Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Eichhorn, L., Weisheit, C. K., Gestrich, C., Peukert, K., Duerr, G. D., Ayub, M. A., Erdfelder, F., Stöckigt, F. A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (134), e57397, doi:10.3791/57397 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Araştırma kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği sık TAC tarafından indüklenen basınç aşırı fare modelleri dayanır. Transvers aort görselleştirmek için kısmi Torakotomi gerçekleştirmek için standart bir yöntemdir. Ancak, kaburga disseke ve göğüs kapatma sonra ekli olmayan sol Torakotomi açık-göğüs modelleri nedeniyle cerrahi travma solunum fizyolojisi değiştirir. Bunu önlemek için minimal invaziv, kapalı göğüs yaklaşım lateral Torakotomi ile kurduk. Burada aort 2nd interkostal boşluk göğüs boşluklar, girmeden fareyi kurtarmak için daha az travmatik bir yaralanma ile terk yaklaşırız. Açık göğüs TAC yordamlar ile eşit sağkalım oranları için standart laboratuvar ayarları kullanarak bu işlemi gerçekleştirin. Fizyolojik nefes desenleri kapalı göğüs yaklaşımı nedeniyle Bakımı dışında fareler hızlı bir iyileşme süreci kolaylaştırmak için ve travmadan sonra bağışıklık tepkisini azaltmak için daha az invaziv tekniği göründüğü gibi hızlı iyileşme göstererek yarar gibi görünüyor.

Introduction

Fare modelleri genellikle insan hastalıkları1taklit etmek için kullanılır. Transvers aort daralma (TAC) basınç aşırı ikna etmek için kullanılır ve sol ventrikül pituiter2. Açık göğüs TAC modeli farelerde Rockman vd tarafından doğrulandı 3 ve cerrahi işlem DeAlmeida vd tarafından ayrıntılı olarak anlatılan 4. kan dolaşımını daha büyük bir kısmını bu ikinci yordam2olumsuz etkilerini telafi edebilirsiniz çünkü Banding transvers aort abdominal aort daralma ile karşılaştırıldığında daha uygun.

Transvers aort bantlama artan aort ve brachiocephalic arter arter basıncının artması yol açar ama yeterli perfüzyon organlara distal damarlar (Yani sol ortak Karotid arter sol subklavyan bırakır arter ve azalan aort). Bu artan bir kardiyak afterload ve bir yükseltilmiş kalp duvar stres yol açar. Duvar stres daha sonra lif kalınlaşma5nedeniyle azalır. Maladaptation ve sol ventrikül dilatasyonu kardiyak hemodinami sonucu kronik değiştir. Bu şekilde TAC kalp hipertrofisi sonunda kalp yetmezliği için önde gelen bir tekrarlanabilir model oluşturur.

DeAlmeide ve ark. tarafından açıklandığı gibi TAC için Standart prosedür 4 aort diseksiyon ve kaburga veya göğüs kemiği plevral boşluğu yanı sıra mediasten işlenmesi ile kısmi üst Torakotomi ile yaklaşıyor. Bu aort ve yan dalları iyi görebilmek için sağlar. Ne yazık ki, disseke kaburga, hangi onları serbestçe yüzen ve böylece nefes dynamics değiştirmeden bırakır reattached değil.

Biz, bu nedenle, aort yanal bir cerrahi yaklaşım 2nd interkostal boşluk kullanarak bir minimal invazif kapalı-göğüs yaklaşım kurdu. Bu modelin en büyük avantajı kaburga ile bile kesme olmadan TAC gerçekleştirmek için yeteneğidir. Cerrahi travma cilt kesi ve interkostal kaslara diseksiyon ile sınırlıdır. Bu yordam travma kendisini en aza indirir ve yeterli göğüs çalışma düzenini sağlamak için yardımcı olur.

Burada ayrıntılı adım adım bir yordam veya tahmin edilen toplam üst Torakotomi yapılmadan farelerde TAC ameliyatı gerçekleştirmek için açıklar. Yüksek frekans Doppler TAC başarısı daha önce 6,7açıklandığı gibi emin olmak için kullanılmıştır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Bu iletişim kuralı için hayvan deney LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Genel olarak, bu yordam yetişkin fareler üzerinde gerçekleştirilir > 10 hafta-in yaş. Ancak, genç hayvanlar üzerinde de bu ameliyatı gerçekleştirmek mümkündür. Cerrahi alet kullanmadan önce sterilize ve aseptik koşullar altında gerçekleştirilecek tüm adımlardır.

1. anestezi ve entübasyon indüksiyon

  1. Buprenorfin 0,1 µg/g vücut ağırlığı intraperitoneally ağrı için enjekte. 0.1 mg/kg buprenorfin her 8 h mayi enjeksiyonlari önümüzdeki üç gün ameliyat sonrası için yineleyin.
  2. İndüksiyon için fareyi isoflurane 3.0 Vol % 1 L/min bir oksijen akışı ile ayarlayın Buharlaştırıcı bağlandığı bir anestezi indüksiyon kutuya yerleştirin.
  3. Derin narkoz bir dokunsal uyarana inducing tarafından emin olun.
    Not: Artış Vol % isoflurane ilâ %5, anestezi indüksiyon başarısız olur veya narkoz yeterince derin değil.
  4. Refleks devamsızlık emin olmak için fare kuyruk tutam. Refleksleri tam olmaması durumunda, fareyi en iyi havalandırma kurulum için tartmak (bkz. 1,12).
  5. 37 ° c prosedürü boyunca vücut ısısını korumak için bir ısı kontrollü ameliyat masasına için fareyi hareket ettirin.
  6. Fare burun narkoz korumak için anestezi indüksiyon kutuya bağlı plastik bir koni yerleştirin.
  7. Fare üst kesici dişler naylon dikiş ile düzeltmek. Bir yapışkan bant ile ekstremitelerde bağlayacaktın.
  8. Yeterli bir narkoz yeniden sağlamak için pens ucu ile arka pençe üzerinde basınç uygulayın. Bir geri çekilme, yokluğunda refleks aşağıdaki adımlara devam edin.
    Not: anestezi indüksiyon başarısız olur veya narkoz yeterince derin değil isoflurane birim % artırmak ve para çekme refleks olmaması için bekleyin.
  9. Steril oftalmik yağ kuruma anestezi altında önlemek için kornealar yerleştirin.
  10. Rektal travması rektal sonda yağlayın. Çekirdek ısısı 37 ° c emin olmak için bir rektal sıcaklık probu takın
  11. Boğaz ve üreticinin yönergelerine göre depilatory krema ile üst göğüs depilate. Krem 1 dakika sonra silin. Gerekiyorsa, başarılı kadar bu adımı yineleyin.
    Not: kanama durumunda pamuk uçlu temizleme bezi kullanın.
  12. % 70 etanol ile depilated alanı temizleyin. O zaman povidone-iyot yerel cilt dezenfeksiyon 3 kez ve en az 3 dakika için geçerli.
  13. Fizyolojik parametreler vantilatör ayarlarını. Solunum hızı 150/dak ve deprem birimleri için 8-10 µL/g vücut ağırlığı (BW) için ayarlayın.
  14. Steril eldiven yenisini koymak. Cerrahi mikroskop altında fare yerleştirin ve steril bir delikli örtü fareyi getirin.
  15. Derinin orta hat 3 mm çene kemiğinde aşağı 2nd kaburga altında deşmek. Orta hat ve bağ dokusu submandibular bezinin tanımlar. O zaman açılı juatify forseps yavaşça bezi, orta hat açık açık iki Forseps ile bölmek ve trakeal kas incelemek için kullanın.
  16. Trakea yavaşça para trakeal kasları apart açık açık juatify Forseps ile çekerek hazırlayın.
  17. Boğaz daha kolay entübasyon koşulları için düzeltmek ve yavaşça nefes borusu içinde entübasyon kanülü (OD 1.2 mm) eklemek için Forseps ile dil üzerinde çek. Entübasyon tüpü trake içinde doğrudan görselleştirme ve uygun göğüs hareketi için denetleyerek doğrulayın.
  18. İsoflurane konsantrasyonu % 2 isoflurane 1.0 L/dak ve %100 O2bir akış ile entübasyon sonra ayarlayın.
    Not: solunum hareketleri durmayın veya fareler başlamak dokunaklı, ilk solunum hızı 180/dk'ya kadar artırın. Fare nefes kendiliğinden duruncaya kadar isoflurane konsantrasyon gerekirse, %3.5 ikincil olarak artırmak. Sızdırmazlık veya yetersiz dolgu Buharlaştırıcı en sık karşılaşılan sorunlar değerlendirin.
  19. Alternatif olarak, aşağıdaki alt adımlarda önerilen entübasyon gerçekleştirin.
    1. Bir tabloda bir 60 ° açıyla fareyi getirin.
    2. Fare yapışkan bant ile ekstremite bağlamak ve baş yaslanmak.
    3. Soğuk ışık kaynağı doğrudan deri gırtlak yukarıda yerleştirin.
    4. Dil Forseps ile ses telleri görselleştirmek için yavaşça çekin.
    5. Ses telleri bir IV-kanül (24 G) bir plastik tüp takın ve plastik tüp havalandırma ayarları takın.
    6. Solunum entübasyon synchrone göğüs hareketleri tarafından onaylamak için kanül bağlayın.
      Not: solunum hareketleri durmayın veya fareler başlamak dokunaklı, ilk solunum hızı 180 dk başına kadar artırın. İkincil olarak fare nefes kendiliğinden duruncaya kadar gerekirse, isoflurane konsantrasyonu % 3,5 artırın. Sızdırmazlık veya yetersiz dolgu Buharlaştırıcı en olası sorunlar değerlendirin.

2. ameliyat öncesi Doppler ölçüm

  1. Her iki Karotid arter Trakea yatıyordu hangi adjunct yavaşça bağ dokusu ayrı Forseps ile çekerek hazırlayın.
  2. Sağ ve sol Karotis arter 45 ° den küçük bir açı, 20 MHz Doppler sonda bazı steril ultrason jeli ile ucu yerleştirin.
  3. Yavaş yavaş taşımak için lateral ve medial Doppler sinyali bulmak ve sinyali en iyi duruma getirmek için prob prob döndürün.
  4. Doppler yazılım akım hızları sağ ve sol ortak Karotid arter bir bilgisayarda depolamak ve görüntülemek için kullanın.

3. Torakotomi

  1. Steril Eldivenler, tek tek her fare için birtakım cerrahi sitesi enfeksiyonları önlemek için kullanın.
  2. 2nd interkostal alan bir makas ile aşağı cilt kesi genişletin.
  3. 2nd interkostal alan görsel olarak kaburga sayarak tanımlamak ve sonra açık açık bu alanı juatify Forseps ile nüfuz.
    Not: 1st kaburga köprücük kemiği altında bulunur ve 2nd interkostal alan ilk görünür kaburga (Yani 2nd kaburga) ve 3rd kaburga arasında buldum, çünkü bu nedenle görünür değil.
  4. 2nd interkostal boşluk forseps ipuçları yardımı ile açın ve traktör yerleştirin.
  5. Timus açık bir görüntülemek için ameliyat masasına bağlı bir lastik bant ekartör ayarlayın.
  6. Kanama durumunda pamuk ipucu kullanın ve yüzeysel damarları 2 min için tuşuna basın.

4. bantlama transvers aort

  1. Orta hat ve bağ dokusu tanımlamak için % 200 için büyütme oranını ayarlamak. O zaman açılı forseps yavaşça timus bölmek için kullanın. Aort açıkça görülebilir kadar yağ dokusunda kaldırın.
  2. Bir tünel ile bağlama forseps (bkz. şekil 1) brachiocephalic arter ile sol ortak Karotid arter arasındaki transvers aort altında açılı hazırlayın. 6.0 dikiş sonu iyi forseps yardımıyla tutun ve aort altında iş parçacığı geçmek.
  3. Arch diğer taraftan ikinci Forseps ile iplik al.
  4. İğne olarak kullanmak için bir 27 G 3 mm uzun parça uzunluğu kesilmiş bir TAC-ligasyonu için boşluk ekleyici 19-25 g vücut ağırlığı ve 26 G iğne fareler için ayırıcı olarak Tartım fareler için > 25 g BW.
  5. Dikkatle spacer transvers aort paralel yer.
  6. Çıta üzerinde gevşek bir çift düğüm hazırlamak ve spacer paralel aortaya en iyi yerleşim sağlamak. İlk atış kravat ve hızlı bir şekilde ikinci bir aykırı atmak gerçekleştirmek. Rondela derhal kaldırın.
  7. Sham fare kontrolü için yapmak, aort ligasyonu atlama aynı iletişim kuralını uygulayın.
  8. 2nd interkostal boşluk 6.0 polipropilen sütür ile kapatın. Ne zaman birleştirilmesi (ligasyon) hastalığının damarları özellikle dikkat.
  9. Deri 6.0 polipropilen sütür bir sürekli dikiş deseni kullanarak dikiş.

5. onay transvers aort başarılı ligasyonu

  1. Olarak bölümde 2 45 ° açıyla boynun her iki tarafında bir 20 MHz Doppler sondası yerleştirin.
  2. Her tarafta akım hızları belge.
    Not: Başarılı bir TAC Şekil 2' de gösterildiği gibi Doppler akım hızı tarafından doğrulanabilir. 4-10 sağ ve sol Karotis arter genellikle arasında bir akış hızı oranı yeterli TAC garanti eder (bkz. Şekil 2).

6. kalp hasat

  1. Narkoz adımları 1.2 göre neden. ve 1.3.
  2. Fareyi bir ötenazi odasında getirin ve birim/dakika % 10-30'u yerinden için karbon dioksit akış hızı ayarlayın.
  3. Fareyi bir ameliyat masasında bağlayacaktın. Daha fazla çözümleme için bir kanül ile inferior vena kava makas ve hasat kan ile karın açın.
  4. Diyafram ve sternal kemik güçlü makasla kesmek ve kalp kaldırın.
  5. Tüm arter ve bağ dokusu kalp ağırlığında önce çıkarın.
  6. Sağ ventrikül ve sol ventrikül septum ayırın ve her iki örnekleri tartın.
  7. Her iki doku örnekleri sıvı azot dondur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Başarılı bir TAC basınç aşırı yük ve sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon güvence altına alır. Basınç yükünün bir geçici doğrulama Doppler akım hızı ölçüm Şekil 2' de gösterildiği gibi kullanarak elde edilebilir. Ameliyat öncesi kan akım hızı her iki Karotid arterler eşit olsa da, TAC bir artar kan hızı şu Karotid arter sol ventrikül ve aort yüksek basıncı nedeniyle sonrası stenotic zayıflatılmış kan akım hızı neden neden olur Karotid arter yaptı.

TAC ve onun elde edilen hipertrofisi kalp ağırlık/beden ağırlık oranları (HW/BW; mg/g), gün 3, 6 ve 21 gün ameliyat sonrası C57BL/6J erkek farelerin hesaplanması tarafından doğrulandı. HW/BW oranları önemli ölçüde arttı sigara çizgili fareler için ameliyat sonrası 6 gün karşılaştırıldığında TAC farelerde (4,78 ± 0.18 vs7.66±1,43 mg/g, p < 0.0001). Bu oran 21 gün sonra hemen hemen sürekli (4,8 ± 0,11 vs7.81 ± 0.65 mg/g, p < 0.0001) (bkz. şekil 3). Sağkalım oranı esas olarak intraoperatif kanama üzerinde bağlıdır: altında %5 düzenli uygulaması yoluyla azaltılabilir. 21 gün sonra hayatta kalma oranı esas olarak genotip üzerinde bağlıdır. Hayatta kalma oranı miktarları ile fonksiyonel kalp hastalıklardan acı değil fareler için > % 85. 21 gün sonra sunulan C57BL/6J farelerde sağkalım oranı % 88 olarak gerçekleşti.

Sistolik kan basıncı ve kardiyak fonksiyon entübasyon anestezi ölçülen ve başkaları tarafından açıklandığı gibi bir 1.4 Fransız basınç gürültülerinden kateter8 ile gerçekleştirilen. 9 kalp hızı (HR) sol ventrikül (LV) contractility üzerinde önemli bir etkisi vardır. Aort şeritli ve aort şeritli farelerin kalp oranları (HR) farkı yok edildi (p = 0.1456) (bkz: şekil 4A) 21 gün sonra. Aort sabit bir bant oluşturma (p = < 0.0001) artan bir sistolik kan basıncı (bkz. şekil 4B) 21 gün sonra ölçülen tarafından kanıtlanmış oldu.

Literatürde tartışılan, C57BL/6J fareler ile sistolik disfonksiyon10 eksantrik hipertrofisi TAC sonra geliştirmek için yaygın olarak bilinir. Ayrıca basınç birimi ölçümlerde önemli göründüğü bir artış sol ventrikül çapının bulundu. Son sistolik hacmi 16.25 µL (± 1.935 µL) 23.31 µL (± 1.617µL) yükseldi. Bu değişiklik önemli (p 0.0131 =) (bkz. şekil 4 c). Sonunda diyastolik hacmi 25.81 µl (± 1.852 µL) 31.24 µl ± (1.093 µL) yükseldi. Bu değişiklik önemli (p 0.0268 =) (bkz. şekil 4 d).

Tek yönlü ANOVA Bonferroni'nın posthoc test ederek takip TAC karşılaştırmak ve gruplar sham gerçekleştirildi. Basınç hacim ölçümleri durumunda bir unpaired t-testi ile Welch düzeltme kullanarak grupları karşılaştırıldı. Tüm veriler sunulmuş ± SEM (hata çubukları) demek gibi.

Figure 1
Şekil 1: 2nd interkostal boşluk % 200 büyütmede üzerinden cerrahi yaklaşım. Bu resim cerrahi mikroskop ile çekilmiş ve aort brachiocephalic arter ile sol ortak Karotid arter arasındaki bir iplik ile görüntüler. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Şekil 2: her iki Karotid arter (sham TAC fareler vs.) gelen temsilcisi Geniş puls-wave Doppler görüntüleme. A) Pulsed-dalga TAC önce sol Karotid arter Doppler görüntüleme. B) Pulsed-dalga TAC önce şu Karotid arter Doppler görüntüleme. C) resim ofPulsed-dalga TAC sonra sol Karotid arter Doppler. Kan akım hızı 2A anlamaya göre azalır. D) Pulsed wave Doppler TAC sonra şu Karotid arter. Şekil 2B ile karşılaştırıldığında kan akım hızı artar. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3: kalp ağırlık / vücut ağırlık oranı. Kalp hipertrofisi nedeniyle TAC indüklenen. Bu kalp ağırlık/beden ağırlık oranı önemli bir artış gösterilmiştir. Aort bantlama olmadan fare (i.e. sahte fareler; beyaz çubukları) işletilen TAC fareler (siyah çubuklar) için 3, 6 ve 21 gün sonra karşılaştırıldı. 6 gün sonra TAC kalp ağırlık bedenler ağırlık oranı önemli ölçüde TAC farelerde arttı. Bu etkiyi sadece biraz 21 gün sonra telaffuz edilir. Önemi p için kuruldu = < 0,05. NS = değil önemli; p < 0,0001. Veri ± SEM (hata çubukları) demek gibi sunulmaktadır. n = 6-9 grup başına. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4: hemodinamik parametreler ölçülen (C57BL/6J) farelerde basınç-hacim kateter yolu ile ve TAC olmadan ameliyat sonrası 21 gün: A) nabız (HR) vuruş / dakika (bpm). İK hiçbir fark karşılaştırılabilir narkoz sırasında invaziv ölçüleri gösteren her iki gruplar halinde yapıldı. B) sistolik kan basıncı şu ortak Karotid arter (sBP). SBP önemli artış 21 gün sonra aort sabit bir daralma gösterir. C) son sistolik birimleri (ESV) önemli ölçüde arttı (p 0.0131 =) 21 gün ve gösteri sonra TAC nedeniyle artan bir afterload ventrikül dilatasyonu indüklenen. D) End-diastolik hacim (ESV) artırılır (p = 0.0268 gerektiğini Önemi p için kuruldu = < 0,05. NS = değil önemli; * p < 0,05; p < 0,0001. Veri ± SEM (hata çubukları); demek olarak sunulan n = 8-13 grup başına. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Hipertansiyon TAC nedeniyle hızla başlayan klinik hipertrofisi aortik stenoz veya Hipertansiyon neden farklıdır. Yine de, kalp yetmezliği ikna etmek için küçük hayvan modellerinin kullanımı pek çok avantajı vardır ve bu nedenle, birçok müfettişler11tarafından seçilir. Bu kapalı göğüs model cerrahi tekniği fareler4transvers aort daralma ikna etmek için zaten varolan modeller geliştirir.

Aort altında geçiş için en önemli adımdır. Aort çevresinde çok sıkı dikiş böbrekler gibi önemli organlara kan akımı ölümcül bir azalmasına neden olabilir. Hagen-Poiseuille Kanunu göre esas olarak RADIUS üzerinde bağımlı akışıdır. Bu nedenle, bazı ağırlık adapte çubukları bizim iletişim kuralında kullanılmıştır. Bu yordamı bu model daha evrensel olarak uygulanabilir, özellikle açısından çok genç ya da yaşlı fareler, bireysel deneysel ayarına bağlı olarak yapar.

Cerrahi travma kendisi bir bağışıklık yanıtı neden olmaktadır ve önlemek için mutlak bir minimum azaltılmalıdır etkileri deforme etme. Hızlı kurtarma ve yüksek sağkalım oranları özellikle karmaşık hayvan modellerinde, zorunludur. Tarihsel olarak, insan hastalarda Torakotomi, göğüs kafesi farelerde TAC ameliyattan sonra geri yüklenmez. Bu nedenle, restitüsyon fizyolojik solunum hareketleri için ücretsiz yüzen kaburga, göğüs kemiği için yeniden bağlanmaz nedeniyle sınırlıdır.

Minimal invaziv tekniklerdir TAC için de kullanılmış yanında diğer12,13. Her iki model bir ensizyon ve bir üst kısmi yöntemdir ile aort ulaşılır. Her iki model açık göğüs modeller daha az invaziv olmakla birlikte, cerrahlar kaburga veya aort ulaşmak için göğüs kemiği bölümlerini kaldırmanız gerekir. İnanıyoruz ki bütün göğüs kafesi AIDS daha hızlı iyileşme fizyolojisi bakımı. Bu nedenle, bu protokol zaten varolan iletişim kuralları geliştirir ve cerrahi travma yardımcı olur en aza indirmek.

Bazen açıklanan4,14, olduğu gibi daha apikal cerrahi erişim nedeniyle, ameliyat sonrası bir hiperenflasyon akciğer atelectasis veya pneumothoraces, önlenmesi için gerekli değildir. Bu erişim Ekspiratuar tüp sıkma tarafından varolan modellerinde atelectasis açmak için indüklenen akciğerlerinin bir barotrauma engeller. Bu iletişim kuralı bir bireyselleştirilmiş fizyolojik havalandırma strateji de içerir. O bir tek tek adapte havalandırma barotrauma gibi komplikasyonlar Ventilatör ilişkili azaltmada yardımcı tahminde için cazip olduğunu. Bir ağırlık adapte havalandırma strateji sistemik sitokin üretim üzerindeki etkileri havalandırma tarafından15önlemek için kullanıldı.

Sonuç olarak, bu tekniklerin farelerde kalp hipertrofisi inducing bir alternatif ve geliştirilmiş modeli temsil eder.

Torakotomi kaçınarak travma minimize rağmen iltihap azalma ile ilgili olarak üstün etkisi Bu yayında gösterilmez. Ne yazık ki, hayvanları koruma tarafından belirlenen sınırlamalar bize bu minimal invaziv model yıl için zaten kurulduktan çünkü açık göğüs TAC karşılaştırma için minimal invaziv TAC ile paralel olarak gerçekleştirmek izin vermedi. Bu nedenle, bu ifadeler grubumuza önceki deneyimlerine dayanarak.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Halletmemgereken Frede ve Susanne Schulz onların teknik destek için teşekkür ederiz. Bu çalışma hiçbir fon aldı.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Pressure-volume catheter Millar Instruments, USA SPR-839
Mouse ventilator Harvard Apparatus GmbH, Germany Minivent - TYPE 845
Mouse ventilator Harvard Apparatus GmbH, Germany Y-connection with intubation cannula OD 1.2mm 73-2844
Vaporizer Dräger Medical AG&CO.KG, Germany 19.3 Isofluran-Vaporizer (a newer version is available under catalog number  D-877-2010)
Microscope  Leica Microsystems, Germany MZ 7.5
Light source  Schott AG, Germany KL 1500 LCD
6-0 Prolene Ethicon, USA Polypropylene suture BV-1 9.3 mm 3/8c suture for surgery
Seraflex Serag Wiessner, Germany USP 5/0 schwarz;  IC108000  suture for constriction
Homoeothermic Controlled Operating Tables Harvard Apparatus GmbH, Germany Typ 872/3 HT with tripod stand and homoeothermic controller Type 874; 73-4233
Flexible Rectal Probe Harvard Apparatus GmbH, Germany 1.6 mm OD; 55-7021
Doppler Signal Visualisation Instrument Indus Instruments, USA Doppler Signal Processing Workstation (DSWP) with 20MHz Pulsed Doppler Module
Arruga Intracapsular Forceps Altomed, UK A5400
Doppler Probe Indus Instruments, USA 20MHz Tubing-mounted Probe
Jaffe Lid Retractor Altomed, UK A3513

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol Clifton NJ. 573, 115-137 (2009).
  2. Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16, (3), 349-360 (2004).
  3. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88, (18), 8277-8281 (1991).
  4. deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. Transverse Aortic Constriction in Mice. J Vis Exp JoVE. (38), (2010).
  5. Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle. J Clin Invest. 56, (1), 56-64 (1975).
  6. Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffet, G. E. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34, (6), 892-901 (2008).
  7. Reddy, A. K., et al. Pulsed Doppler signal processing for use in mice: applications. IEEE Trans Biomed Eng. 52, (10), 1771-1783 (2005).
  8. Shioura, K. M., Geenen, D. L., Goldspink, P. H. Assessment of cardiac function with the pressure-volume conductance system following myocardial infarction in mice. Am J Physiol - Heart Circ Physiol. 293, (5), H2870-H2877 (2007).
  9. Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect. JoVE J Vis Exp. (100), e52618 (2015).
  10. Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 292, (5), H2119-H2130 (2007).
  11. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, (2), 138-144 (2009).
  12. Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J Vis Exp JoVE. (121), (2017).
  13. Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. J Vis Exp. (127), (2017).
  14. Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., Baumgarten, G. A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion. J Vis Exp JoVE. (65), (2012).
  15. Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines. Eur Respir J. 17, (3), 488-494 (2001).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics