Author Produced

في فيفو التصوير المتعدد الوسائط، وتحليل للماوس المستحثة بالليزر طراز نيوفاسكولاريزيشن تشورويدال

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

نقدم هنا، فائدة التصوير الطولي في فيفو في متابعة التغييرات الشكلية من neovascularization تشورويدال المستحثة بالليزر في الفئران.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Ragauskas, S., Kielczewski, E., Vance, J., Kaja, S., Kalesnykas, G. In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model. J. Vis. Exp. (131), e56173, doi:10.3791/56173 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Neovascularization تشورويدال المستحثة بالليزر (المسيحي) نموذج راسخة لتقليد النموذج الرطب لكبر السن البقعي (AMD). في هذا البروتوكول، ونحن نهدف إلى توجيه القارئ ليس ببساطة من خلال الاعتبارات التقنية لتوليد آفات المستحثة بالليزر لتحريك عمليات نيوفاسكولار، ولكن بدلاً من التركيز على المعلومات القوية التي يمكن الحصول عليها من الطولية النقل المتعدد الوسائط المجراة في التصوير طوال فترة المتابعة.

الماوس المستحثة بالليزر النموذجي الذي تم إنشاؤها بواسطة إقامة ليزر صمام ثنائي. واستخدمت تقنيات التصوير المتعدد الوسائط في فيفو لرصد التعريفي المسيحي والتقدم والتراجع. أولاً، أنجز التصوير المقطعي التماسك الضوئية المجال الطيفي (SD--أكتوبر) فورا بعد اللايزر للتحقق من فاصل غشاء بروخ في. وأكد اللاحقة في فيفو التصوير باستخدام الأوعية فلوريسسين (اتحاد كرة القدم) الضرر ناجحة من غشاء بروخ لمن صور المسلسل المكتسبة على مستوى تشورويدال. متابعة طولية من الانتشار المسيحي والانحدار في أيام 5 و 10 و 14 بعد اللايزر أجرى باستخدام كل من التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر واتحاد كرة القدم. ويرد بسيطة وموثوق بها الدرجات من راشح المسيحي ليسيونس من الصور اتحاد كرة القدم. التجزئة التلقائية لقياس مجموع سمك الشبكية، جنبا إلى جنب مع تطبيق عيار يدوي لقياس سماكة الشبكية في مواقع متعددة، والسماح بتقييم غير متحيز لوجود وذمة. وأخيراً، النسيجي التحقق من الذي تتم باستخدام تلطيخ إيسوليكتين GS-IB4 على فلاتمونتس تشورويدال. تلطيخ ثريشولديد، ومنطقة إيسوليكتين-إيجابيا يحسب مع إيماجيج.

هذا البروتوكول مفيدة بشكل خاص في دراسات المداواة التي تتطلب عالية-الإنتاجية-مثل الفحص الباثولوجي المسيحي أنها تتيح سرعة، متعدد الوسائط، وتصنيف موثوق بها ذمة الشبكية وأمراض متعددة. وبالإضافة إلى ذلك، تمكن عالية الدقة التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر تسجيل بصمات المرضية الأخرى، مثل تراكم السوائل سوبريتينال أو إينتراريتينال. ومع ذلك، هذا الأسلوب لا يوفر إمكانية أتمتة تحليل حجم المسيحي من صور التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر، الذي يجب أن تتم يدوياً.

Introduction

أول محاولة ناجحة لتقليد علم الأمراض البشرية المسيحي في القوارض اتضح منذ ثلاثة عقود تقريبا مع ليزر كريبتون في لونغ-إيفانز الفئران1. وبعد ذلك، استخدمت ليزر كريبتون لكسر غشاء بروخ لسلالة الماوس الأكثر شعبية، C57BL/6J2،،من34. تم التحقق من معدل نجاح الاستقراء متعددة مع اتحاد كرة القدم والبقع النسيجي. تطور سريع لأساليب التصوير موسع، مثل OCT، عزز نمو مجال القوارض نماذج الإكلينيكية. القدرة على رصد التغييرات الشكلية في الشبكية في نقاط زمنية متعددة في العين نفسها إلى حد كبير يسهم في الحد استخدام الحيوانات، وزيادة الكفاءة في الدراسات التجريبية. التقييم النسيجي لآفات متعددة بدلاً من ذلك واضحة، ويتطلب وضع العلامات لنمو الأوعية الدموية غير طبيعي حول الموقع الإدارة الليزر، والحصول على الصور، وتقدير مساحة/وحدة التخزين باستخدام برنامج تحليل صورة. وفي المقابل، يعرض في فيفو طرائق التصوير تحاليل أكثر تعقيداً من أمراض متعددة وتفسيرها.

هنا نقدم طريقة بسيطة وسريعة نسبيا للصف التعريفي، والتدرج، والانحدار الذي استخدام FA، SD--أكتوبر، والأسلوب الآلي تجزئة في الماوس الليزر المستحثة المسيحي النموذجي.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

جميع الحيوانات يعاملون وفقا "بيان آرفو" "استخدام الحيوانات" في أوفثالميك والبحث الرؤية "توجيه الجماعة الأوروبية" 86/609/EEC للتجارب على الحيوانات، باستخدام البروتوكولات المعتمدة ويرصدها المجلس تجربة الحيوان في "فنلندا".

1-المستحثة بالليزر الماوس المسيحي نموذج 5

  1. فحص عيون الحيوان الميكروسكوب لأي شذوذ.
  2. وزن الماوس.
  3. حساب وإعداد مبلغ مناسب للمسكنات لاستخدام، استناداً إلى وزن الحيوان، مثل خليط من الماء المقطر (محلول كلوريد الصوديوم 0.9%) بنسبة 1:1.5:2.5، أو الكيتامين (40-75 مغ/كغ)، ميديتوميديني (1 مغ/كغ) والكيتامين (75 ملغ/كغ) إكسيلازيني (5 ملغ/كغ)، والماء المقطر (محلول كلوريد الصوديوم 0.9%) بنسبة 5:1؛ 1:2. ماوس ز 20، حقن 0.1 مل مخلوط.
  4. حقن مخدر إينترابيريتونيلي.
  5. ضع الماوس مرة أخرى إلى القفص وانتظر حتى يتم تخديره من الحيوان. تأكيد هو تخديره الماوس بشكل صحيح بسبب الافتقار إلى منعكس الدواسة.
  6. ضمان استخدام الليزر سلامة معدات الحماية الشخصية.
  7. قم بتشغيل مصباح شق وليزر صمام ثنائي 532 نانومتر.
  8. إزالة الماوس من القفص والمكان على منصة التدفئة.
  9. تطبيق قطره واحدة من تروبيكاميدي لتمدد الحدقة. الانتظار لمدة 3-5 دقيقة لتمدد الحدقة الكاملة (3 مم).
  10. ضع الماوس على المسرح مصباح الشق.
  11. ضع قطره واحدة من جل السائل أوبثالميك على ساترة إلى أبلاناتي القرنية.
  12. توجيه العين الماوس مع رأس العصب البصري في المركز.
  13. تعيين السلطة الليزر إلى 100 ميغاواط، والمدة إلى 100 مللي ثانية، وحجم البقعة إلى 50 ميكرومتر.
  14. وتركز شعاع الليزر على ظهارة صباغ الشبكية (RPE).
  15. جعل ثلاث طلقات الليزر إلى عين واحدة عن طريق تجنب الأوعية الدموية الشبكية في موقع مثالي في 4 و 8 و 12:00 م مواقع حول العصب البصري، على التوالي. فحص قاع العين بعد كل الليزر لقطات لعدم وجود نزيف الشبكية. العين كونترالاتيرال بمثابة عنصر تحكم غير lasered.
  16. تجاهل الماوس ساترة والمكان مرة أخرى على منصة التدفئة.
  17. تطبيق قطره واحدة من قطرات جل شماعة في كلتا العينين.

2-التنمية المستدامة-OCT 6،7

  1. ضع الماوس في مرحلة المحاذاة القوارض، وشل الرأس.
  2. قم بمحاذاة العدسة منظومة التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر (مثلاً، R2200 انفيسو بيوبتيجين/إيكا) لمواجهة العين للتصوير في فيفو باستخدام وحدات تحكم المرحلة X و Y.
  3. إجراء مسح SD، تشرين الأول/أكتوبر للتحقق من فواصل غشاء بروخ في: مجرد SD-OCT فحص العين كله، يدوياً نقل خط مرجعي في مواقع لاسيريد. فواصل غشاء بروخ في ينبغي أن تكون واضحة للعيان في المناطق lasered (انظر الشكل 1).

3-فلوريسسين الأوعية 7،،من89

  1. إزالة الماوس مع الحامل، ووضعه على نظام اتحاد كرة القدم (مثلاً، هايدلبرغ سبيكتراليس HRA2).
  2. التركيز على الليزر حرق مناطق قاع العين باستخدام طريقة انعكاس الأشعة تحت الحمراء مع رأس العصب البصري في منتصف نافذة عرض.
  3. حقن 0.1 مل ملح الصوديوم فلوريسسين 5% لماوس ز 20 تحت الجلد أو إينترابيريتونيلي.
  4. وتركز على مستوى تشورويدال.
  5. التقاط صورة من مستوى التركيز تشورويدال.
  6. إعادة التركيز على مستوى الشبكية وتأخذ صورة.
  7. انتظر 30 ثانية وكرر الخطوات 3، 3، 4-6.
  8. إزالة الماوس من الحامل ووضعه على منصة التدفئة.
  9. عكس التخدير بخصم α2 ميديتوميديني، أتيباميزولي (0.5 ملغ/كغ، والقائمة)، أو الانتظار لاستعادة الحيوانات من التخدير.
  10. كرر في فيفو SD، تشرين الأول/أكتوبر، واتحاد كرة القدم التصوير في تخديره من الحيوانات في متابعة أيام 5 و 10 و 14.

4. متعددة الدرجات

  1. درجة ضرر غشاء بروخ لمن أكتوبر والصور تشورويدال FA اتخاذها فورا بعد اللايزر في اليوم 0 كما يلي:
    0--غشاء بروخ لعدم تضرر
    1-نجاح تلف غشاء بروخ
  2. الصف وجود المسيحي من البقع lasered كان التسرب كما لوحظ بمقارنة ديناميات إشارة فلوريسسين في سلسلة من الصور فا الشبكية كما يلي:
    0--المظهر الطبيعي لشبكية العين
    تلوين باهتة 0.5-التسرب
    1.0-راشح متعددة المجالات
    ملاحظة: استخدام التصوير أكتوبر لتأكيد إضافية متعددة أو في كرة القدم مشكوك فيها حيث يوحي وجود السوائل إينتراريتينال في أكتوبر صور متعددة الدرجات.

5-قياسات سمك الشبكية

  1. استخدام برمجيات تجزئة تلقائية لقياسات سمك الشبكية. التأكد من أن يعتبر سمك الشبكية الكلي، كسمك كل الطبقات من طبقة الألياف العصبية RPE (مواقع القياس الصحي)، أو بخط وهمي يربط RPE المحيطة بموقع الضرر (lasered المواقع) (انظر الشكل 7).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

فقاعة أو سوبريتينال النزيف فورا بعد اللايزر غير مرئي دائماً. ولذلك، أهمية خاصة للتحقق من الأضرار لغشاء بروخ في SD، تشرين الأول/أكتوبر. ويبين الشكل 1 مثال على تصوير أكتوبر عند نقاط زمنية مختلفة بعد الليزر.

Figure 1
الشكل 1 : أكتوبر أون الوجه رأي العين النظارة (صورة كبار الشخصيات) يظهر ثلاثة مجالات lasered المبينة في دوائر الأبيض والأخضر والأحمر- أكتوبر ب-مسح الصور أخذت السابقة اللايزر (الأساس)، مباشرة بعد اللايزر للتحقق من فاصل غشاء بروخ في (أيام 0، أسهم أشر إلى موقع الضرر)، و 5 و 10 و 14 يوما بعد إقامة الليزر. كما يمكن أن يرى من المنطقة المحددة باللون الأبيض (الصف الأول من الصور)، الذي لم تتطور في وقت لاحق تيميبوينتس. المنطقة المحددة باللون الأخضر والأحمر وضع المسيحي، التي تم الكشف عنها في متابعة يوم 5. ومع ذلك، في تيميبوينتس يوم 10 و 14، تراجعت هذه الآفات متعددة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

وتظهر الأرقام 2 و 3 تصوير المسلسل باستخدام كرة القدم، الذي أكد الأضرار ناجحة من غشاء بروخ في جميع المواقع الثلاثة في اليوم 0 ماوس C57BL/6jRj عمرها 10 أسبوع ذكور.

Figure 2
الشكل 2 : تصوير مسلسل اتحاد كرة القدم اتخذ كل 20 s (الصور 1 إلى 18) على مستوى تشورويدال فورا بعد الليزر الإدارة. الأسهم البيضاء في الصورة 1 نقطة إلى مواقع lasered، التي تبين تسرب fluorescein في وقت لاحق تيميبوينتس (الأسهم البيضاء في صورة 18). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3 : تصوير مسلسل اتحاد كرة القدم اتخذ كل 20 s (الصور 1 إلى 18) على مستوى الشبكية مباشرة بعد الليزر الإدارة. هو المجال الذي يحتوي على التسرب فلوريسسين والدرجات من 1 (راشح المسيحي) أشار السهم الأبيض في الصورة 18. ملاحظة كثافة متزايدة، فضلا عن منطقة fluorescein إيجابيا، أثناء تيميكورسي لكرة القدم التصوير (السهم الأبيض في الصور 8 و 11). تم تصنيف مجالين المبينة باللون الأبيض في الصورة 18 كوجود إشارة فا خافت (الدرجات 0.5). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

بالإضافة إلى تصنيف الأمراض المسيحي، التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر مفيد أيضا تكشف عن معلومات إضافية في موقع الآفة، مثلاً، وجود سائل سوبريتينال، وذمة، والانحدار الذي. ويبين الشكل 4 بصمات المرضية الرئيسية المسيحي المستحثة بالليزر في الفئران.

Figure 4
الشكل 4 : الباثولوجيا "الطيفي المجال البصري التماسك التصوير المقطعي التصوير من المسيحي"- SD--أكتوبر يوفر علم أمراض متعددة مفصلة داخل نسيج الشبكية، كما يتبين من هذه الصور التمثيلية على تندب الأنسجة، وتكوين المسيحي، وتراكم السائل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

وذمة بقعيه واحدة من السمات المميزة المرضية الرئيسية للنموذج أية أم دي الرطب في البشر. في النموذج الذي المستحثة بالليزر، يمكن تقييم سمك الشبكية باستخدام تجزئة الآلي. قياس دليل لمواقع مختارة lasered مطلوب لقياس سماكة الشبكية في موقع المسيحي. يبين الشكل 5 مثال على تقرير التي تم إنشاؤها بعد تجزئة الآلي.

Figure 5
الشكل 5 : التحديد الكمي لسمك الشبكية. سمك الشبكية مقيسة بتجزئة الآلي الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

استخدام تجزئة الآلي طريقة سريعة لتقديم لمحة عامة عن سمك الشبكية (الجدول 1). 6A الأرقام و 6B تظهر أمثلة الممثل لتجزئة الآلي من منطقة شبكية سليمة ومن منطقة الشبكية مع أمراض متعددة، على التوالي. على الرغم من أخطاء طفيفة في التمييز بين طبقات الشبكية الفردية، عموما، تسلم البرنامج موثوق سمك الشبكية الكلي في الفئران المصطبغة.

Figure 6
الرقم 6 : الآلي تجزئة طبقات الشبكية. الآلي تقسيم المنطقة الشبكية صحية (A) والشبكية التي تحتوي على المسيحي (العلامة النجمية في الصورة ب). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

من أجل تقييم سمك الشبكية في مناطق lasered، وتم قياس كل منطقة lasered يدوياً كما يلي: يعتبر سمك الشبكية مجموع سماكة كل الطبقات من طبقة الألياف العصبية إلى خط وهمي يربط RPE المحيطة بالموقع الضرر (الشكل 7 و الجدول 1).

المنطقة يوم 5 يوم 10 14 يوم
مجموع سمك الشبكية، ميكرومتر 218±7.8 220±7.2 221±9.8
منطقة lasered 1 200 204 214
منطقة lasered 2 226 217 220
منطقة lasered 3 222 223 227
وترد البيانات mean±SD

الجدول 1. مجموع سمك الشبكية وسمك الشبكية في مواقع متعددة خلال متابعة 14 يوما حسبما تقرره تجزئة الآلي باستخدام البرمجيات إينفيفوديفير (v. 3.0.8).

Figure 7
الشكل 7 : دليل قياس سمك الشبكية في منطقة lasered مع أمراض متعددة. الخط الأصفر يشير إلى مجموع سمك الشبكية من طبقة الألياف العصبية إلى طبقة RPE وهمي (الخط الأسود) في موقع الإدارة الليزر. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

الأشيع، تأكدت الآفات متعددة باستخدام العلامات إيسوليكتين GS IB4 (الشكل 8 أ). تم استخدام برمجيات تحليل الصورة "ي صورة" لحساب منطقة الآفة متعددة (الشكل 8B).

Figure 8
الشكل 8 : تحليل النسيجي. يمكن تحديده كمياً وصمة عار نسيجية الآفة متعددة من فلاتماونت تشورويدال (باللون الأخضر، A) باستخدام مستوى العتبة في "الصورة ي" (ب). شريط مقياس ألف 50 ميكرومتر. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
 

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ويقدم التصوير المتعدد الوسائط أدوات قيمة لتقييم أمراض متعددة. وقد عرضنا هنا بروتوكولا تصوير تتألف من اتحاد كرة القدم، التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر، وتجزئة التلقائي للتقييم السريع واستنساخه، وموثوق بها من أمراض متعددة. فاصل غشاء بروخ في بعد أن أكدت الإدارة الليزر. وباﻹضافة إلى ذلك، كما يسمح باستخدام SD، تشرين الأول/أكتوبر في هذه المرحلة التصور فوري لنزيف إينتراريتينال وسوبريتينال المحتملة، التي يمكن الخلط بين تفسير النتائج. تم تصنيف الثقوب الشبكية بناء على إشارة فلوريسسين من الصور اتحاد كرة القدم. استخدام SD، تشرين الأول/أكتوبر قدم وصفاً أكثر تفصيلاً لأمراض متعددة. وعلاوة على ذلك، أبرز تحليل التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر طولية في نقاط زمنية مختلفة طوال فترة المتابعة الاختلافات الزمنية في علم الأمراض التي ستظل بعيدة المنال إذا كان الاعتماد على كرة القدم وحدها.

وتم قياس سمك الشبكية إجمالي استخدام تجزئة الآلي. وتم قياس سمك الشبكية في مواقع متعددة وكان المستحث يدوياً. يتم التحقق من تقييم النسيجي فلاتماونت تشورويدال، ومنطقة neovascularization يقاس باستخدام برمجيات تحليل الصورة "صورة ج."

الشفافية المناسبة للمحور البصري أمر حاسم لنجاح أداء البروتوكول المقدم. جفاف القرنية وتشكيل إعتام عدسة العين، هي العوامل الرئيسية التي تشارك في استكشاف الأخطاء وإصلاحها. ولذلك، حالما يحصل تخديره من الماوس، العيون ينبغي أن تكون باستمرار رطب مع الدموع الاصطناعية أو هلام للحفاظ على ترطيب مناسب للقرنية. ينبغي أن يقوم البروتوكول المقترح تفضيلي في غضون 10 دقيقة من تحريض التخدير. وقت التخدير الموسعة قد يسبب تشكيل إعتام عدسة العين ومنع التصوير في فيفو .

وصف بروتوكول لا تقتصر على الدرجات الرصدية للتقدم الذي يستند إلى تسرب الأوعية الدموية على مستوى الشبكية. يمكن إضافة التقييم الكمي لتسرب الشبكية باستخدام البرمجيات "سبيكتراليس هايدلبرغ"، مما يتيح ترسيم منطقة التسرب، ويوفر البيانات الكمية في المنطقة لمصلحة. وباﻹضافة إلى ذلك، اقترح سليمان والزملاء (2015) مؤخرا حساب حجم المسيحي من في فيفو حصلت الصور OCT باستخدام أسلوب الاهليلجي10. نموذج الاهليلجي الأرجح يدخل التحيز نحو المبالغة في تقدير حجم الآفات كما جرى في معظم الحالات بشكل غير منتظم. ومع ذلك، يوفر الارتباط عالية بين قياسات الحجم من [كنفوكل] تحليل عينات نسيجية والكمي الاهليلجي المقترحة من الصور أكتوبر أدلة على أن الأسلوب أداة قيمة للتقييم الكمي لحجم المسيحي10 .

في الختام، نحن نؤمن بعرض تركيبة مختلفة في فيفو التصوير الطرائق، جنبا إلى جنب مع تجزئة الآلي والتحليل النسيجي، ويقدم التقييم استنساخه وموثوق بها من أمراض متعددة في الدراسات الإكلينيكية. الطريقة يمكن أن تكون مفيدة بشكل خاص لإثبات مفهوم التدخل العلاجي الدراسات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

صاحب البلاغ سيمانتاس راجوسكاس، دكتوراه هو الموظف (باحث) ومساهم في شركة اكسبيريمينتيكا أن يقدم عقد خدمات الأبحاث التي تستخدم النموذج المسيحي الإكلينيكية المستخدمة في هذه المقالة.

إيفا كيلكزيوسكي مقدم البلاغ هو موظف (مهندس تطبيقات البحوث، أكتوبر) Microsystems إيكا التي تنتج نظم التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر المستخدمة في هذه المقالة.

صاحب البلاغ فانس جوزيف موظف (أكتوبر نا مدير المبيعات) لايكا Microsystems تنتج نظم التنمية المستدامة، تشرين الأول/أكتوبر المستخدمة في هذه المقالة. فانس جوزيف هو أيضا رئيس ومدير عام سبيكتيفي، شركة ذات مسؤولية محدودة.

المؤلف سيمون Kaja، دكتوراه هو مستشار رئيس العلمية ومساهم في اكسبيريمينتيكا المحدودة، هي عقد السريري بحوث منظمة عروض التعاقد على خدمات البحوث، الطراز المسيحي الإكلينيكية المستخدمة في هذه المادة بما في ذلك. سيمون Kaja، دكتوراه هو أيضا الرئيس التنفيذي لشركة ك & ف العلمية، شركة ذات مسؤولية محدودة، علوم الحياة، شركة استشارات، ويعمل كالدكتور جون ص وتيريز هاء مولكاهي وهبت أستاذ في طب العيون في "شيكاغو جامعة لويولا"، مدرسة ستريتش للطب. تم استعراض شروط هذا الترتيب وأقرتها "جامعة لويولا شيكاغو" وفقا لسياسة تضارب المصالح.

صاحب البلاغ جيدريوس كاليسنيكاس، دكتوراه هو الموظف (المدير التنفيذي) ومساهم في شركة اكسبيريمينتيكا أن يقدم عقد خدمات الأبحاث التي تستخدم النموذج المسيحي الإكلينيكية المستخدمة في هذه المقالة.

Acknowledgments

المؤلف يود أن يشكر يوليا ناومتشوك (جامعة لويولا شيكاغو) وأجني Žiniauskaitė (اكسبيريمينتيكا المحدودة) للدعم التقني و videographic ممتازة. برنامج أبحاث الدكتور Kaja معتمد من قبل الدكتور جون ص وتيريز هاء مولكاهي وهبت الأستاذية في طب العيون في "جامعة لويولا شيكاغو".

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine (commercial name Domitor) Orion Vnr 01 56 02 Anesthesia
Ketamine Intervet Vnr 51 14 85 Anesthesia
0,9% NaCl B Braun 357 0340 Anesthesia
Xylazine (commercial name Rompun vet) Bayer vnr 14 89 99 Anesthesia
Tropicamide Santen Vnr 04 12 36 Mydriatic agent
Viscotears Alcon Vnr 44 54 81 Lubricant
Systane Alcon  - Lubricant
5% Fluorescein sodium salt Sigma Aldrich F6377-100G Fluoresent agent
Atipamezole (commercial name Antisedan) Orion Vnr 47 19 53 Anesthesia

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dobi, E. T., Puliafito, C. A., Destro, M. A new model of experimental choroidal neovascularization in the rat. Arch. Ophthalmol. Chic. Ill 1960. 107, 264-269 (1989).
  2. Tobe, T., et al. Evolution of neovascularization in mice with overexpression of vascular endothelial growth factor in photoreceptors. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 180-188 (1998).
  3. Seo, M. S., et al. Dramatic inhibition of retinal and choroidal neovascularization by oral administration of a kinase inhibitor. Am. J. Pathol. 154, 1743-1753 (1999).
  4. Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. Animal models of choroidal and retinal neovascularization. Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).
  5. Shah, R. S., Soetikno, B. T., Lajko, M., Fawzi, A. A. A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization. J Vis Exp. (106), e53502 (2015).
  6. Giani, A., et al. In vivo evaluation of laser-induced choroidal neovascularization using spectral-domain optical coherence tomography. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 3880-3887 (2011).
  7. Gong, Y., et al. Optimization of an Image-Guided Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model in Mice. PloS One. 10, e0132643 (2015).
  8. Sheets, K. G., et al. Neuroprotectin D1 attenuates laser-induced choroidal neovascularization in mouse. Mol. Vis. 16, 320-329 (2010).
  9. Hoerster, R., et al. In-vivo and ex-vivo characterization of laser-induced choroidal neovascularization variability in mice. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. Albrecht Von Graefes Arch. Klin. Exp. Ophthalmol. 250, 1579-1586 (2012).
  10. Sulaiman, R. S., et al. A Simple Optical Coherence Tomography Quantification Method for Choroidal Neovascularization. J. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. 31, 447-454 (2015).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics