Author Produced

אין ויוו הדמיה עם מודאלים מרובים וניתוח של עכבר לייזר המושרה חיבור כורוידאלית דגם

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

כאן, אנו מציגים את התועלת של האורך ויוו הדמיה מעקב אחר שינויים מורפולוגיים של לייזר המושרה neovascularization כורוידאלית בעכברים.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Ragauskas, S., Kielczewski, E., Vance, J., Kaja, S., Kalesnykas, G. In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model. J. Vis. Exp. (131), e56173, doi:10.3791/56173 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

לייזר המושרה neovascularization כורוידאלית (CNV) היא דוגמנית ומבוססת לחקות את צורת רטוב הקשורות לגיל ניוון מקולרי (AMD). ב פרוטוקול זה, אנו שואפים מדריך את הקורא לא פשוט על-ידי השיקולים הטכניים של יצירת נגעים לייזר המושרה להנעת תהליכים neovascular, אבל מעדיף להתמקד במידע רב עוצמה ניתן להשיג יחידנית או משולבת האורך אין ויוו הדמיה לאורך כל תקופת המעקב.

עכבר לייזר המושרה CNV המודל נוצר על ידי המינהל לייזר דיודה. עם מודאלים מרובים ויוו טכניקות הדמיה שימשו כדי לפקח CNV אינדוקציה, התקדמות, רגרסיה. ראשית, תחום ספקטרלי טומוגרפיה אופטית קוהרנטית (SD-אוקטובר) בוצע מיד לאחר lasering כדי לוודא הפסקה של הממברנה של ברוך. לאחר מכן ויוו הדמיה באמצעות fluorescein מסתמים (FA) אישר נזק מוצלחת של הממברנה של ברוך מתמונות טורי רכשה באותה רמת חיבור. מעקב האורך של התפשטות CNV ו רגרסיה בימים 5, 10 ו- 14 לאחר lasering בוצעה באמצעות הפא ו- SD-אוקטובר. פשוטה ואמינה לדירוג של דולף leasions CNV מתמונות פא מוצג. פילוח אוטומטיים למדידת עובי הרשתית הכולל, בשילוב עם קליבר ידנית יישום למדידת עובי הרשתית באתרים CNV, לאפשר הערכה לא משוחדת של הנוכחות של בצקת. לבסוף, אימות היסטולוגית של CNV מתבצעת באמצעות isolectin GS-IB4 מכתים על flatmounts חיבור. ההכתמה היא thresholded, אזור isolectin-חיוביות מחושבת עם ImageJ.

פרוטוקול זה שימושי במיוחד לימודי הרפוי הדורשים דמויי תפוקה גבוהה הקרנת CNV פתולוגיה, שכן היא מאפשרת מהר, עם מודאלים מרובים, סיווג אמין של בצקת רשתית לפתולוגיה CNV. בנוסף, רזולוציה גבוהה SD-OCT מאפשר ההקלטה של המחפשים פתולוגיים אחרים, כגון הצטברות נוזלים subretinal או intraretinal. עם זאת, שיטה זו אינה מספקת אפשרות להפיכת ניתוח אמצעי האחסון CNV מתמונות SD-אוקטובר, אשר חייב להתבצע באופן ידני.

Introduction

הניסיון המוצלח הראשון לחקות הפתולוגיה של האדם CNV בחולדות הודגם לפני כמעט שלושה עשורים עם לייזר קריפטון לונג-אוונס חולדות1. לאחר מכן, שימש לייזר קריפטון לפרוץ קרום של ברוך המתח העכבר הפופולרי ביותר,3,2,C57BL/6J4. שיעור ההצלחה של אינדוקציה CNV אומתה עם הפא וכתמים היסטולוגית. התפתחות מהירה של שיטות הדמיה לא פולשנית, כגון OCT, תמכה את הצמיחה של השדה של מכרסמים במודלים פרה. היכולת לעקוב אחרי שינויים מורפולוגיים הרשתית בנקודות זמן מרובים בעיניים אותו משמעותית תורם צמצום הניצול של בעלי החיים ומגביר את יעילות במחקרים ניסיוני. הערכה היסטולוגית של נגעים CNV הוא די פשוט, ודורש תיוג צמיחת כלי דם נורמלי סביב האתר של המינהל לייזר, ייבוא תמונות/שטח בנפח הערכה באמצעות תוכנת ניתוח של התמונה. לעומת זאת, אין ויוו שיטות הדמיה להציג ניתוחים מורכבים יותר של פתולוגיה CNV והפרשנות שלה.

כאן אנו מציגים שיטה פשוטה ומהירה יחסית כיתה אינדוקציה, התקדמות של רגרסיה של CNV באמצעות הפא, SD-אוקטובר, ואת שיטת פילוח אוטומטית העכבר לייזר המושרה CNV מודל.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

כל החיות טופלו לפי המשפט ארוו עבור שימוש של חיות לרפואת עיניים, ומחקר החזון של EC Directive 86/609/EEC לניסויים בבעלי חיים, באמצעות פרוטוקולים אישרה, בפיקוח של חיות ניסוי לוח של פינלנד.

1. לייזר המושרה העכבר CNV דגם 5

  1. לבדוק את העיניים של החיה בעין בלתי מזוינת על חריגות.
  2. שוקלים את העכבר.
  3. לחשב ולהכין כמות מספקת של חומרי הרדמה לשימוש, בהתבסס על המשקל של החיה, למשל תערובת של medetomidine (1 מ"ג/ק"ג), קטמין (75 מ"ג/ק"ג), מים מזוקקים (0.9% NaCl פתרון) ביחס של 1:1.5:2.5, או קטמין (40-75 מ"ג/ק"ג), חריגות השירותים הווטרינריים (5 מ"ג/ק"ג), מים מזוקקים (0.9% NaCl פתרון) ביחס של 1:2. 5:1; עכבר 20 גרם, מזריקים 0.1 מ"ל של תערובת.
  4. להזריק הרדמה intraperitoneally.
  5. הנח את העכבר בחזרה לתוך הכלוב. חכה עד חיה. הוא מורדם. לאשר שהעכבר הוא מורדם כראוי על ידי חוסר רפלקס פדלים.
  6. להבטיח את השימוש בלייזר בטיחות ציוד מגן אישי.
  7. הפעל מנורה שסע ואת 532 ננומטר דיודת לייזר.
  8. הסר את העכבר הכלוב ואת המקום על כרית חימום.
  9. החל טיפה אחת של Tropicamide עבור התרחבות האישון. המתן 3-5 דקות על התרחבות האישון מלא (3 מ"מ).
  10. הנח את העכבר על הבמה מנורת סדק.
  11. במקום טיפה אחת של ג'ל נוזלי עיניים על coverslip כדי applanate הקרנית.
  12. אוריינט את העין העכבר עם ראש עצב הראייה במרכז.
  13. להגדיר את עוצמת הלייזר עד 100 מגה-וואט, המשך ל-100 מילישניות, והגודל ספוט 50 מיקרומטר.
  14. מתמקדים קרן הלייזר אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE).
  15. עושים שלוש יריות לייזר לתוך עין אחת על ידי הימנעות כלי הדם ברשתית ממוקם באופן אידיאלי ב- 4, 8 ו 12 o ' שעון עמדות סביב עצב הראייה, בהתאמה. בדוק את הפונדוס של העין לאחר כל לייזר יריות להיעדרות מדימום ברשתית. העין contralateral משמש פקד ללא lasered.
  16. למחוק את העכבר coverslip ומקום חזרה על כרית החימום.
  17. החל טיפה אחת של פג ג'ל טיפות על שתי העיניים.

2. SD-אוקטובר 6,7

  1. למקם את העכבר הבמה יישור מכרסמים, לשתק את הראש.
  2. יישר את העדשה של מערכת SD-אוקטובר (למשל, Envisu R2200 Bioptigen/Leica) להתמודד עם העין עבור ויוו הדמיה באמצעות בקרי X ו- Y-שלב.
  3. לבצע סריקות SD-OCT כדי לוודא הפסקות של הממברנה של ברוך: לאחר ה-SD-OCT סריקות לעין כל, להעביר באופן ידני את קו הפניה באתרים lasered. הפסקות של הממברנה של ברוך צריך להיות בבירור באזורים lasered (ראה איור 1).

3. fluorescein מסתמים 7,8,9

  1. להסיר את העכבר עם בעל, ומניחים אותו על מערכת ה-FA (למשל, היידלברג Spectralis HRA2).
  2. ההתמקדות ב לייזר לצרוב תחומי הפונדוס של העין באמצעות מצב השתקפות אינפרא-אדום עם ראש עצב הראייה באמצע החלון הצפייה.
  3. מזריקים 0.1 מ"ל של 5% fluorescein מלח נתרן עכבר 20 גרם subcutaneously או intraperitoneally.
  4. מתמקדים רמת חיבור.
  5. קחו תמונה רמת המיקוד חיבור.
  6. מחדש להתמקד ברמת הרשתית, לקחת תמונה.
  7. המתן 30 s וחזור על צעדים 3.4-3.6.
  8. להסיר את העכבר ממחזיק והנח אותו על משטח חימום.
  9. הפוך הרדמה על ידי α2-אנטגוניסט עבור medetomidine, atipamezole (0.5 מ"ג/ק"ג, i.p.) או לחכות בעלי חיים ההתאוששות מן ההרדמה.
  10. חזור ב vivo SD-אוקטובר ו- FA הדמיה בבעלי חיים ומורדמת בימים מעקב 5, 10 ו- 14.

4. CNV לדירוג

  1. כיתה הנזק של הממברנה של ברוך OCT תמונות ותמונות פא חיבור נלקח מיד לאחר lasering ביום 0 כדלקמן:
    0 - הממברנה של ברוך לא נפגע
    1 - נזק מוצלח של הממברנה של ברוך
  2. ציון הנוכחות של CNV מאתרי lasered שהיה זליגת כפי שנצפה על ידי השוואת הדינמיקה של האות fluorescein בסדרה של תמונות פא ברשתית להלן:
    0 - מראה נורמלי של הרשתית
    0.5 - להתעלף מכתים של דליפה
    1.0 - אזורים CNV דולפים
    הערה: השתמש ההדמיה OCT לאישור נוסף של CNV או בספק פא היכן הנוכחות של נוזל intraretinal בתמונות OCT מציע CNV לדירוג.

5. מדידות עובי הרשתית

  1. השתמש תוכנה פילוח אוטומטיות עבור מדידות עובי הרשתית. להבטיח כי נחשב את עובי הרשתית הכולל, כמו העובי של כל השכבות משכבת סיבי עצב RPE (מידה בריאה אתרים), או קו דמיוני המחבר RPE סביב האתר של נזק (אתרים lasered) (ראה גם איור 7).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

בועה או subretinal דימום מיד לאחר lasering אינו תמיד גלוי. לכן, SD-אוקטובר חשוב במיוחד לוודא נזק של הממברנה של ברוך. איור 1 מראה דוגמה של OCT הדמיה בנקודות זמן שונות לאחר לייזר המינהל.

Figure 1
איור 1 : OCT en הפנים תצוגה של העין הפונדוס (VIP תמונה) מציגה שלושה אזורים lasered המתוארים במעגלים לבן, ירוק ו אדום. OCT B-לסרוק תמונות נלקחו מראש את lasering (בסיסית), מיד לאחר lasering כדי לוודא הפסקה של הממברנה של ברוך (0 ימים, חצים הצבע לאתר של נזק), 5, 10 ו- 14 ימים לאחר הלייזר. כפי שניתן לראות מן האזור שתואר בלבן (בשורה הראשונה של תמונות), CNV לא יפתח ב timepoints מאוחר יותר. האזור המתוארים ירוק ואדום פיתח CNV, אשר זוהה על המשך טיפול יום 5. עם זאת, ב- timepoints היום 10 עד 14, נגעים CNV נסוגה לאחור אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

דמויות 2 ו- 3 מראים הדמיה סדרתי באמצעות הפא, אשר אישר נזק מוצלחת של הממברנה של ברוך בשלושת ביום 0 עכבר זכר בן שבוע 10 C57BL/6jRj.

Figure 2
איור 2 : הדמיה פא טורי נלקח כל 20 s (תמונות 1 עד 18) ברמת חיבור מיד לאחר לייזר המינהל. החצים הלבנים בתמונה 1 נקודה לאתרים lasered, אשר במופע fluorescein זליגת מאוחר יותר timepoints (החצים הלבנים בתמונת 18). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 3
איור 3 : הדמיה פא טורי נלקח כל 20 s (תמונות 1 עד 18) ברמת הרשתית מיד לאחר לייזר המינהל. אזור CNV שיש דליפה fluorescein, עם ציון של 1 (דולפים CNV) הוא הצביע על ידי החץ הלבן בתמונה 18. הערה מציידי גדל והולך, כמו גם אזור חיובית fluorescein, במהלך timecourse של פא הדמיה (חץ לבן בתמונות 8 ו-11). שני האזורים המתוארים הלבן בתמונה 18 דורגו כבעלי אות פא חלש (לדירוג 0.5). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

בנוסף לדירוג של פתולוגיה CNV, SD-אוקטובר הוא גם שימושי לחשוף פרטים נוספים באתר הנגע, למשל, נוכחות של נוזל subretinal, בצקת CNV רגרסיה. איור 4 מציג את מבוקשם פתולוגיים הראשי של לייזר המושרה CNV בעכברים.

Figure 4
איור 4 : פתולוגיה ספקטרלי תחום אופטית קוהרנטית טומוגרפיה הדמיה של CNV. SD-אוקטובר מספק פתולוגיה CNV מפורט בתוך רקמת רשתית, כפי שניתן לראות מן הדימויים נציג על הצטלקות רקמות, היווצרות CNV והצטברות נוזלים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

בצקת מקולרית נמנה מבוקשם פתולוגיים הראשי של טופס AMD רטוב אצל בני אדם. במודל CNV לייזר המושרה, עובי רשתית שניתן להעריך באמצעות פילוח אוטומטית. מדידה ידנית של אתרים נבחרים lasered נדרש כדי למדוד את עובי הרשתית באתר של CNV. איור 5 מראה דוגמה של דוח שנוצר לאחר פילוח אוטומטית.

Figure 5
איור 5 : כימות של עובי הרשתית. עובי רשתית כפי שנמדדה על ידי פילוח אוטומטית אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

השימוש של פילוח אוטומטיות היא דרך מהירה כדי לספק מבט כולל על עובי הרשתית (טבלה 1). דמויות 6A 6B מציגות דוגמאות מייצגות של פילוח אוטומטית אזור ברשתית בריא ומן האזור ברשתית עם פתולוגיה CNV, בהתאמה. למרות אי דיוקים קלים שנמצאו הבחנה שכבות הרשתית בודדות, הכוללת, התוכנה מזהה בצורה אמינה את עובי הרשתית הכולל בעכברים פיגמנט.

Figure 6
איור 6 : אוטומטית פילוח של שכבות הרשתית. פילוח אוטומטיות של אזור ברשתית בריא (A) ואזור ברשתית המכיל CNV (כוכבית בתמונה B). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

על מנת להעריך את עובי הרשתית-lasered אזורים, בכל אזור lasered נמדדה באופן ידני להלן: עובי הרשתית סה כ נחשב העובי של כל השכבות משכבת סיבי עצב אל קו דמיוני המחבר RPE סביב האתר של נזק (איור 7 , טבלה 1).

אזור יום 5 יום 10 יום 14
עובי רשתית הכולל, μm 218±7.8 220±7.2 221±9.8
Lasered אזור 1 200 204 214
אזור lasered 2 226 217 220
אזור lasered 3 222 223 227
הנתונים מוצגים כמו mean±SD

טבלה 1. עובי רשתית הכולל ועובי הרשתית באתרים CNV במהלך מעקב של 14 יום כפי שנקבע על ידי פילוח אוטומטית באמצעות תוכנת inVivoDiver (v. 3.0.8).

Figure 7
איור 7 : מדידה ידנית של עובי הרשתית באזור lasered עם פתולוגיה CNV. קו צהוב מציין את עובי רשתית הכולל משכבת סיבי עצב אל רובד RPE דמיוני (קו שחור) באתר של מינהל לייזר. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

בהיסטולוגיה, נגעים CNV אומתו באמצעות תיוג isolectin GS-IB4 (איור 8A). תוכנת ניתוח תמונה תמונה J שימש כדי לחשב את השטח של הנגע CNV (איור 8 ב').

Figure 8
איור 8 : ניתוח היסטולוגית. כתם היסטולוגית של הנגע CNV מ flatmount חיבור (בירוק, A) ניתן לכמת באמצעות קביעת סף התמונה J (B). סרגל קנה מידה עבור A הוא 50 μm. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
 

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

הדמיה עם מודאלים מרובים מציע כלי רב ערך עבור הערכה פתולוגיה CNV. כאן הצגנו פרוטוקול הדמיה המורכב של הפא, SD-אוקטובר, פילוח אוטומטית על הערכה מהירה, לשחזור ואמין של הפתולוגיה CNV. הפסקה של הממברנה של ברוך לאחר לייזר הניהול אושר. בנוסף, השימוש SD-אוקטובר בשלב זה מותר גם מיידית החזיית אפשרי שטפי intraretinal ו subretinal, אשר עשויים לבלבל את הפרשנות של תוצאות. דליפות ברשתית דורגו בהתבסס על האות fluorescein מתמונות הפא. השימוש SD-אוקטובר מספק תיאור מפורט יותר של הפתולוגיה CNV. יתר על כן, ניתוח SD-אוקטובר האורך בנקודות זמן שונות לאורך כל תקופת מעקב מודגש טמפורלית הבדלים פתולוגיה זה יישאר חמקמק, אם להסתמך על הפא לבד.

עובי רשתית הכולל נמדדה באמצעות פילוח אוטומטית. עובי רשתית באתרים ש-CNV הושרה נמדדה באופן ידני. הערכה היסטולוגית של חיבור flatmount מאומתת, האזור של כורוידאלית נמדד באמצעות תוכנת ניתוח תמונה תמונה ג'

השקיפות הנכונה של הציר חזותי חיוני לביצועים מוצלחת של פרוטוקול שהוצגו. יובש של הקרנית היווצרות של קטרקט הגורמים העיקריים המעורבים בפתרון בקרב אנשי עסקים ותיירים כאחד. לכן ברגע מקבל מרדימים את העכבר, העיניים צריך כל הזמן hydrated עם דמעות מלאכותיות או ג'ל כדי לשמור על לחות נאותה של הקרנית. הפרוטוקול המוצע יש לבצעו מעדיפים בתוך 10 דקות מ- אינדוקציה של הרדמה. זמן ההרדמה מורחב עלול לגרום להיווצרות קטרקט ולמנוע ויוו הדמיה.

פרוטוקול המתואר הוא מוגבל לדירוג תצפיתי של התקדמות CNV המבוסס על כלי הדם דליפות ברמה של הרשתית. הערכה כמותית של דליפה ברשתית ניתן להוסיף באמצעות תוכנה היידלברג Spectralis, אשר מאפשר את התיחום של אזור הנזילה, ומספקת נתונים כמותיים על האזור של עניין. בנוסף, יוסף דרמר ועמיתיו (2015) הציעה לאחרונה חישוב נפח CNV מתמונות ויוו רכשה OCT באמצעות שיטת אליפסואיד10. מודל אליפסואיד מציג סביר הטיה לכיוון מופרזת של אמצעי אחסון של נגעים CNV ברוב המקרים יש צורה לא סדירה. עם זאת, קורלציה גבוהה בין מדידות נפח מניתוח קונאפוקלית של דגימות היסטולוגית המוצע כימות אליפסואיד מתמונות OCT מספק ראיות כי השיטה הוא כלי יקר על הערכה כמותית של נפח CNV10 .

לסיכום, שאנו מאמינים הציג שילוב שונה ויוו הדמיה שיטות, יחד עם פילוח אוטומטיות וניתוח היסטולוגית, מספק הערכה אמינה הדירים לפתולוגיה CNV במחקרים פרה. השיטה יכול להיות שימושי במיוחד עבור הוכחת הרעיון התערבות טיפולית מחקרים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחבר, Symantas Ragauskas, Ph.d. הוא עובד (מדען מחקר) מניות של Experimentica בע מ מציע החוזה שירותי מחקר העסקת המודל CNV פרה להשתמש במאמר זה.

הסופר אווה Kielczewski הוא עובד (מהנדס מחקר יישומי, OCT) של Microsystems לייקה מפיקה מערכות SD-אוקטובר להשתמש במאמר זה.

הסופר ג'וזף ונס הוא עובד (OCT נה מנהל מכירות) של Microsystems לייקה מפיקה מערכות SD-אוקטובר להשתמש במאמר זה. ג'וזף ונס היא גם נשיא, מנכ של Spective, LLC.

הסופר סיימון Kaja, Ph.d. הוא יועץ והמדען הראשי ובעל מניות של Experimentica בע מ, פרה חוזה מחקר ארגון אשר מציע חוזה שירותי מחקר, כולל דגם CNV פרה להשתמש במאמר זה. סיימון Kaja, Ph.d. הוא גם מנכ של K & מדעי P, LLC, מדעי החיים לייעוץ, ומשמש ד ר ג'ון פ ואת תרז אי Mulcahy ניחן פרופסור ברפואת עיניים Stritch הספר לרפואה, אוניברסיטת לויולה שיקגו. תנאי ההסדר הזה יש כבר נבדקו ואושרו על-ידי אוניברסיטת לויולה שיקגו בהתאם למדיניות שלה ניגוד אינטרסים.

המחבר, Giedrius Kalesnykas, Ph.d. הוא עובד (מנכ"ל) מניות של Experimentica בע מ מציע החוזה שירותי מחקר העסקת המודל CNV פרה להשתמש במאמר זה.

Acknowledgments

המחברים רוצה להודות Yuliya Naumchuk (אוניברסיטת לויולה שיקגו), כוכבה משעלי Žiniauskaitė (Experimentica בע מ) עבור תמיכה טכנית, videographic מצוינת. תכנית המחקר של ד ר Kaja נתמך על ידי ד ר ג'ון עמ' תרז אי Mulcahy ניחן כפרופסור במכון עיניים ב אוניברסיטת לויולה שיקגו.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine (commercial name Domitor) Orion Vnr 01 56 02 Anesthesia
Ketamine Intervet Vnr 51 14 85 Anesthesia
0,9% NaCl B Braun 357 0340 Anesthesia
Xylazine (commercial name Rompun vet) Bayer vnr 14 89 99 Anesthesia
Tropicamide Santen Vnr 04 12 36 Mydriatic agent
Viscotears Alcon Vnr 44 54 81 Lubricant
Systane Alcon  - Lubricant
5% Fluorescein sodium salt Sigma Aldrich F6377-100G Fluoresent agent
Atipamezole (commercial name Antisedan) Orion Vnr 47 19 53 Anesthesia

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dobi, E. T., Puliafito, C. A., Destro, M. A new model of experimental choroidal neovascularization in the rat. Arch. Ophthalmol. Chic. Ill 1960. 107, 264-269 (1989).
  2. Tobe, T., et al. Evolution of neovascularization in mice with overexpression of vascular endothelial growth factor in photoreceptors. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 180-188 (1998).
  3. Seo, M. S., et al. Dramatic inhibition of retinal and choroidal neovascularization by oral administration of a kinase inhibitor. Am. J. Pathol. 154, 1743-1753 (1999).
  4. Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. Animal models of choroidal and retinal neovascularization. Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).
  5. Shah, R. S., Soetikno, B. T., Lajko, M., Fawzi, A. A. A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization. J Vis Exp. (106), e53502 (2015).
  6. Giani, A., et al. In vivo evaluation of laser-induced choroidal neovascularization using spectral-domain optical coherence tomography. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 3880-3887 (2011).
  7. Gong, Y., et al. Optimization of an Image-Guided Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model in Mice. PloS One. 10, e0132643 (2015).
  8. Sheets, K. G., et al. Neuroprotectin D1 attenuates laser-induced choroidal neovascularization in mouse. Mol. Vis. 16, 320-329 (2010).
  9. Hoerster, R., et al. In-vivo and ex-vivo characterization of laser-induced choroidal neovascularization variability in mice. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. Albrecht Von Graefes Arch. Klin. Exp. Ophthalmol. 250, 1579-1586 (2012).
  10. Sulaiman, R. S., et al. A Simple Optical Coherence Tomography Quantification Method for Choroidal Neovascularization. J. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. 31, 447-454 (2015).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics