В этой статье описываются процедуры анализа экспериментальных метастазов, который используется для определения метастатического потенциала человеческих клеточных линий рака.
Abstract
Метастазы являются основной причиной смерти у онкологических больных. Чтобы понять механизм метастазирования, экспериментальные анализа метастазы был установлен с использованием иммунодефицитных мышей. Данная статья описывает процедуры, связанные в этом анализе, в том числе подготовка проб, внутривенные инъекции, и культивирования клеток от метастазов в легких. Короче говоря, заранее оговоренное число раковых клеток человека были подготовлены<em> В пробирке</em> И непосредственно вводится в обращение иммунодефицитных мышей в их жилах хвост. Небольшое число клеток выживать турбулентности в обращении и расти, как метастазы во внутренних органах, таких как рак легких. Вводили мышам расчленены по истечении определенного периода. Распределение в тканях метастазов определяется по рассекает микроскопом. Количество метастазов в конкретной ткани считается и прямо коррелирует с метастатическим способность вводили раковые клетки. Возникли метастазы изолированных и культурной<em> В пробирке</em> Как клеточных линий, которые часто показывают расширение метастатическим способностями, чем родительские линии, когда вводили опять в иммунодефицитных мышей. Эти высоко метастатической производных стать полезным инструментом для выявления генов или молекулярных путей, которые регулируют метастатической прогрессии.
Protocol
1. Подготовка образцов Расти клетки ~ 70% сливающийся в их конкретных средств массовой информации с факторами роста или FBS (например, DMEM с 10% FBS для МС-1 клеток). Аспирируйте средств массовой информации из пластины и аккуратно мыть несколько раз с 1 х PBS (8 г / л NaCl, 0,2 г / л KCl, 1,15 г / л Na 2 …
Discussion
Метастазы являются основной причиной смерти у онкологических больных. Она включает в себя четыре основных этапа: отряд раковые клетки от их основных локусов, их вступление в обращении (intravasation), их выезда из кровообращения (кровоизлияние), а выживание и рост в далеком органа. Метастазы в…
Acknowledgements
Этот протокол был протестирован и оптимизирован первоначально в лаборатории д-р Ричард Хайнс (MIT). Финансирование предоставляется AWARD NYSTEM IDEA (для LX) и Рут Л. Kirschstein Национальный исследовательский Service Award (для LX).