La preparación estandarizada de un solo suspensiones de células de tejido pulmonar de ratón con el disociador gentleMACS
Summary
Disociar las células de tipos específicos de tejido requiere de parámetros específicos para la agitación del tejido para obtener un alto volumen de células viables, cultivables. El Miltenyi gentleMACS disociador optimiza esta tarea con un protocolo simple y práctico. En esta publicación, el uso de este aparato en el tejido pulmonar se explica.
Abstract
La preparación de una sola célula suspensiones de tejidos es un requisito importante para muchos experimentos en la investigación celular. El proceso de disociación de órganos enteros requiere parámetros específicos a fin de obtener un alto número de células viables de manera reproducible. El disociador gentleMACS optimiza esta tarea con un protocolo simple y práctico. El instrumento contiene ajustes pre-programados que se han optimizado para la disociación eficaz, pero suave de una gran variedad de tipos de tejidos, incluyendo los pulmones del ratón. En esta publicación, el uso de la disociador gentleMACS en el tejido pulmonar derivados de ratones se ha demostrado.
Protocol
Discussion
En este video, se introduce un nuevo método para la disociación de los tejidos de los pulmones del ratón. Se demuestra que una combinación de tratamiento mecánico y enzimático del tejido pulmonar producido un alto porcentaje de leucocitos viables y células endoteliales. En concreto, la desintegración mecánica de los tejidos se logró por el disociador gentleMACS. Los tubos de gentleMACS C incluyen un rotor – estator del sistema, que el tejido se disocia de una manera suave. El procedimiento es controlado por la…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Los autores son empleados de Miltenyi Biotec GmbH, Alemania.
Materials
References
- Swanson, K. Flt3-Ligand, IL-4, GM-CSF, and Adherence-Mediated Isolation of Murine Lung Dendritic Cells: Assessment of Isolation Technique on Phenotype and Function. J. Immunol. 173, 4875-4881 (2004).
- Vermaelen, K., Pauwels, R. Accurate and simple discrimination of mouse pulmonary dendritic cell and macrophage populations by flow cytometry: Methodology and new insights. Cytometry Part A. 61A, 170-177 (2004).
