الفصل بين أنواع خلايا من نسيج معين يتطلب بارامترات محددة للتحريض الأنسجة للحصول على كميات كبيرة من الخلايا ، قابلة للحياة زروع. وgentleMACS Miltenyi dissociator يحسن هذه المهمة مع بروتوكول بسيطة وعملية. هذا المنشور هو شرح استخدام هذا الجهاز عن نسيج الرئة.
Abstract
إعداد وحيدة الخلية تعليق من الأنسجة شرطا مسبقا هاما لكثير من التجارب في مجال البحوث الخلوية. عملية الفصل بين أجهزة كله يتطلب المعلمات محددة من أجل الحصول على عدد كبير من خلايا قابلة للحياة بطريقة استنساخه. وDissociator gentleMACS يحسن هذه المهمة مع بروتوكول بسيطة وعملية. الأداة مبرمجة مسبقا يحتوي على الإعدادات التي هي الأمثل للكفاءة ولكن لطيف تفارق من مجموعة متنوعة من أنواع الأنسجة ، بما في ذلك الرئتين الماوس. في هذا المنشور ويتجلى استخدام Dissociator gentleMACS على أنسجة الرئة المستمدة من الفئران.
Protocol
على العمل تحت ظروف معقمة ، فمن المستحسن لتنفيذ كافة الخطوات في تدفق الصفحي هود. 1. المواد HEPES العازلة : 10 مم HEPES – هيدروكسيد الصوديوم الهيدروجيني 7.4 ، 150 مم كلوريد الصوديوم ، 5 ملي بوكل …
Discussion
في هذا الفيديو ، نقدم طريقة جديدة للتفكك أنسجة الرئة الماوس. نظهر أن الجمع بين المعالجة الميكانيكية والأنزيمية للأنسجة الرئة حققت نسبة عالية من الكريات البيض قابلة للحياة والخلايا البطانية. على وجه التحديد ، وقد تحقق تفكك الميكانيكية للأنسجة التي Dissociator gentleMACS. جيم أ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب هم من موظفي شركة محدودة Miltenyi بيوتيك ، ألمانيا.
Jungblut, M., Oeltze, K., Zehnter, I., Hasselmann, D., Bosio, A. Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator. J. Vis. Exp. (29), e1266, doi:10.3791/1266 (2009).