Journal
/
Biochemistry
/
PCR Mutagenesis, Kloning, Uttryck, Snabba protein rening protokoll och kristallisering av den vilda typen och mutanta former av tryptofan syntas
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
PCR Mutagenesis, Cloning, Expression, Fast Protein Purification Protocols and Crystallization of the Wild Type and Mutant Forms of Tryptophan Synthase
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

PCR Mutagenesis, Kloning, Uttryck, Snabba protein rening protokoll och kristallisering av den vilda typen och mutanta former av tryptofan syntas

DOI:
10.3791/61839-v

•

09:31 min

•

September 26, 2020

•

, , ,
1Department of Chemistry,University of California-Riverside, 2Department of Biochemistry,University of California-Riverside

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44Purification of Wild Type or Mutant Form of α2β2 StTS Complex
  • 03:53Optimized Crystallization for Wild Type and Mutant Form of the α2β2 StTS Comple
  • 06:49Results: Purification of the α- and β -Subunits of the Tryptophan Synthase and the Wild Type and Mutant α2β2 StTS Complexes
  • 08:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denna artikel presenterar en serie på varandra följande metoder för uttryck och rening av Salmonella typhimurium tryptofan syntas comp detta protokoll ett snabbt system för att rena proteinkomplexet på en dag. Täckta metoder är platsstyrd mutagenes, proteinuttryck i Escherichia coli,affinitetskromatografi, gelfiltreringskromatografi och kristallisering.

Tags

PCR MutagenesisCloningExpressionProtein PurificationTryptophan SynthaseSalmonella TyphimuriumAmmonium Sulfate FractionationSize Exclusion ChromatographySDS-PAGEProtein ConcentrationCrystallization

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Thermostabilization, Expression, rening och kristallisation av den mänskliga Serotonin Transporter Bound till<em> S</em> -citalopram

Expression, rening och antimikrobiell aktivitet av S100A12

Rekombinant Proteinuttryck, Kristallisation och Biofysiska Studier av a<em> Bacillus</em> -konserverad nukleotidpyrofosforylas, BcMazG

Automatiserad protokoll för makromolekylära kristallisering på MRC laboratoriet för molekylär biologi

Uttryck och rening av däggdjur Bestrophin jonkanaler

Koffein utvinning, enzymaktivitet och genuttryck av koffein syntas från växten cellsuspensioner

Uttryck, lösbarhet och rening av eukaryota Borat transportörer

Uttryck och rening av Nukleasfri syre avskiljare Protocatechuat 3, 4-dioxygenas

Uttryck, rening, kristallisering, och enzym analyser av Fumarylacetoacetat Hydrolase Domain-innehållande proteiner

High-throughput screening för att erhålla kristallträffar för proteinkristallografi

Read Article