニング、発現、高速タンパク質精製プロトコルおよびトリプトファン合成酵素の野生型および変異型の結晶化
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
PCR Mutagenesis, Cloning, Expression, Fast Protein Purification Protocols and Crystallization of the Wild Type and Mutant Forms of Tryptophan Synthase
DOI:

09:31 min

September 26, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44Purification of Wild Type or Mutant Form of α2β2 StTS Complex
  • 03:53Optimized Crystallization for Wild Type and Mutant Form of the α2β2 StTS Comple
  • 06:49Results: Purification of the α- and β -Subunits of the Tryptophan Synthase and the Wild Type and Mutant α2β2 StTS Complexes
  • 08:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

本稿では 、サルモネラ・チフィムリウム・ トリプトファン合成酵素の発現と精製のための一連の連続的な方法を提示し、このプロトコルは、1日でタンパク質複合体を精製するための急速なシステムをコンプする。対象となる方法は、部位特異的変異誘発、 大腸菌におけるタンパク質発現、アフィニティークロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、および結晶化である。

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