Подготовка и оценка * These authors contributed equally

Chemistry

Your institution must subscribe to JoVE's Chemistry section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Bilton, H. A., Ahmad, Z., Janzen, N., Czorny, S., Valliant, J. F. Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry. J. Vis. Exp. (120), e55188, doi:10.3791/55188 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

99m Tc остается доминирующим радиоизотопные используется в диагностической ядерной медицины, с более чем 50 миллионов процедур визуализации , проведенных за год во всем мире 1, 2, 3. Большинство 99m Tc агентов , используемых клинически являются радиофармпрепаратов типа перфузию. Есть ограниченное количество активно целевых соединений , в которых 99m Тс направлен связать конкретную биомаркером через лигирования к конструкции прицеливания. Создание целевых 99m Tc радиофармпрепаратов часто затруднено влиянием 99m Tc-лигандов комплексов на способность целевой молекулы , чтобы связать биомаркера интерес, или изотопы Период полураспада не достаточно долго для использования с более высокими биомолекул молекулярной массой такие как антитела. Последнее, как правило, требует нескольких дней, прежде чем изображения получены для того, чтобы биомолекулы, чтобы очистить от нецелевых Tiss ЕЭС России. Pre-нацеливание предлагает альтернативный подход для преодоления этих проблем.

Предварительно таргетирования в сочетании с биоортогональные реакции было показано, является эффективным способом для разработки новых зондов молекулярной визуализации как для флуоресценции и радио-томографии 4, 5, 6, 7, 8. Реакция обратного спроса электронный Дильса-Альдера (IEDDA) между 1,2,4,5-тетразин (TZ) и транс -cyclooctene (TCO) производных, как показано на рисунке 1, было показано, что особенно эффективным 6. Реакцию IEDDA с этими компонентами могут проявлять быструю кинетику в PBS (K 2 ≈ 6000 M -1 с -1) и высокой селективностью, что делает его идеальным для предварительного таргетинга приложений в естественных условиях 9, 10.

e_content "> Наиболее распространенным подходом включает введение ТСО полученный нацеливающего вектора и после достаточного периода задержки, радиоизотопный тетразин вводят. радиоактивно меченных тетразины на основе 11 C, 18 F, 64 Cu, 89 Zr и 111 In было сообщила 11, 12, 13, 14, 15. в отличие от этого , есть только один отчет о 99m Tc-меченого Тг, который был подготовлен с использованием типа лиганда ГНА , требующую использования сопутствующих лигандов для предотвращения связывания белка и деградации в естественных условиях 16. в качестве альтернативы, мы сообщаем здесь синтез 99m Tc (I) маркированы тетразины с использованием семейства лигандов , которые образуют стабильные тридентатные комплексы с [99m Tc (CO) 3] + ядро.


Рисунок 1: bioorthogonal реакция IEDDA между тетразин и транс - -cyclooctene. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Семейство лигандов , приготовленных содержат тридентатные хелаты , которые различаются по полярности и от природы группы линкера между области связывания металла и Tz (рисунок 2). Цель состояла в том, чтобы идентифицировать 99m Tc-тетразин конструкция , которая может эффективно локализовать и реагировать с TCO-меченых участков в естественных условиях и быстро ясно , когда он не связан, с тем , чтобы принести высокую цель-к-нецелевых коэффициентов. Для тестирования лиганды, ТШО-производное бисфосфоната (ТСО-ВР) использовали 17. Ранее мы показали, что TCO-BP локализуется в областях активного костного метаболизма и может взаимодействовать срадиоактивномеченые тетразины в естественных условиях 18. Это удобный реагент для тестирования новых тетразины, так как он может быть получен в одну стадию, и эксперименты могут быть выполнены в нормальных мышей, где локализация происходит в первую очередь в суставах (колени и плечи).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Исследования на животных были одобрены советом животных по этике исследований в Университете МакМастер в соответствии с Канадским советом по уходу за животными (ССАС) руководящих принципов.

1. радиоактивной из Tz-тридентатных ЛИГАНДАМИ с 99m Tc

ВНИМАНИЕ: Следующие процедуры требуют использования радиоактивных соединений. Работа должна осуществляться только в лицензированной лаборатории с соблюдением техники безопасности и утилизации правил. Реакции Микроволновые следует проводить в микроволновой печи, специально предназначенных для химического синтеза.

  1. Синтез [99m Тс (СО) 3 (H 2 O) 3] + 19, 20
    1. В микроволновую ампулу смешайте 8 мг K 2 [BH 3 CO 2], 15 мг Na 2 CO 3, 20 мг Na 2 B 4 O 7 · 10H 2 O и 25 мг KOCO [СН (ОН)]2 COONa · 4H 2 O. Продуть флакон в течение 10 мин аргоном.
    2. Добавить 4 мл 99m TCO 4 - (~ 1,100 МБк, ~ 30 мКи) в 0,9% -ном солевом растворе в ампулу.
    3. Реакционную смесь нагревают в микроволновой печи в течение 3,5 мин при температуре 110 ° С после 10 с перемешиванием, чтобы обеспечить тщательное смешивание реагентов.
    4. Доводят рН раствора до 3,5-4 с помощью ~ 400 мкл 1 М HCl. Проверка с помощью рН бумаги.
  2. Радиоактивной из тетразин лигандов 1-5
    1. Растворите 2 мг каждого лиганда (соединения 1-5) в 250 мкл МеОН 21.
    2. Добавьте 250 мкл [99m Тс (СО) 3 (H 2 O) 3] + (~ 74 МБк, ~ 2 мКи) к каждому раствору.
    3. Реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового течение 20 мин при 60 ° С.
      Примечание: Этот шаг был одинаков для всех 5 тетразинов.
    4. Для получения соединений 2- 5, выпарить растворитель и повторно dissolве полученных продуктов в 1 мл 1: 1 об / об ДХМ: ТФК.
    5. Нагреть растворенные продукты реакции (2-5) при 60 ° С в микроволновой печи в течение 6 мин (2-4) или 10 мин (5).
    6. После охлаждения до комнатной температуры, выпаривают растворитель , используя испаритель (36 ° С, 8 мбар, 3 мин, 6000 оборотов в минуту) и растворяют высушенный соединение в соотношении 1: 1 ACN: H 2 O или 1: 1 MeOH: H 2 O, перед очисткой ЖХВД.
    7. Очищают 99m Tc-меченого соединения (1-5), в том числе отделение меченого продукта от немеченого лиганда тетразин, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (C 18 с обращенной фазой). Как правило, используют градиент элюции 30:70 ACN: H 2 O (оба с 0,1% TFA) до 40:60 ACN: H 2 O в течение 20 мин (18 мин) и аналитической колонке C 18 4,6 х 100 мм. Использование в УФ-области (254 нм) и регистрации гамма.
      1. Возьмите небольшую пробу каждого меченого продукта и сравнить его время удерживания ВЭЖХ, что и со-инъекцected, нерадиоактивного, Re-меченого стандарта (0,125 мг в 20% метанол-H 2 O). Стандартный меченый Повторно идентифицируется в трассировке УФ - ВЭЖХ, и будет элюировать в то же самое время, что и 99m Tc-меченого соединения в γ-ВЭЖХ следа. Это совместное введение показывает пики при сравнимых временах удерживания, подтверждающие личность 99m Tc-меченого соединения.
    8. Выпаривают растворитель из фракций ВЭЖХ с использованием испарителя (36 ° C, 8 мбар, 3 мин, 6000 оборотов в минуту).
    9. Формулирование Очищенное соединение в концентрации 7,4 кБк / мкл в PBS, содержащем 0,5% БСА и 0,01% Tween-80.
    10. Для того, чтобы обеспечить меченые соединения стабильны, выполняют экстракорпорального исследование устойчивости в. Выдержите сформулированное соединение при 37 ° С в течение 1, 4 и 6 ч, вводя небольшое количество (3,7 МБк) смеси на ВЭЖХ в каждый момент времени для оценки стабильности.

2. Предварительно целенаправленные исследования Био-распределительные

    Подготовка животных
    1. Использование 7-9-недельного возраста, женщины-BALB / C мышей (n = 3), введение ТСО-ВР сформулировали в физиологическом растворе (20 мг / кг) (5 мкг / мкл), с помощью в хвостовую вену.
    2. Поместите мышь в физическом устройстве удержания, а также определить вены, расположенные на боковых поверхностях хвоста и протереть тампоном, смоченным спиртом. По прошествии около 2 см от кончика хвоста, вставьте 30 иглы калибра под небольшим углом, параллельно вене. Медленно нажмите на поршень, чтобы впрыснуть, удалить иглу и не применять чистую марлевую губкой в ​​месте инъекции с небольшим давлением до остановки кровотечения.
    3. Через 1 ч после инъекции TCO-BP, администрировать ~ 0,74 МБк (20 мкКи) из 99m Tc-тетразин Сформулированные в 100 мкл 0,5% БСА, 0,01% твин-80 в PBS, с помощью в хвостовую вену.
  1. Исследования Био-распределительные
    1. В желаемый момент времени (Т = 6 ч), анестезию мышей с использованием 3% изофлуран и 2% -ной смеси газообразного кислорода. Продемонстрировать ке снятие щепотка на наркозом мыши, чтобы гарантировать, что они находятся под хирургической плоскости анестезии.
    2. Собирают кровь (1 мл) с помощью пункции сердца с использованием шприца предварительно обработанной гепарином. Место мыши на спине с носом в носовом обтекателе для продолжения анестезии и найти мечевидного отростка на животном.
      1. Вставка 25 G иглу, слегка слева от средней линии животного под мечевидного отростка, под углом 20 °. Полностью вставить иглу, и медленно потяните на себя поршень, чтобы увидеть кровь в ступице иглы, если сердце проколоты. Слегка подрегулировать иглу, удерживая поршень, при необходимости, чтобы проколоть сердце. Медленно потянуть кровь в шприц.
    3. Эвтаназии животное шейным смещением, в то время как под анестезией.
    4. Поместите каждое животное в полиэтиленовый пакет и использовать дозы калибратор (99m Tc установка) для измерения весь уровень активности тела.
    5. Соберите следующие ткани и жидкости в предварительно взвешиватьред считая пробирки: кровь, кости (колено и плечо), желчного пузыря, почек, печени, желудка (с содержанием), тонкий кишечник (с содержанием), толстой кишки и слепой кишки (с содержимым), щитовидной железы и трахею, мочевой пузырь с мочой , и хвост.
    6. Промыть соответствующие ткани (за исключением крови, желчного пузыря и мочевого пузыря) в PBS, чтобы удалить кровь и промокните насухо перед размещением тканей в соответствующих счетных трубок.
    7. Поместите туши животного в полиэтиленовый пакет и измерить остаточную всю активность тела с использованием дозы калибратор.
    8. Взвесить каждую пробирку, содержащую образец ткани. Вычесть начальный вес трубы, чтобы получить массу ткани.
    9. Используйте дозы калибратор (99m Тс настройка) для измерения количества активности в исследуемом образце (100 мкл) в момент впрыска для каждой мыши.
      Примечание: Образец теста равен объему впрыска, таким образом, давая счетчик активности в момент инъекции.
    10. Во время измерения ткани, вliquot 5 мкл тестируемого образца, используемого ранее. Использование мульти-детектора гамма - счетчика (99m Tc настройка) и считать , чтобы получить значение в минуту (CPM) для испытуемого образца 5 мкл.
    11. С помощью двух значений , полученных в 2.2.9 и 2.2.10 , чтобы вычислить активность и отношения СРМ с помощью уравнения 1 , чтобы получить коэффициент преобразования (CPM мкКи -1).
      (1) Уравнение 1
    12. С помощью гамма-счетчика для измерения количества радиоактивности в каждом образце ткани или жидкости.
    13. С помощью уравнения 1, чтобы вычислить количество активности в каждой ткани или жидкости, во время измерения по отношению к общей вводили дозы. Это значение затем нормализовали по массе органа и выражают в процентном содержании вводили дозы на грамм (т.е.% ID / г) ткани.
    14. Выполните шаги 2.1.2 2.2.13 провести отрицательный контрольный эксперимент с использованием 99m Tc-меченых лигандов тетразин в Absenв.п. ТШО-BP. Жертвоприношение мышей (n = 3) в 0,5, 1, 4 и 6 ч после инъекции и получения ткани или жидкости, как описано выше.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Лиганды , были синтезированы с использованием различных сшивающих агентов и энтеросорбенты с помощью простого восстановительного аминирования стратегии (рисунок 2), за которой следует соединение продукта с коммерчески доступным тетразин 22, 23. Радиоактивной проводили с использованием того же метода для всех соединений и был хорошо воспроизводимым. Процесс был оптимизирован путем изменения рН, количество лиганда, времени реакции и температуры , после чего в 99m Tc-меченный радиоактивным изотопом соединения 1-5 были получены при умеренной до высокой радиохимический выход: 83% (1), 45% (2), 31% (3), 42% (4), и 54% (5). После очистки ВЭЖХ от непрореагировавшего лиганда и испарением с использованием выпарного аппарата, соединения были приготовлены в PBS, содержащий 0,5% БСА и 0,01% Tween80 перед инъекцией. Удельная активность р urified 99m Tc меченных тетразин составляла ~ 1,48 МБк / мкг. Были проведены исследования с целью оценки устойчивости 99m Tc-меченых лигандов тетразина до исследований в естественных условиях. Стабильность контролировали с помощью ВЭЖХ на 1, 4 и 6 ч без видимой деградации в течение 6 ч (R T = 14 мин), как показано на рисунке 3 для соединения 4 , в качестве примера.

фигура 2
Рисунок 2: Соединения 1-5 были получены с использованием различных линкеров (Y) и энтеросорбенты (X) , как показано (внизу). Все соединения меченый [99m Tc (CO) 3 (H 2 O) 3] + с использованием тех же условий реакции (верхний рисунок ), за исключением 1, который не требовал стадии (II).

</ Html"Рисунок 3" SRC = "/ файлы / ftp_upload / 55188 / 55188fig3.jpg" />
Рисунок 3: Результаты испытаний на стабильность с использованием соединения 4. γ-ВЭЖХ следов 4 , инкубированные в PBS при 37 ° С в течение 1, 4 и 6 ч.

Для тестирования в естественных условиях, были использованы здоровые BALB / C мышей. Вкратце, для каждого соединения, группы мышей (n = 3) вводили TCO-BP (100 мкл, 20 мг / кг), который с последующим введением 99м Тс-меченых соединений 1 ч позже. В 6 ч после инъекции 99m Tc комплексов, животных забивали и концентрации активности в различных тканях и жидкостях определяется. Полученные данные представлены как процент введенной дозы на грамм ткани (% ID / г) и показана на рисунке 4. Типичные отношения кости (колено или плечо) в крови для каждого из пяти 99m Tc-меченых соединений Tz приведены в таблице 1. Эти данные указывают на слрано , что соединение 3 при условии оптимальной таргетирования в сочетании с клиренсом из крови, и что существуют значительные различия между 99m Tc-меченых соединений в отношении локализации ткани вне цели. Исследование отрицательный контроль с использованием мышей CD1 (N = 3) проводили, где мышам вводили 99m Tc-тетразина лигандов при отсутствии ППО-BP. Мыши были умерщвлены на 0,5, 1, 4 и 6 ч и% ID / г определяли для всех тканей и жидкостей. Для всех исследованных соединений, где данные для соединения 2 представлена на рисунке 5, никакого существенного поглощения не был замечен в кости или других тканях (сердце, легких, селезенке, скелетных мышц) , не показанных на рисунке 4.

Рисунок 4
Рисунок 4. Результаты Био-распределения для 99m Tc-меченых производных тетразина 1-5 (бары IndicaТед). Данные, показанные были получены из выбранных тканей и жидкостей принято через 6 ч после инъекции меченых производных, и активность была нормализована к ткани или массы жидкости, а средний процент введенной дозы на грамм ткани или жидкости (% ID / г) ± SEM. Костные цели обозначены •. Примечание: Все остальные ткани не показаны имели средний% ID / г, что было меньше, чем 1%. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 5
Рисунок 5. Результаты Био-распределения для контрольного исследования с использованием 99m Tc-меченого тетразин (2) без предварительного впрыска TCO-BP. Данные , показанные были получены из выбранных тканей и жидкостей , взятых из 3 мышей через 0,5, 1, 4 и 6 ч после инъекции 2. Активность нормированы на ткани иливес жидкости, а средний процент вводили дозы на грамм ткани или жидкости (% ID / г) ± SEM. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Соединение
соотношение 1 2 3 4 5
Плечо: Кровь 3.5: 1 3.5: 1 21: 1 7.8: 1 0,8: 1
Колено: Кровь 6.9: 1 5.6: 1 26: 1 12: 1 1,3: 1

Таблица 1. ткани костей: показатели крови , определяемые из исследований био-распределения.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Коллекция тетразина-сшитый тридентатных хелатов различной полярностью был подготовлен, и оценивали полезность их 99m Tc комплексов в реакции IEDDA с производным TCO в естественных условиях. Эффективная и воспроизводимый метод маркировки 99m Tc была разработана для пяти тетразин-хелатов, где концентрация лиганда 10 -3 М. Стадию мечение с последующим удалением защитной группы Т- бутиловых групп (для соединений , 2-5). Высокая концентрация лиганда использовали для улучшения радиохимический выход и сократить время реакции , которое сведено к минимуму деградацию тетразин 21. Продукт был выделен и отделен от немеченного лиганда и любых радиохимической примесей с помощью ВЭЖХ, в результате радиохимического выходами в диапазоне от 31-83%, при этом все они имеют> 99% радиохимической чистотой и высокой удельной активностью ~ 1,48 МБк / мкг. Все соединения, как было показано, быть стабильными в PBS, содержащим 0.5% БСА и 0,01% Tween80 на срок до 6 ч (рисунок 3).

Bisphosphonate соединения, такие как TCO-BP, локализуются в регионах активного костного метаболизма или травмы, которые включают в себя коленные и плечевые суставы у мышей. Поэтому TCO-BP обеспечивает простое средство для оценки эффективности новых меченных тетразинов для доставки изотопов в естественных условиях. Оценка биологического распределения всех пяти 99m Tc-тетразинов показали поглощение в коленных и плечевых суставов 6 ч после инъекции, демонстрируя успешное предварительно нацеливания кости в естественных условиях (рисунок 4). Предыдущие исследования подтвердили , что радиоактивно меченный ТСО-ВР накапливается в костной ткани 18, в то время как 99m Tc-тетразин конструкция (2) дано в одиночку не дает (рис 5). Это позволяет сделать вывод о том, что поглощение кости было связано с реакцией IEDDA.

Более липофильные конструкции 1 и 2 (1); 7,6 ± 2,7 (2)) и плечо (4,6 ± 1,4 (1); 4,8 ± 1,9 (2)). Высокие концентрации радиоактивности были также замечены в желчном пузыре, печени и кишечника, что согласуется с распределением липофильного 99m Tc-тетразин соединения 2 при отсутствии ППО-BP (рисунок 5). Другие нецелевые ткани и органы , такие как скелетные мышцы и селезенки не показали какого - либо существенного поглощения (<1%) , когда исследования био-распределения были выполнены на 99m Tc-тетразинов в отсутствии ППО-BP (Рисунок 5) , так что эти органы не были приняты для предварительной ориентации экспериментов. Кроме того, био-распределительные эксперименты с 99m Tc-только тетразинов показали хороший зазор от нецелевых тканей на 6 ч после инъекции. Следовательно, Тхис моментом времени, которое находится в пределах одной полураспада изотопа, был выбран в качестве временной точки для сравнения различных радиоактивно меченных лигандов тетразин.

Более полярный 99m Tc-тетразин соединение 3 , несущий PEG 5 линкер показали очень высокую колено и поглощение плеча (16,2 ± 4,8 и 20,7 ± 4,9 соответственно). Был также более низкая активность наблюдалась в печени и кишечнике. Соответствующий ПЭГ 10 производного также показали связывание с костью и снижение поглощения в печени по сравнению с соединениями 1 и 2. Наиболее полярная производным 5, показали более низкую кость связывания , чем все другие конструкции , которые, вероятно , из - за его быстрым выведением.

Высокое поглощение костной ткани и костной ткани: соотношение крови (таблица 1) , в частности для соединений 3 и 4 , показывают , что предварительно нацеливание и реакцию IEDDA может использоваться для LOCАлизе 99m Tc-меченых соединений в естественных условиях. Методы, описанные здесь, могут быть использованы для оценки любого радиоактивно тетразин включая следующее поколение Tc (I) тетразин лигандов. Следует отметить , что для класса лигандов , которые были использованы в этом исследовании, структуры могут быть легко изменена путем изменения природы групп - доноров и линкеров между комплексом металла и тетразин, без существенного изменения способа синтеза лиганда 21. После того, как свинец молекула идентифицируется, мгновенный метод набора, который, вероятно, включают в себя твердые методы очистки фазы, могут быть разработаны для поддержки клинического перевода.

В (I) комплексы Tc , указанные здесь , создают возможность для подготовки новых радиофармпрепаратов 99m Tc , используя широкий спектр различных TCO полученных ориентации молекул , включая антитела. Антитела, несмотря на их отличные свойства целеопределения до создания технеция помечены тетразинов, были бы не Typicсоюзницей использоваться с 99m Tc из - за их медленным выведением (дни), что намного больше , чем период полураспада изотопа (~ 6 ч). Дополнительное применение химии сообщили здесь в том , что тот же самый класс лигандов могут быть получены с бета - излучающими радионуклидами 186 Re и 188 Re. Изоструктурного Re (I), аналоги Тс (I) агентов при сочетании с опухолью ищет свойства TCO-BP может быть использован для лечения костных метастазов.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Argon gas Alphagaz --- ---
Na2CO3 EMD Millipore 106395 ---
Na2B4O7·10H2O Anachemia S9640 ---
KNaC4H4O6·4H2O Anachemia 217255 ---
Technelite 99mTc generator Lantheus medical imaging --- Source of 99mTcO4-
0.9% Saline Lantheus medical imaging --- To elute generator
1 M HCl Lab Chem --- ---
MeOH Caledon --- ---
ACN Caledon --- HPLC grade
Millipore H2O Thermo Fisher Scientific Barnstead Nanopure ---
DCM Caledon --- ---
TFA Caledon --- ---
PBS Thermo Fisher Scientific 10010023 pH 7.4 1x
BSA Sigma Aldrich A7906 ---
Tween80 Sigma Aldrich P8047 ---
Isoflurane CDMV 108737 Supplier: Fresenius Kabi Animal Health
HPLC Waters 1525 Binary Pump, 2998 Photodiodde Array Detector, E-SAT/IN, Bioscan Flowcount PMT detector (item # 15590) ---
HPLC column for analysis and purification of compounds 2-4 Phenomenex 00G-4435-E0 Gemini® 5 µm C18 110 Å, LC Column 250 x 4.6 mm
HPLC column for analysis and purification of compounds 1 and 5 Waters  186003115 XBridge BEH C18 Column, 130 Å, 5 µm, 4.6 mm x 100 mm
Microwave Reactor  Biotage  Initiator 8 ---
Biotage V10 Evaporator Biotage  Serial # V1041 ---
Dose calibrator Capintec, Inc.  CRC-25R ---
Gamma counter Perkin Elmer Wizard 1470 Automatic Gamma Counter ---
Animal room scale  Mettler Toledo XP105 Delta Range ---
Microwave vials  Biotage  355629 0.5-2 mL 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jurisson, S. S., Lydon, J. D. Potential Technetium Small Molecule Radiopharmaceuticals. Chem. Rev. 99, (9), 2205-2218 (1999).
  2. Kluba, C. A., Mindt, T. L. Click-to-chelate: Development of Technetium and Rhenium-Tricarbonyl Labeled Radiopharmaceuticals. Molecules. 18, 3206-3226 (2013).
  3. Amato, I. Nuclear Medicines Conundrum. Chem. Eng. News. 87, (36), 58-70 (2009).
  4. Hnatowich, D. J., Virzi, F., Rusckowski, M. Investigations of Avidin and Biotin for Imaging Applications. J. Nucl. Med. 28, (8), 1294-1302 (1987).
  5. Blackman, M. L., Royzen, M., Fox, J. M. Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactivity. J. Am. Chem. Soc. 130, (41), 13518-13519 (2008).
  6. Devaraj, N. K., Weissleder, R., Hilderbrand, S. A. Tetrazine-Based Cycloadditions: Application to Pretargeted Live Cell Imaging. Bioconjugate Chem. 19, (12), 2297-2299 (2008).
  7. Rossin, R., et al. In Vivo Chemistry for Pretargeted Tumor Imaging in Live Mice. Angew. Chem., Int. Ed. 49, (19), 3375-3378 (2010).
  8. Zeglis, B. M., et al. Optimization of a Pretargeted Strategy for the PET Imaging of Colorectal Carcinoma via the Modulation of Radioligand Pharmacokinetics. Mol. Pharmaceutics. 12, (10), 3575-3587 (2015).
  9. Rossin, R., et al. Highly Reactive trans-Cyclooctene Tags with Improved Stability for Diels-Alder Chemistry in Living Systems. Bioconjugate Chem. 24, (7), 1210-1217 (2013).
  10. Rossin, R., Robillard, M. S. Pretargeted Imaging Using Bioorthogonal Chemistry in Mice. Curr. Opin. Chem. Biol. 21, 161-169 (2014).
  11. Denk, C., et al. Development of a 18F-Labeled Tetrazine with Favorable Pharmacokinetics for Bioorthogonal PET Imaging. Angew. Chem., Int. Ed. 53, (36), 9655-9659 (2014).
  12. Herth, M. M., Andersen, V. L., Lehel, S., Madsen, J., Knudsen, G. M., Kristensen, J. L. Development of a 11C-labeled Tetrazine for Rapid Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation. Chem. Commun. 49, (36), 3805-3807 (2013).
  13. Li, Z., et al. Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation for the Rapid Construction of 18F Labeled Probes. Chem. Commun. 46, (42), 8043 (2010).
  14. Nichols, B., Qin, Z., Yang, J., Vera, D. R., Devaraj, N. K. 68Ga Chelating Bioorthogonal Tetrazine Polymers for the Multistep Labeling of Cancer Biomarkers. Chem. Commun. 50, (40), 5215-5217 (2014).
  15. Zeglis, B. M., et al. A Pretargeted PET Imaging Strategy Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry. J. Nucl. Med. 54, (8), 1389-1396 (2013).
  16. García, M. F., et al. 99mTc-Bioorthogonal Click Chemistry Reagent for In Vivo Pretargeted Imaging. Bioorg. Med. Chem. 24, (6), 1209-1215 (2016).
  17. Russell, R. G. G. Bisphosphonates: The First 40 Years. Bone. 49, (1), 2-19 (2011).
  18. Yazdani, A., et al. A Bone-Seeking Trans-Cyclooctene for Pretargeting and Bioorthogonal Chemistry: A Proof of Concept Study Using 99mTc and 177Lu-Labeled Tetrazines. J. Med. Chem. (2016).
  19. Alberto, R., et al. A Novel Organometallic Aqua Complex of Technetium for the Labeling of Biomolecules: Synthesis of [99mTc(OH2)3(CO)3]+ from [99mTcO4]- in Aqueous Solution and its Reaction with a Bifunctional Ligand. J. Am. Chem. Soc. 120, (31), 7987-7988 (1998).
  20. Alberto, R., Ortner, K., Wheatley, N., Schibli, R., Schubiger, A. P. Synthesis and properties of boranocarbonate: A convenient in situ CO source for the aqueous preparation of [99mTc(OH2)3(CO)3. J. Am. Chem. Soc. 123, (13), 3135-3136 (2001).
  21. Lu, G., et al. Synthesis and SAR of 99mTc/Re-labeled Small Molecule Prostate Specific Membrane Antigen Inhibitors with Novel Polar Chelates. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, (5), 1557-1563 (2013).
  22. Maresca, K. P., et al. Small Molecule Inhibitors of PSMA Incorporating Technetium-99m for Imaging Prostate Cancer: Effects of Chelate Design on Pharmacokinetics. Inorg. Chim. Acta. 389, 168-175 (2012).
  23. Bartholomä, M. D., et al. Insight into the Mode of Action of Re(CO)3 Thymidine Complexes. ChemMedChem. 5, (9), 1513-1529 (2010).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics