विशिष्ट प्रकार के ऊतकों से अलग कोशिकाओं ऊतक आंदोलन के लिए विशिष्ट मानकों व्यवहार्य, कृषि कोशिकाओं की एक उच्च मात्रा प्राप्त करने के लिए की आवश्यकता है. Miltenyi gentleMACS dissociator एक सरल, व्यावहारिक प्रोटोकॉल के साथ इस कार्य का अनुकूलन. इस प्रकाशन में फेफड़े के ऊतकों पर इस उपकरण का उपयोग समझाया जाता है.
Abstract
ऊतकों से एकल कक्ष निलंबन की तैयारी सेलुलर अनुसंधान के क्षेत्र में कई प्रयोगों के लिए एक महत्वपूर्ण शर्त है. पूरे अंगों को अलग करने की प्रक्रिया के क्रम में विशिष्ट मापदंडों की आवश्यकता है एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीके में व्यवहार्य कोशिकाओं के एक उच्च संख्या प्राप्त करने के लिए. gentleMACS Dissociator एक सरल, व्यावहारिक प्रोटोकॉल के साथ इस कार्य का अनुकूलन कर. साधन पूर्व क्रमादेशित सेटिंग है कि माउस फेफड़ों सहित ऊतक प्रकार की एक किस्म के कुशल लेकिन कोमल हदबंदी के लिए अनुकूलित कर रहे हैं शामिल हैं. इस प्रकाशन में फेफड़ों चूहों से व्युत्पन्न ऊतक पर gentleMACS Dissociator के उपयोग के प्रदर्शन है.
Protocol
बाँझ शर्तों के तहत काम करने के लिए, यह एक लामिना का प्रवाह हुड में सभी चरणों का पालन करने के लिए सिफारिश की है. 1. माल HEPES बफर: 10 मिमी HEPES NaOH 7.4 पीएच, 150 मिमी NaCl, 5 मिमी KCl, 1 मिमी 2 MgCl, 1.8 मिमी 2 CaCl) Colla…
Discussion
इस वीडियो में, हम माउस फेफड़े के ऊतकों के पृथक्करण के लिए एक नई विधि का परिचय. हम बताते हैं कि फेफड़े के ऊतकों के यांत्रिक और enzymatic उपचार के संयोजन व्यवहार्य leukocytes और endothelial कोशिकाओं के एक उच्च प्रतिशत मिले. वि?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों Miltenyi बायोटेक GmbH, जर्मनी के कर्मचारी हैं.
Jungblut, M., Oeltze, K., Zehnter, I., Hasselmann, D., Bosio, A. Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator. J. Vis. Exp. (29), e1266, doi:10.3791/1266 (2009).