Préparation standardisée des suspensions unicellulaires provenant de tissus pulmonaires de la souris en utilisant les dissociateur gentleMACS
Summary
Dissocier les cellules de différents types de tissus spécifiques requiert des paramètres spécifiques à l'agitation des tissus pour obtenir un volume élevé de viabilité, de cellules cultivables. Le Miltenyi gentleMACS dissociateur optimise cette tâche avec un simple, protocole pratique. Dans cette publication, l'utilisation de cet appareil sur le tissu pulmonaire est expliqué.
Abstract
La préparation des suspensions unicellulaires à partir des tissus est une condition importante pour de nombreuses expériences dans la recherche cellulaire. Le processus de dissociation des organes entiers nécessite des paramètres spécifiques afin d'obtenir un nombre élevé de cellules viables d'une manière reproductible. Le dissociateur gentleMACS optimise cette tâche avec un simple, protocole pratique. L'instrument contient les paramètres pré-programmés qui sont optimisés pour la dissociation efficace mais douce d'une variété de types de tissus, y compris les poumons de souris. Dans cette publication, l'utilisation de la dissociateur gentleMACS sur le tissu pulmonaire provenant de souris est démontrée.
Protocol
Discussion
Dans cette vidéo, nous introduisons une nouvelle méthode pour la dissociation des tissus pulmonaires de souris. Nous montrons que la combinaison de traitement mécanique et enzymatique du tissu pulmonaire donné un pourcentage élevé de leucocytes viables et les cellules endothéliales. Plus précisément, la désintégration mécanique du tissu a été réalisée par le dissociateur gentleMACS. Les tubes gentleMACS C comprennent un rotor – Système de stator, qui dissocie les tissus d'une manière douce. La proc…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs sont des employés de Miltenyi Biotec GmbH, Allemagne.
Materials
References
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- Vermaelen, K., Pauwels, R. Accurate and simple discrimination of mouse pulmonary dendritic cell and macrophage populations by flow cytometry: Methodology and new insights. Cytometry Part A. 61A, 170-177 (2004).
