Ensemble de montage in situ hybridation (WMISH) est une technique courante utilisée pour visualiser l’emplacement des ARN exprimés chez les embryons. Dans ce processus, des sondes d’ARN synthétiquement produits sont d’abord complémentarité lié, ou « hybride », à la transcription de gènes cibles. Immunohistochemistry ou fluorescence sert ensuite de détecter ces hybrides ARN, révélant les tendances spatiales et temporelles de l’expression génique. Contrairement aux traditionnels in situ hybridation techniques qui nécessitent des sections de tissu mince dont les images devront être rassemblés par le calcul, la technique de l’ensemble de montage permet gène patrons d’expression à s’évaluer à l’embryon entier ou de la structure.
Cette vidéo va introduire les concepts de base du Mont toute coloration et détail procédurales étapes clés, y compris sonde conception et production, fixation de l’embryon et coloration et détection des signaux de poteau-hybridation. Téléspectateurs apprendront alors postulez sur autres biologistes du développement comment WMISH aux études de recherche actuel.
Procedure
Ensemble de montage in situ hybridation est une technique puissante qui permet aux scientifiques de comprendre la base moléculaire du développement embryonnaire. « Ensemble-mount » indique que l’embryon entier sera utilisée, non seulement une tranche de tissu. «In situ» est une expression latine signifiant « en position ». Et enfin, « hybridation » désigne la liaison complémentaire d’une molécule d’ARN produite synthétiquement à une transcription de l’ARNm dans les cellules…