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प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज-मध्यस्थता डीएनए दरार का एकल-अणु निवास-समय विश्लेषण
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage
DOI:

09:53 min

February 07, 2021

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Chapters

  • 00:00Introduction
  • 00:31Preparation of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate Materials
  • 03:38Microfluidic Device Construction
  • 05:58Surface Tethering of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate
  • 07:07REase-Mediated DNA Cleavage
  • 07:51Results: Single-Molecule TIRF Experiment for Parallelized Observations of DNA Cleavage Events
  • 09:32Conclusion

Summary

Automatic Translation

क्वांटम-डॉट-लेबल डीएनए और कुल आंतरिक प्रतिबिंब प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके, हम बिना लेबल वाले प्रोटीन का उपयोग करते समय प्रतिबंध एंडोन्यूक्लाइजेस की प्रतिक्रिया तंत्र की जांच कर सकते हैं। यह एकल-अणु तकनीक व्यक्तिगत प्रोटीन-डीएनए इंटरैक्शन के बड़े पैमाने पर मल्टीप्लेक्स अवलोकन की अनुमति देती है, और डेटा को अच्छी तरह से आबादी वाले रहने के समय वितरण उत्पन्न करने के लिए पूल किया जा सकता है।

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