タイムラプス顕微鏡で分解アクチンの監視

Biology

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Kueh, H. Y. Monitoring Actin Disassembly with Time-lapse Microscopy. J. Vis. Exp. (1), e66, doi:10.3791/66 (2006).

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Abstract

Protocol

  1. ビデオに示すように、フローチャンバーを構築します。パラフィルムでシールがタイトであることを確認して、洗浄カバースリップを使用してください。
  2. 50〜10'のチャンバー内でインキュベートするアクチン結合剤。
  3. ブロッキング蛋白質のガラスカバースリップ上の非特異的結合部位をブロックする。
  4. バッファを重合でG -アクチンに流れることによりチャンバー内のアクチンを重合する。
  5. 過剰なバッファに流れることによってウォッシュ未重合のアクチン。

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Comments

1 Comment

  1. What is the second pair of shorter parafilm strips for? Why do you polymerize in the chamber and how? G-actin in polymerization buffer. Is't that F-actin? What is the actin binding agent and blocking protein and their buffers and their concentrations?

    Reply
    Posted by: Anonymous
    July 28, 2009 - 2:41 PM

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